人牙周膜干细胞与人牙髓干细胞的表型及生长特性比较*

蔡洪桢 贺慧霞 王飞翔 张绍清

人牙周膜干细胞与人牙髓干细胞的表型及生长特性比较*

蔡洪桢 贺慧霞 王飞翔 张绍清

目的：比较人牙周膜干细胞(human Periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)和牙髓干细胞(human Dental pulp stem cells, hDPSCs)的表型及生长特性，为深入研究这两种细胞生物学特性提供依据。方法：组织块法培养获得原代人牙周膜细胞和牙髓细胞，采用有限稀释法分别对两者克隆化培养、分离纯化得到hPDLSCs和hDPSCs，采用倒置相差显微镜观察细胞形态、CCK8法检测细胞生长活性并绘制两者生长曲线、流式细胞技术检测干细胞表面标志物，分析比较两种细胞集落形成率(colony formation ratio，CFR)。结果：hPDLSCs和hDPSCs镜下形态相似，生长曲线均呈“S”形，牙周膜细胞中STRO-1表达hPDLSCs阳性率为15．88±0．48%，牙髓细胞中STRO-1表达hDPSCs阳性率为11．86±0．43%，两者无显著性差异。两种干细胞均阳性表达间充质干细胞( M esenchymal stem cells，MSCs)表面标志物STRO-1、CD29、CD 44、CD90、CD73和血管内皮标志物CD105，其中STRO-1、CD29、CD 90、CD 73、CD 105及CD166百分率达90%以上，阴性表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45。hDPSCs的集落形成率(4．31±0．08%)显著高于hPDLSCs的集落形成率(2．68±0．06%) (P＜0．05)。结论：hPDLSCs和hDPSCs细胞的形态相似，均高表达MSCs表面特异性标志物，hDPSCs的集落形成率显著高于hPDLSCs，说明hDPSC自我更新能力较hPDLSCs强，可为深入研究这两种干细胞提供实验依据。

人牙周膜干细胞；人牙髓干细胞；表型

人牙周膜干细胞(human Periodontal ligament stem cells, hPDLSCs)和牙髓干细胞(human Dental pulp stem cells, hDPSCs)均具有间充质干细胞(Mesenchym al stem cells，MSCs)的生物学特性，有自我更新和多向分化潜能[1,2]，可向成骨样细胞、成软骨样细胞及成脂样细胞等多种细胞分化[3,4]，这种特性使hPDLSCs或hDPSCs替代骨髓基质干细胞修复组织缺损成为可能，从而为干细胞的临床应用提供更多选择，在口腔再生医学研究中有很大的应用前景。……