子宫内膜癌中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子-D的表达及临床意义

李永川 祁青玲 艾小庆 刘玉嵚 冯海霞

(青海红十字医院妇三科，青海 西宁 810000)

子宫内膜癌中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子-D的表达及临床意义

李永川 祁青玲 艾小庆 刘玉嵚 冯海霞

(青海红十字医院妇三科，青海 西宁 810000)

目的检测子宫内膜癌组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)-D的表达，分析二者的关系及临床意义。方法63例确诊并行子宫内膜癌根治术的患者为观察组，19例子宫肌瘤行子宫全切的患者(留取子宫内膜)为对照组，均留取术后蜡块组织，应用免疫组化法检测HIF-1α和VEGF-D的表达。结果两组HIF-1α和VEGF-D表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。观察组HIF-1α和VEGF-D表达与肿瘤转移密切相关，HIF-1α表达与肿瘤浸润深度、肿瘤最大径、增殖指数密切相关。二者表达均与年龄无相关性。相关分析显示观察组HIF-1α和VEGF-D表达无相关性。结论子宫内膜癌中HIF-1α和VEGF-D表达升高可能与肿瘤淋巴结转移相关，HIF-1α表达与肿瘤侵袭性生长密切相关。

子宫内膜癌；缺氧诱导因子-1α；血管内皮生长因子-D；淋巴结转移

子宫内膜癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一，激素、遗传及基因表达失调均与肿瘤的形成有关〔1〕。肿瘤由于生长较快，常伴随缺氧性环境〔2〕。缺氧诱导因子(HIF)-1α是在恶性肿瘤形成和进展时的低氧条件下产生的一种蛋白，对肿瘤有多种调控功能〔3〕。血管内皮生长因子(VEGF)-D是VEGFs家族的成员，其具有促进肿瘤淋巴管生成的作用，与肿瘤的播散和进展有关〔4〕。本实验检测子宫内膜癌术后组织中HIF-1α和VEGF-D的表达，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1临床资料 2014年1月至2016年6月63例青海红十字医院确诊子宫内膜癌并行根治性手术治疗的患者为观察组，留取术后蜡块组织，年龄55～79(平均61.3)岁。均经病理医师确诊，并符合世界卫生组织(WHO)中的诊断标准及分型。排除标准：①伴有其他器官恶性肿瘤或林奇综合征；②生殖系统肿瘤手术史；③术前进行放、化疗。19例因子宫肌瘤行子宫全切作为对照组，留取子宫内膜组织，年龄55～76(平均56.6)岁。两组常规资料无明显差异。

1.2HIF-1α和VEGF-D表达的检测 两组术后组织均立即应用中性甲醛溶液固定，常规进行取材、脱水、包埋后切片，并置于胶片上检测。HIF-1α和VEGF-D蛋白表达的检测应用免疫化二步法，二氨基联苯胺(DAB)显色，做好实验质控。

1.3HIF-1α和VEGF-D结果的判读 评定均由病理医师阅片得出，应用盲法评定。两组均观察腺上皮细胞中HIF-1α和VEGF-D的表达特征。HIF-1α和VEGF-D阳性细胞的表达部位是细胞质，以出现浅黄色-棕褐色颗粒为阳性反应细胞。对每张切片显色上皮细胞数量占所有肿瘤细胞数量的比例(染色范围)和染色强度进行评估。染色范围评分：每张切片随机选取3个高倍(400×)视野，按阳性细胞数占肿瘤细胞数的百分比进行评定，没有显色的为0分，<25%为1分，25%～50%为2分，>50%为3分。染色强度评分：无染色计0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。总得分=染色范围×染色强度。得分≤3分为阴性，>4分为阳性。

1.4统计学方法 应用SPSS19.0软件进行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1两组HIF-1α和VEGF-D表达的差别 两组HIF-1α和VEGF-D的阳性率差异有统计学意义(P<0.001)。见表1。

2.2HIF-1α和VEGF-D在观察组不同临床病理特征中表达的差别 HIF-1α和VEGF-D表达与肿瘤淋巴结转移密切相关，HIF-1α表达与肿瘤的浸润深度、肿瘤的最大径、增殖指数密切相关。二者的表达均与年龄无相关性。见表2。

表1 两组HIF-1α和VEGF阳性表达比较〔n(%)〕

表2 HIF-1α和VEGF-D阳性表达在观察组不同临床病理特征中表达的比较

2.3观察组HIF-1α和VEGF-D表达相关性 HIF-1α和VEGF-D的表达无相关性(P>0.05)。

3 讨 论

缺氧是实体性肿瘤在生长过程中的重要特征之一，肿瘤细胞存在着对缺血缺氧的自身调节和适应性反应，其中一个机制是HIF-1α在微环境中可以使靶基因激活，进而提高葡萄糖转运代谢，同时对肿瘤间质的血管新生起重要的促进作用〔5，6〕。HIF-1α是缺氧环境下诱导的重要蛋白，是连接在红细胞生成系基因上的核因子，其基因定位于14q21～q24〔7，8〕。在缺氧环境下，肿瘤细胞内许多基因对缺氧可以出现应激性反应。研究认为HIF-1α有明显的促进肿瘤间质血管生成的作用，可以使肿瘤细胞的营养供应丰富〔9〕。VEGF-D是最重要的淋巴管生成因子之一，是唯一受转录因子c-fos诱导的生长因子，与很多肿瘤的形成和进展相关〔10〕。当VEGF-D由肿瘤细胞合成后，以前体方式分泌，经蛋白水解过程去掉N-端和C-端前肽，由中间的VEGF同源区形成非共价的同源二聚体，通过旁分泌的方式作用于定位在淋巴管内皮的受体VEGFR-3，促进间质淋巴管生成〔11，12〕。当淋巴管生成并形成管腔后，肿瘤细胞可以进入新生淋巴管中，通过淋巴循环进而加速肿瘤细胞的播散。因此表达升高的VEGF-D可能是预示肿瘤转移的蛋白指标〔13，14〕。

本研究提示HIF-1α和VEGF-D在肿瘤性病变的形成中有重要作用。HIF-1α和VEGF-D具有促癌形成的作用，使上皮细胞的恶性转变能力提高。HIF-1α和VEGF-D高表达时肿瘤处于进展及转移的状态，肿瘤细胞易于播散，并定植于其他部位，形成转移癌。HIF-1α表达升高使肿瘤具有较强的侵袭行为，同时促进肿瘤细胞繁殖，肿瘤体积增大，肿瘤生长加速，对周围组织的破坏能力明显增强，肿瘤不易切除干净。本文提示HIF-1α和VEGF-D无明显的协同作用，即HIF-1α在一定程度上可以促进血管的新生〔15，16〕，但是对淋巴管生成的促进因子VEGF-D的调节作用不明显，因此HIF-1α可能不具有促进淋巴管生成的作用。HIF-1α在肿瘤中表达上调后启动对肿瘤生长的促进作用，可能还涉及对染色质改变的调控、对细胞增殖的影响及细胞凋亡抑制等作用〔17，18〕。HIF-1α的调节及作用方式明显多于VEGF-D〔19〕。

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〔2017-05-15修回〕

(编辑 苑云杰)

李永川(1974-)，男，硕士，副主任医师，主要从事子宫肿瘤研究。

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A

1005-9202(2017)17-4284-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.055