结肠腺癌中CyclinA表达与Ki67标记增殖的关系及意义

缪 巍 才保加 刘 宁 王晓龙 马晓明 戈 锐

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海 西宁 810001)

结肠腺癌中CyclinA表达与Ki67标记增殖的关系及意义

缪 巍 才保加 刘 宁 王晓龙 马晓明 戈 锐

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海 西宁 810001)

目的检测结肠腺癌中细胞周期素(Cyclin)A和Ki67的表达特征，分析二者在不同临床病理特中的表达意义，关注二者阳性率的相关性。方法结肠腺癌术后组织71例为观察组，距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性结肠黏膜组织29例为对照组。应用免疫组化方法检测两组CyclinA和Ki67的表达。结果观察组CyclinA和Ki67表达阳性率明显高于对照组。观察组CyclinA和Ki67表达与肿瘤最大径、浸润深度明显相关。CyclinA表达与肿瘤脉管累犯相关。CyclinA和Ki67均与肿瘤神经侵犯和淋巴结转移无明显相关性。相关分析显示观察组CyclinA和Ki67表达呈正相关。结论结肠腺癌术后组织中CyclinA和Ki67表达升高，二者呈正相关，对促进肿瘤形成和进展有一定价值。

结肠腺癌；细胞周期素(Cyclin)A；Ki67；免疫组化

结肠中最常见的肿瘤是腺癌，其来源于肠黏膜的上皮细胞，病变发生过程与上皮细胞不典型增生有密切关系，此时细胞处于高分裂状态，细胞增殖活跃，机体内调节细胞周期的蛋白表达明显异常〔1，2〕。细胞周期素(Cyclin)A是直接调节细胞增殖周期的正性因子，在细胞周期的进程中，可以分别与周期蛋白依赖性激酶(CDK)1和CDK2结合，启动S期相关因子的转录，在细胞增殖和分裂活动中起重要作用〔3〕。Ki67是标记细胞增殖指数的经典蛋白，其特异性强，临床意义明显〔4〕。本文关注结肠腺癌术后组织中CyclinA和Ki67的表达，探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 2014年1月至2016年7月青海大学附属医院行手术根治的结肠腺癌患者71例为观察组，留取术后的蜡块组织，其中男39例，女32例，年龄58～82(平均65.3)岁，均经病理医师阅片确诊，并符合世界卫生组织(WHO)中的诊断标准及分型。术前均未进行放、化疗。距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性结肠黏膜组织29例为对照组，其中男15例，女14例，年龄59～80(平均66.8)岁。两组常规资料差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2CyclinA和Ki67表达的检测 术后组织中CyclinA和Ki67的表达均基于石蜡包埋的组织，切取4 μm切片后应用免疫组化二步法检测，行二氨基联苯胺(DAB)染色，严格按实验步骤进行，减少误差，做好质量控制。

1.3CyclinA和Ki67结果的判读 CyclinA和Ki67的阳性部位是细胞核，以棕黄色-棕褐色为阳性，判断依据着色强度和阳性细胞百分比的评分之和。着色强度评分：0分，无显色；1分，棕黄色；2分，棕褐色。阳性细胞百分比评分：选择5个高倍视野，计数阳性率，取其平均值；0分，<10%；1分，10%～50%；2分，>50%。取两项评分之和的值作为最终评分结果。0～2分为阴性，>2分为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1两组CyclinA和Ki67蛋白表达的比较 两组CyclinA和Ki67表达阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2CyclinA和Ki67在观察组不同临床特征中表达的比较 CyclinA和Ki67表达与肿瘤最大径、浸润深度密切相关。CyclinA的表达与肿瘤脉管累犯相关。CyclinA和Ki67均与肿瘤神经侵犯和淋巴结转移无明显相关性。见表2。

表1 两组CyclinA和Ki67蛋白阳性表达的比较〔n(%)〕

表2 观察组不同临床特征患者CyclinA和Ki67的阳性表达比较〔n(%)〕

2.3观察组CyclinA和Ki67表达相关性 CyclinA和Ki67表达呈正相关(r=0.52，P=0.034)。

3 讨 论

结肠腺癌是高增殖性肿瘤，正常上皮细胞异型增生及癌变过程中伴随着增生活跃的现象〔4〕。Ki67是一种与细胞增殖相关的核抗原，其发挥生物学作用与有丝分裂密切相关，Ki67表达的范围除G0期以外，表达在所有的增殖周期中，因此Ki67对增殖的标记较为广泛，且具有更强特异性强，能真实反映细胞的活跃状态〔5，6〕。刘伟等〔7〕认为Ki67可以作为评估胃癌恶性生物学行为及预后的参考指标。CyclinA是在原发性肝细胞癌的DNA整合的部位上检测到的，在其C端有一个保守序列，是典型的细胞周期素盒，可以与生物泛素结合而降解〔8，9〕。CyclinA存在于肿瘤细胞的细胞核内，在DNA合成前G1期出现〔10〕。研究显示流式细胞仪可以分析出CyclinA在细胞周期的S期表达最高，表明CyclinA是细胞周期通过S期、G2/M期所必需的因子〔11，12〕。本研究结果提示，CyclinA高表达可以促进肿瘤形成和进展。在G0和G1期，低磷酸化型的RB蛋白与E2F结合成为复合物，使E2F处于非活化状态，在G1/S界限和S期，RB蛋白被CyclinA-CDK2复合物磷酸化，即与E2F解离，而处于游离状态的E2F的抑制作用解除，细胞就能进入增殖期〔13，14〕。有观点认为CyclinA同P107相结合后，形成CyclinA-E2F复合物，这是CyclinA激活E2F活性的另一条通路〔15，16〕。本文结果提示CyclinA和Ki67对嗜神经现象和转移可能无明显作用，但是这与一些研究的结果有一定的不同，可能与样本的选择及样本量有关〔7〕。本文结果提示CyclinA和Ki67具有明显的协同作用，因此CyclinA是促进肿瘤细胞增殖的强有力的因子之一〔17〕。增殖与肿瘤的生长和预后相关，CyclinA和Ki67表达明显升高意味着肿瘤不良的生物学行为和不良的预后，因此检测二者的表达可能与结肠腺癌的预后有关。研究显示Ki67高表达的肿瘤可能对抗肿瘤的治疗有一定拮抗性〔18，19〕，因此对于此类肿瘤应当关注耐药相关蛋白的检测，筛选有效的药物，提高治疗效果。

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〔2017-04-11修回〕

(编辑 苑云杰)

缪 巍(1975-)，男，医学硕士，副主任医师，主要从事胃肠肿瘤研究。

R73

A

1005-9202(2017)17-4303-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.17.064