气相色谱-质谱联用法测定胡麻油中α-亚麻酸的含量

□ 孟 甜 四川旅游学院

气相色谱-质谱联用法测定胡麻油中α-亚麻酸的含量

□ 孟 甜 四川旅游学院

目的：建立一种气相色谱-质谱联用方法测定胡麻油中α-亚麻酸的含量。方法：样品经甲酯化后用GC-MS法分析，对比37种脂肪酸甲酯标准溶液总离子流，采用外标法进行定量。色谱柱为DB-5MSUI，60 m×0.25 mm×0.25 μm；进样口温度230 ℃；程序升温。结果：建立的α-亚麻酸在0.2～1.2 μg范围内线性关系良好，r=0.999 9，平均回收率为100.03%，RSD为0.14%。结论：该方法可用于测定胡麻油中α-亚麻酸的含量。

气相色谱-质谱联用法；胡麻油；α-亚麻酸

胡麻油是营养价值非常高的食用油，含有饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸，其中70%以上为多不饱和脂肪酸，超过现在人们日常饮食中的所有植物资源，其中α-亚麻酸是人体必需脂肪酸，具有调节血脂、降低胆固醇、抑制过敏反应、抗炎、抗肿瘤和预防癌症等生理作用，含量在50%左右，国内外营养专家赞誉为“陆地上的鱼油”[1-3]。

本试验依据《食品中总脂肪、饱和脂肪（酸）、不饱和脂肪（酸）的测定水解提取-气相色谱法》（GB/T 22223-2008），采用气相色谱-质谱联用法，建立测定α-亚麻酸含量的标准曲线，从而测定胡麻油中α-亚麻酸的含量。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

37种脂肪酸甲酯混合标准溶液美国Sigma-Supelco公司；二氯甲烷；正庚烷（为色谱纯）美国Sigma-Aldrich公司；2%氢氧化钠溶液（称取2g氢氧化钠溶于100ml甲醇溶液）；饱和氯化钠水溶液；15%三氟化硼甲醇溶液（为分析纯）成都科龙化工试剂厂；五种胡麻油购自网购平台。

1.2 仪器与设备

JA2003型电子天平：北京赛多利斯天平有限公司；HH-6型数显恒温水浴锅：江苏省金坛市医疗仪器厂；890A-5975C气相色谱-质谱联用仪：美国Agilent公司。

1.3 方法

1.3.1 仪器条件

气相色谱条件：色谱柱：DB-5MSUI，60 m×0.25 mm×0.25 μm；载气：高纯氦气，纯度≥99.999%；载气流速（恒流模式）：1.0 mL/min；进样口温度：230 ℃；进样方式：分流进样，不分流；升温程序：80 ℃保持2 min，以5 ℃/min升温至180 ℃保持40 min，再以3 ℃/min速率升温至280 ℃保持10 min。

质谱仪条件：离子源温度：230 ℃；离子化方式：EI；电子能量：70 eV；扫描模式：scan扫描模式；扫描范围：m/z（35～300）amu；接口温度：280 ℃；溶剂延迟时间：7.5 min。

1.3.2 样品预处理

准确称取混合均匀的样品约5 g于250 mL烧瓶中，加入2%氢氧化钠溶液8 mL，连接回流冷凝器，在80 ℃水浴上回流，直至油滴消失，从回流冷凝器上端加入15%三氟化硼甲醇溶液7 mL，在80 ℃水浴上继续回流2 min，用去离子水冲洗回流冷凝器。停止加热，取下烧瓶，迅速冷却至室温，加入45 mL正庚烷，振摇2 min，再加入饱和氯化钠水溶液，静置分层，吸取上层正庚烷提取溶液5 mL，转移到30 mL小型具塞试管中，加入5 g无水硫酸钠，振摇1 min，静置5 min，吸取上层溶液到进样瓶中待测定。根据样品中待测物含量进行适当比例稀释[4]。

1.3.3 标准溶液制备

将37种脂肪酸甲酯混合标准溶液从安瓿瓶中转移至10 mL容量瓶中，用二氯甲烷稀释定容，备用，其中α-亚麻酸甲酯浓度为0.2 mg/mL。

1.3.4 测定方法

分别准确吸取1 μL 37种混合脂肪酸甲酯标准溶液和待测样品溶液注入GC-MS，外标法定量。

2 结果

2.1 标准品及样品图谱

按上述仪器条件及方法检测后，得到37种脂肪酸甲酯标准溶液及样品离子流色谱图见图1a，其中α-亚麻酸甲酯在24.46 min处出峰。

2.2 方法学考察

2.2.1 线性关系

精密吸取37种脂肪酸甲酯标准溶液1、2、3、4、5 μL和6 μL进样，进行BPC扫描，测定峰面积，见图1b。其中α-亚麻酸甲酯与浓度的线性方程为y=3 949 418x+41 531.4，r=0.999 9，说明在0.2～1.2 μg范围内α-亚麻酸甲酯峰面积与浓度线性关系良好。

2.2.2 精密度

精密吸取同一标准溶液，连续进样5次，每次1 μL，测定α-亚麻酸甲酯峰面积，峰面积RSD为0.62%，结果表明精密度良好。

2.2.3 稳定性

取一份样品按样品预处理方法进行处理，并于常温下密封储存。按以上色谱条件连续测定7 d，计算得峰面积的相对标准偏差为0.86%，说明样品预处理后在7 d内能够稳定。

2.2.4 重复性

取同一样品5份并按样品预处理方法进行处理，再按以上色谱条件测定，并计算5份样品峰面积的相对标准偏差为0.48%，结果表明该方法重复性良好。

2.2.5 加样回收率

精密量取已知含量的样品溶液6份,分别精密加入不同含量的标准品，按以上色谱条件测定，结果见表1。α-亚麻酸的平均回收率为100.03%，RSD为0.14%，说明该方法加样回收率较好，测定方法可靠。

2.3 样品测定

五种胡麻油中的α-亚麻酸测定结果见表2。

图1 标准品及样品图谱

3 结论

本文建立了气相色谱-质谱联用法测定胡麻油中的α-亚麻酸含量，实验结果表明该方法快速、准确，重现性好，能够用于胡麻油中α-亚麻酸含量的测定。同时该方法也可以做为胡麻油质量控制的方法或是其他类型食用油中α-亚麻酸含量的测定方法。该方法对食用油的生产过程质量控制也具有一定的积极意义[5]。

五种胡麻油中α-亚麻酸含量有较大差异，可能是其加工原料胡麻籽的产地、品种、收获时期及年份对结果影响较明显[6]，且分离提取制成成品胡麻油的方法对其也有一定影响，另外在储藏过程中有效成分的含量也会发生变化。

表1 加样回收率试验结果

表2 α-亚麻酸含量测定结果

[1]赵毅.亚麻籽的功能性成分及其在食品工业中的应用[J].山西食品工业,2005,6:31-33.

[2]李丽萍,韩涛.富含α-亚麻酸植物资源的开发与利用[J].食品科学,2007,28(11): 614-618.

[3]孟甜.胡麻油营养分析及应用研究进展[J].粮食与油脂,2015,28(5):5-8.

[4]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会.食品中总脂肪、饱和脂肪(酸)、不饱和脂肪(酸)的测定水解提取-气相色谱法GB/T 22223-2008[S].北京:中国标准出版社,2008.

[5]韩荣,田兰,吴迪,等.气相色谱法测定食用调和油中α-亚麻酸及亚油酸的含量[J].新疆医科大学学报,2014,37(7):862-865.

[6]乔海明,米君,曲志华,等.影响油用亚麻α-亚麻酸含量主要因素初步分析[J].中国麻业科学,2014,36(4):191-193.

四川省教育厅科研项目（编号：14ZB0302）。粮油工程与食品安全高校重点实验室课题（编号：szjj2015-002）。

孟甜（1985-），女，河南确山人,硕士，讲师。研究方向：食品科学。