Notch通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导人牙周膜细胞表达RANKL/OPG的影响*

张驰 陈倩莹 赵雅静 高雳 赵川江

Notch通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导人牙周膜细胞表达RANKL/OPG的影响*

张驰 陈倩莹 赵雅静 高雳 赵川江

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphy romonas gingivalis，Pg)脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)刺激人牙周膜成纤维细胞(human periodon tal ligam ent cells，hPDLCs)后Notch信号通路的表达及其对RANKL/OPG表达的影响。方法：酶消化法结合组织块法原代培养hPDLCs，取第三代至第五代细胞给予0．1、1、10μg /m l Pg-LPS刺激72h，Real-time PCR检测RANKL/OPG m RNA的表达，并选择最佳诱导浓度1μg/m l组，采用Real-time PCR检测Notch通路Notch1-2、Notch4、Jagged-1、Jagged-2、DLL-1以及Hey-1表达受体配体及目的基因表达。随后，以γ-分泌酶抑制剂DAPT预处理hPDLCs 1h，予1μg /m l Pg-LPS刺激72h后，Real-tim e PCR、W estern-B loting检测Notch通路目的基因Hey-1及RANKL/OPG m RNA、蛋白水平的表达。结果：1μg/m l Pg-LPS可显著上调hPDLCs RANKL、Notch通路受体Notch4、配体DLL-1、Jagged-1及目的基因Hey-1的表达(P＜0．05)；而对OPG、Nocth1-2、Jagged-2 m RNA水平表达无明显影响(P＞0．05)。此外，γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制Pg-LPS诱导RANKL及Hey-1 mRNA及蛋白的表达上调，而仅对OPG m RNA表达有影响(P＜0．05)。结论：Notch信号通路参与调控Pg-LPS诱导的h PDLCs RANKL/OPG表达。

牙龈卟啉单胞菌;脂多糖；RANKL/OPG; Notch通路

牙周炎是一种慢性感染性疾病，在老年人群具有很高的发病率，严重影响老年人的口腔和全身健康。牙菌斑生物膜是牙周炎的始动因子，其主要病理特征为牙槽骨破坏吸收等[1]。骨代谢相关蛋白核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand ，RANKL)是与骨吸收密切相关的破骨因子，在牙周炎症反应中发挥诱导破骨细胞分化的作用[2],多种原因可导致牙周组织中RANKL水平发生变化[3]。脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)是牙周炎主要致病菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis，Pg)最重要的致病因子，可促进淋巴细胞炎症因子分泌上调，激活破骨因子表达，导致牙槽骨破坏吸收[4,5]。有文献报道：Pg-LPS可上调牙周膜细胞、成骨细胞RANKL的表达[6]，但是其调控机制尚未明确。……