HGF、c-MET及VEGF在非小细胞肺癌中的表达和意义

徐建平 赵洁婷 叶 伟 朱东波 孙 晓 宋蓉蓉 许春伟 陈燕坪

HGF、c-MET及VEGF在非小细胞肺癌中的表达和意义

徐建平 赵洁婷 叶 伟 朱东波 孙 晓 宋蓉蓉 许春伟 陈燕坪

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)、肝细胞生长因子受体(c-MET)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达与非小细胞肺癌临床病理的关系。方法 将组织标本分为原发灶组(357例)和正常对照组(68例)，分别采用免疫组织化学方法检测各组标本中HGF、c-MET及VEGF的表达情况。结果 非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中HGF表达阳性率分别为51.26%(183/357)和10.29%(7/68)，两组之间差异有统计学意义(P<0.05)；非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中c-MET表达阳性率分别为60.22%(215/357)和14.71%(10/68)，两组间差异有统计学意义(P<0.05)；非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中VEGF表达阳性率分别为45.38%(162/357)和11.76%(8/68)，两组间差异有统计学意义(P<0.05)；HGF阳性表达率与肿瘤组织分化程度及临床分期无关(P>0.05)，c-MET及VEGF阳性表达率与肿瘤组织分化程度及临床分期相关(P<0.05)。结论 HGF和c-MET、VEGF可能共同参与了非小细胞肺癌的发生和发展，c-MET和VEGF或可作为预测非小细胞肺癌患者预后的标记物。

非小细胞肺癌；HGF；c-MET；VEGF

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:528～530)

肺腺癌同肺鳞癌共同隶属于非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)，发病率相对鳞癌偏低，一般较晚发生淋巴结转移。肝细胞生长因子(HGF)是一段由间质细胞分泌的具有促分裂、分化及血管生成作用的多肽，也已证明在多种肿瘤的发生发展中发挥着重要作用[1]。通过与其受体c-MET蛋白结合，HGF才能发挥其生理病理作用。c-MET蛋白由c-MET基因编码，在多种恶性肿瘤中存在异常调节[2]。血管内皮生长因子(VEGF)可以引发血管内皮细胞的增值和迁移，在功能上与HGF及c-MET蛋白在功能上类似。本研究采用免疫组化对非小细胞肺癌组织中的HGF、c-MET蛋白和VEGF的表达进行检测，探讨3者表达程度和临床病理特征之间的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集2012年6月到2015年8月安徽省胸科医院原发性非小细胞肺癌患者原发灶组织标本357例和正常肺组织68例。标本均经过石蜡固定，并经过病理科诊断确诊。其中原发灶和正常组织中男性分别为142例和31例，女性分别为215例和37例，男女比例分别为0.66∶1和0.84∶1。年龄23～96岁，平均年龄为59岁。病理类型：鳞癌133例，腺癌224例。病理分期：Ⅰ、Ⅱ期164例，Ⅲ、Ⅳ期193例；病理分级：高分化157例，中分化116例，低分化或未分化84例。分期参照2009年国际抗癌联盟(UICC)和国际肺癌研究会(IASLC)公布的第7版肺癌国际分期标准。

1.2 方法

免疫组化染色结果判断标准：所有标本常规石蜡包埋，4 μm厚连续切片，60 ℃温箱烘烤90 min。采用EnVision二步法，实验过程严格按照试剂盒说明书进行，高温高压抗原修复，DAB显色，PBS代替一抗为阴性对照，已知阳性的肺组织为阳性对照。HGF、c-MET和VEGF阳性定位于细胞质，免疫组化判断标准：HGF和VEGF主要分布于肿瘤细胞胞质，在间质细胞有少量分布，部分血管内皮细胞也可见着色；c-MET仅分布于肿瘤细胞胞质和胞膜中，只有少数正常肺组织组化可见少量着色，400倍镜下记阳性细胞较多的5个视野的阳性细胞数，<5%或无着色为阴性，≥5%为阳性[3]。

1.3 统计学分析

应用SPSS 19.0进行统计学处理，计数资料采用χ2检验，两变量间的关系用Pearson相关法进行统计，检验水准定为α=0.05，并设定P值为双侧分布，P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中HGF、c-MET和VEGF的表达

非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中HGF表达阳性率分别为51.26%(183/357)和10.29%(7/68)，两组间差异有统计学意义(P<0.05)；非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中c-MET表达阳性率分别为60.22%(215/357)和14.71%(10/68)，两组间差异有统计学意义(P<0.05)；非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中VEGF表达阳性率分别为45.38%(162/357)和11.76%(8/68)，两组间差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 HGF表达与非小细胞肺癌临床病理资料的关系

HGF在鳞癌中的阳性率为40.60%(54/133)，在腺癌中的阳性率为57.59%(129/224)，两者无显著性差异(P>0.05)，HGF与非小细胞肺癌的病理类型、分化程度及病理分期无相关性，见表1～表3。

2.3 c-MET表达与非小细胞肺癌临床病理资料的关系

c-MET在鳞癌中的阳性率为38.35%(51/133)，在腺癌中的阳性率为73.21%(164/224)，两者有显著性差异(P<0.05)；c-MET表达与其病理分期分化程度有关(P<0.05)，见表1～表3。

2.4 VEGF表达与非小细胞肺癌临床病理资料的关系

VEGF在鳞癌中的阳性率为49.62%(66/133)，在腺癌中的阳性率为42.86%(96/224)，两者无显著性差异(P>0.05)；VEGF表达与其病理分期及即分化程度有关(P<0.05)，VEGF表达与其组织学类型无关见表1～表3。

表1 HGF、c-MET及VEGF表达与肺癌组织学 类型的关系(例，%)

表2 HGF、c-MET和VEGF表达与肺癌 病理分期的关系(例，%)

表3 HGF、c-MET和VEGF表达与肺癌 分化程度的关系(例，%)

3 讨论

肺癌是全球第一大癌症，在我国肺癌是发病率和死亡绝对数最高的恶性肿瘤，肺癌的发病人数和死亡人数是其他所有恶性肿瘤的总和，按组织亚型分类肺癌患者中有85%以上为非小细胞肺癌[4-8]。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)基因约有70 kb，包含18个外显子17 个内含子，定位于7号染色体的q21.1，是目前已知的生物学活性最广泛的细胞因子，是由间质源性细胞如成纤维细胞、平滑肌细胞等产生的多效生长因子。国内外的研究均证实HGF 可激活c-MET/HGF受体酪氨酸激酶，增强HGF/c-MET系统的信号转导，其在肿瘤发生发展中促增殖、侵袭和转移的生物学效应已被确认[9-13]，c-MET作为其唯一的酪氨酸激酶受体,活化后可激活下游RAS-MAPK/ERK、PI3K-PKB/AKT等信号通路,参与诱导多种上皮细胞有丝分裂、存活增加、运动能力增强、向胞外基质侵袭、腺管状形态发生等,在胚胎发育、上皮生长、组织分化、损伤修复等过程中发挥重要的调控作用[14]。许多恶性肿瘤都伴有c-MET 基因的扩增和过度表达。本研究中非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中HGF表达的阳性率分别为51.26%(183/357)和10.29%(7/68)，两组之间差别有统计学意义(P<0.05)；非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中c-MET表达的阳性率分别为60.22%(215/357)和14.71%(10/68)，两组之间差别有统计学意义(P<0.05)；HGF在鳞癌中的阳性率为40.60%(54/133)，在腺癌中的阳性率为57.59%(129/224)，两者无显著性差异(P>0.05)；HGF在不同病理学分期及不同组织病理学分级(即分化程度)的非小细胞肺癌组织当中差异无统计学意义(P>0.05)；c-MET在鳞癌中的阳性率为38.35%(51/133)，在腺癌中的阳性率为73.21%(164/224)，两者有显著性差异(P<0.05)；c-MET在不同病理学分期及不同组织病理学分级(即分化程度)的非小细胞肺癌组织当中差异有统计学意义(P<0.05)，分级分期越晚，分化越差，其阳性率越有升高趋势。

VEGF是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子(heparin-binding growth factor)，可在体内诱导血管新生(induce angiogenesis in vivo)，是主要的血管生成调节因子之一。VEGF是高度保守的同源二聚体糖蛋白。二条分子量各为24kDa的单链以二硫键组成二聚体。VEGF分解的单体无活性，去除N 2糖基对生物效应无影响，但可能在细胞分泌中起作用。由于mRNA不同的剪切方式，产生出分别VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF185、VEGF206等至少5种蛋白形式，其中VEGF121、VEGF145、VEGF165是分泌型可溶性蛋白，能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖，增加血管通透性，与肿瘤转移、侵袭以及肿瘤血管生成密切相关[15]。非小细胞肺癌原发灶组织和正常组织中VEGF表达的阳性率分别为45.38%(162/357)和11.76%(8/68)，两组之间差别有统计学意义(P<0.05)；VEGF在鳞癌中的阳性率为49.62%(66/133)，在腺癌中的阳性率为42.86%(96/224)，两者无显著性差异(P>0.05)；VEGF在不同病理学分期及不同组织病理学分级(即分化程度)的非小细胞肺癌组织当中差异有统计学意义(P<0.05)，病理分期越晚，分化越低，其阳性率越有升高趋势。综上所述，HGF和c-MET、VEGF可能共同参与了非小细胞肺癌的发生和发展，c-MET和VEGF或可作为预测非小细胞肺癌患者预后的标记物。

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(编辑：吴小红)

Expression and Significance of HGF,c-MET and VEGF in Non-small Cell Lung Cancer

XUJianping,ZHAOJieting,YEWei,etal.

AnhuiChestHospital,Hefei,230032

Objective To explore the expression of HGF,c-MET and VEGF in non-small cell lung cancer,and their relationship with clinical pathology.Methods The tissue specimens were divided into primary tumor group(357 cases) and normal control group(68 cases),respectively using immunohistochemical method to detect each specimen expression of HGF,c-MET and VEGF.Results There was a significant difference between primary tumor group[51.26%(183/357)]and normal control group[10.29%(7/68)]by HGF protein expression in non-small cell lung cancer(P<0.05);There was significant difference between primary tumor group[60.22%(215/357)]and normal control group[14.71%(10/68)]by c-MET protein expression in non-small cell lung cancer(P<0.05);There was a significant difference between primary tumor group[45.38%(162/357)]and normal control group[11.76%(8/68)]by VEGF protein expression in non-small cell lung cancer(P<0.05);The positive expression rate of HGF protein had nothing to do with tumor tissue differentiation degree and the staging of tumor tissue(P>0.05),and the positive expression rate of c-MET and VEGF were associated with the differentiation degree and the staging of tumor tissue(P<0.05).Conclusion The protein of HGF and c-MET and VEGF may be involved in the occurrence and development of non-small cell lung cancer,and c-MET and VEGF maybe used as markers for predicting the prognosis of patients with non-small cell lung cancer.

Non-small cell lung cancer;HGF;c-MET;VEGF

福建省自然基金青年人才创新项目(编号：2014J05085)

230032 安徽省胸科医院(徐建平，赵洁婷，叶 伟，朱东波，孙 晓，宋蓉蓉)；350014 福建省肿瘤医院(许春伟，陈燕坪)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.04.002

R734.2

A

1001-5930(2017)04-0528-03

2016-06-17

2017-03-08)