Bt Cry8Ea蛋白对华北大黑鳃金龟幼虫（Holotrichia oblita）中肠微生物菌群的影响

王伟赵丹郭巍，2李新娜张雅昆闫晓平

（1. 河北农业大学植物保护学院 河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心，保定 071001；2. 北京农学院植物科学技术学院，北京 102206；3. 邢台市农业科学研究院，邢台 054000）

Bt Cry8Ea蛋白对华北大黑鳃金龟幼虫（Holotrichia oblita）中肠微生物菌群的影响

王伟1赵丹1郭巍1，2李新娜3张雅昆1闫晓平1

（1. 河北农业大学植物保护学院 河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心，保定 071001；2. 北京农学院植物科学技术学院，北京 102206；3. 邢台市农业科学研究院，邢台 054000）

Bt Cry8Ea蛋白对华北大黑鳃金龟幼虫有特异的杀虫活性，通过中肠微生物宏基因组分析研究了Bt Cry8Ea蛋白与华北大黑鳃金龟幼虫中肠微生物的相互作用。解剖正常饲喂和饲喂Cry8Ea蛋白的华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita二龄幼虫中肠，提取中肠微生物宏基因组DNA，构建16S rDNA文库。利用PCR-RFLP 方法分析两个处理中肠微生物16S rDNA酶切片段多态性（MspⅠ，RsaⅠ和Hae Ⅲ内切酶），不同克隆测序后与NCBI数据库进行对比分析，构建系统进化树，确定中肠微生物种属。结果显示，正常饲喂的华北大黑鳃金龟幼虫中肠微生物共检出30种细菌，优势菌群为变形菌门（Proteobacteria）：（Desulfosporosinus，29.63%）；厚壁菌门（Firmicutes）：梭菌属（Clostridium，12.59%）和芽孢杆菌属（Bacillus，10.37%），而饲喂Cry8Ea蛋白的华北大黑鳃幼虫中共检出4种细菌，优势菌群为厚壁菌门（Firmicutes）：肠球菌属（Enterococcus，50%）和链球菌属（Streptococcus，46.88%）。结果表明，饲喂Cry8Ea蛋白后，中肠微生物的菌群结构发生了明显变化。

华北大黑鳃金龟；中肠微生物；Bt Cry8Ea蛋白；PCR-RFLP

昆虫中肠内丰富的营养物质以及独特的理化环境为微生物的生长与繁殖提供了便利条件，其中大部分正常菌群对宿主无害，统称为有益菌群［1］。……