MTH1抑制剂TH588对人乳腺癌细胞增殖及相关蛋白表达的影响

李 璐,张 配,赵素容,李其响,潘 琼,王先知,王仲崑,刘 浩

(蚌埠医学院药学院,安徽省生化药物工程技术研究中心,蚌埠 233030;*通讯作者,E-mail:liuhao6886@foxmail.com)

MTH1抑制剂TH588对人乳腺癌细胞增殖及相关蛋白表达的影响

李 璐,张 配,赵素容,李其响,潘 琼,王先知,王仲崑,刘 浩*

(蚌埠医学院药学院,安徽省生化药物工程技术研究中心,蚌埠 233030;*通讯作者,E-mail:liuhao6886@foxmail.com)

目的 观察MTH1抑制剂TH588对人乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的影响,探讨其作用机制。 方法 MTT法检测不同浓度的TH588(0,8,16,32,64,128 μmol/L)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,倒置显微镜观察TH588处理乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞后细胞形态学变化。集落克隆形成抑制实验观察不同浓度的TH588(0,3.2,6.4,12.8 μmol/L)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用。PI单染流式细胞术检测不同浓度TH588(0,32,64,128 μmol/L)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞死亡的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。 结果 在128 μmol/L的TH588作用下,MCF-7细胞24,48,72 h的存活率分别为(67.32±4.34)%、(56.81±0.93)%和(30.86±1.46)%,MDA-MB-231细胞24,48,72 h的存活率分别为(63.35±0.49)%、(41.11±0.75)%和(29.15±0.85)%,与对照组(0 μmol/L)比较,细胞的存活率明显降低(P<0.05)。在倒置显微镜下可观察到TH588作用于乳腺癌细胞后,细胞数目明显减少,细胞形态发生改变,细胞皱缩,有细胞碎片及颗粒物质形成,细胞边缘不清晰。集落克隆实验结果表明,TH588对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞有明显的增殖抑制作用。PI结果显示,128 μmol/L TH588处理MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞48 h,细胞死亡率分别为52.8%和55.6%,与对照组相比细胞死亡率明显增高(P<0.05)。Western blot结果显示,TH588可下调Bcl-2蛋白的表达,并上调Bax蛋白的表达。 结论 TH588对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞有明显的增殖抑制作用,其机制可能是TH588抑制了MTH1的修复作用,激活Bax和抑制Bcl-2,从而引起乳腺癌细胞的凋亡。

乳腺癌; TH588; MTH1; 活性氧

乳腺癌是威胁女性健康与生活质量最常见的恶性肿瘤之一。肿瘤流行病学数据显示,2012年全球新确诊乳腺癌167万例,死亡52万例[1]。近年来,我国乳腺癌发病增长速度超全球2倍,成为女性发病率最高的癌症[2]。

目前乳腺癌靶向药物治疗主要是针对特定的致癌基因及其相关通路进行治疗的,由于基因的多态性和肿瘤内部高度的异质性,以及基因相互作用网络的复杂性,针对致癌基因以及缺陷基因的治疗效果受到较大的限制。2014年提出了“cancer phenotypic lethality”的概念,即由于肿瘤细胞的共性,某些途径的功能性蛋白成为肿瘤细胞所必需的,并在肿瘤细胞中高表达。……