高效液相色谱法测定盐酸氟桂利嗪片的含量

张一男

摘 要：本文采用高校液相测定了盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至3.0）（70∶30）为流动相，检测波长为254nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。盐酸氟桂利嗪在5～50μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。盐酸氟桂利嗪的平均回收率为99.1%，RSD为0.89%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量测定。

关键词：盐酸氟桂利嗪片；盐酸氟桂利嗪；含量

盐酸氟桂利嗪片是一种钙通道阻断剂。盐酸氟桂利嗪片能防止因缺血等原因导致的细胞内病理性钙超载而造成的细胞损害。盐酸氟桂利嗪片对血管收缩物质引起的持续性血管痉挛有持久的抑制作用，尤其对基底动脉和颈内动脉明显，其作用比脑益嗪强15倍。盐酸氟桂利嗪片主要治疗脑供血不足、椎动脉缺血、脑血栓形成后等，辅助治疗癫痫。本文采用高校液相测定了盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量。

1 仪器与试药

CC-304Bvpc单加热型高温不锈钢槽（北京赛美思仪器设备有限公司）；HS-1超声波清洗器（天津市恒奥科技发展有限公司）；PTX-FA110万分之一天平（上海鑫仓电子科技有限公司）；Dura 12/24超纯水系统（上海和泰仪器有限公司）；优普杜伯特UP-DBT-III实验室洗瓶机（西安优普仪器设备有限公司）；屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；LC3000高效液相色谱仪（北京创新通恒科技有限公司）。盐酸氟桂利嗪对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（南京维之诚化学试剂有限公司）、乙醇（南京维之诚化学试剂有限公司）、磷酸氢二钠（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、磷酸（南京维之诚化学试剂有限公司）、甲醇（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、冰醋酸（济南英出化工科技有限公司）、磷酸二氢钾（启东市名成化工有限公司）、三乙胺（启东市名成化工有限公司）。

2 含量测定

2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至3.0）（70∶30）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按盐酸氟桂利嗪峰计算应不得低于2000。

2.2 供试品溶液的制备

取盐酸氟桂利嗪片，研细，精密称取，加流动相超声处理5分钟，放冷，滤过，滤液置25ml量瓶中，用流动相分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取盐酸氟桂利嗪对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含10μg的溶液，作为对照溶液。

2.4 阴性溶液的制备

依照处方取除盐酸氟桂利嗪的原辅料，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在盐酸氟桂利嗪出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

2.5 准曲线的制备

制备浓度为5、10、15、20、25、30、35、40、45、50μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，盐酸氟桂利嗪对照品在5～50μg·mL-1范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验

依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取盐酸氟桂利嗪对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.72%。结果表明，本实验精密度良好。

2.7 重现性试验

称取同一批的盐酸氟桂利嗪片样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.63%，结果表明此方法的重现性良好。

2.8 稳定性试验

依照2.2项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品盐酸氟桂利嗪峰面积积分值的RSD为0.75%。结果表明盐酸氟桂利嗪至少在4小时内稳定。

2.9 回收率试验

采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的盐酸氟桂利嗪对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.1%，RSD为0.89%。

2.10 样品含量测定

依照上述含量测定方法，测定盐酸氟桂利嗪片三批样品中盐酸氟桂利嗪的含量，含量为标示量的99.1%、100.3%、98.5%。

3 讨论

分别考察甲醇-0.02mol/L磷酸二氫铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至3.0）（70∶30），甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至3.0）（80∶20），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（10：10：80），甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至7.0）（75∶25），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（20：80）不同比例的流动相，结果以甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至3.0）（70∶30）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-0.02mol/L磷酸二氢铵（0.1%三乙胺，磷酸调pH至3.0）（70∶30）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量测定。盐酸氟桂利嗪片中盐酸氟桂利嗪的含量应为标示量的95-105%。

参考文献

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