HPV基因分型对ASCUS细胞临床应用的价值

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(1.湘雅常德医院检验科，湖南 常德 415000；2.湘雅常德医院妇产科)

·临床医学·

HPV基因分型对ASCUS细胞临床应用的价值

程俊1，雷张涛2

(1.湘雅常德医院检验科，湖南 常德 415000；2.湘雅常德医院妇产科)

目的了解未明确意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)患者人乳头瘤病毒(HPV)亚型感染的分布情况，为临床ASCUS患者诊治提供相关理论依据。方法经宫颈细胞学检查确诊为ASCUS患者328例，流式细胞仪检测HPV型别，阴道镜下进行病理活检。结果ASCUS患者主要分布在30～50岁年龄段，其中HPV阳性263例，阳性率80.18%，HPV阳性患者宫颈病理结果为宫颈上皮内瘤变(CIN)-Ⅰ、CIN-Ⅱ、CIN-Ⅲ的检出率高于HPV阴性。此外，ASCUS患者中感染单-HPV高危型前四位和感染率分别是HPV 16(15.85%)，52(10.67%)，18(8.84%)，58(7.93%)，多重HPV高危型感染率为7.93%。结论对于细胞学检查筛查为ASCUS的患者，可联合HPV分型和阴道镜下活检，提高诊断的准确性。

非典型鳞状上皮细胞； 人乳头瘤病毒； 病理活检； 高危型

宫颈癌是常见妇科疾病，其发生是一个长时间的癌变过程，因此，早期筛查显得尤为重要。随着宫颈液基薄层细胞学技术(TCT)的广泛开展,宫颈脱落细胞学检查已成为辅助宫颈癌早期发现、早期预防的重要手段。现行宫颈细胞学诊断依据是TBS系统(The Bethesda System)，TBS中有类定义为不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)的特殊细胞，在显微镜下观察形态为非典型鳞状细胞，形态学和数量上也不足以直接判断细胞的好坏，此类报告给临床医生和患者造成了误解和困扰，需要进一步诊断或随访。目前，已有大量的研究证实高危型人乳头瘤病毒( high-risk human papillomavirus，HR-HPV)长时间的持续感染是宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN) 以及宫颈癌发生的主要危险因素。因此，ASCUS与HPV感染两者之间的相关性，值得我们思考。本研究通过对328例 ASCUS 患者进行HPV基因分型和病理切片结果的分析，期待为ASCUS患者的临床处理提供一定的理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2016年1月至2016年12月在我院妇科门诊进行宫颈癌筛查，TCT结果为ASCUS患者共328例，年龄分布在19～77岁之间。

1.2标本采集剔除就诊前48h内有性生活、使用阴道灌洗、经期带血及局部上药的患者，采用专用宫颈刷和细胞保存液收集宫颈脱落细胞， TCT判读为ASCUS的患者，进行HPV分型检测和阴道镜下活检，组织送本院病理科。

1.3方法

1.3.1 宫颈细胞学检测 严格按照TBS细胞学系统标准，由两位细胞病理医生，TCT判定结果为ASCUS。

1.3.2 HPV检测 按照上海透景公司产品说明书操作，采用流式荧光杂交技术，对27种HPV亚型进行检测，结果包括17种HPV高危亚型( high-risk type,HR-HPV，16、18、31、33、35、45、52、66、39、58、26、51、56、59、68、82、53 )，10种HPV低危亚型 ( low-risk type,LR-HPV，6、11、40、42、44、61、83、55、43、81)，可检出2种及2种以上的亚型引起的混合感染。

1.3.3 病理活检 阴道镜下，对可疑病灶处进行活检，无异常处多点活检，送检本院病理科，查询结果有如下类型：慢性宫颈炎症反应，低度鳞状上皮内病变(CIN-Ⅰ) 和高度鳞状上皮内病变(CIN-Ⅱ和 CIN-Ⅲ )，鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC )。

1.4统计学分析相关数据使用SPSS 22.0统计学软件分析，组间比较采用卡方(χ2)检验，以P<0.05为两组间差异具有显著性。

2 结 果

2.1 ASCUS患者年龄组成与病理结果分析从

各个年龄段的数据可以得知，在40～49岁年龄段，慢性宫颈炎、CINⅠ、CIN Ⅱ-Ⅲ感染率最高，分别占24.39%、6.71%、7.93%，SCC在60～69岁年龄段感染率最高，占到1.83%，结果见表1。

表1 ASCUS患者年龄组成与病理结果关系(例)

2.2 ASCUS患者HPV感染情况与病理结果分析328例ASCUS患者中，HPV阳性人数是263例，阳性率为80.18%， 其中病理结果为SCC的患者HPV检出率为100%，结果见表2。

表2ASCUS患者HPV感染情况与病理结果关系(例)

慢性宫颈炎CINⅠCINⅡ-ⅢSCC总计HPV阳性162355412263HPV阴性40178065合计202526212328

病理结果CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ与HPV感染之间关系用卡方检验，得χ2值=6.469，P<0.01

2.3 HPV亚型感染与病理结果分析单一型HR-HPV感染型别和感染率分别是16(15.85%)，52(10.67%)，18(8.84%)，58(7.93%)，39(3.66%)，33(5.49%)，68(2.44%)，53(1.83%)，还检出5种单一的LR-HPV，型别和感染率分别是6(0.61%),11(1.83%),44(1.22%),61(1.83%),55(1.22%)，此外，混合性HPV感染率为(16.77%)，结果见表3.

表3 ASCUS患者HPV亚型感染与病理结果关系(例)

3 讨 论

TCT是早期宫颈癌筛查常用的检测方法之一，在TBS分级系统中，ASCUS细胞出现具有一定的特殊性，不是一个单一的生物学实体，与很多因素有关，包括与HPV感染无关的改变、提示有潜在CIN的改变、以及极少数的癌。因此，对于ASCUS患者的处理，临床上存在着不同的争议。李娟，等[1]报道，ASCUS患者病理活检后，50%以上为良性病变，这给病人造成了不必要经济损失和心理负担。因此，提高筛查的准确性显得尤为重要。

HPV感染是诱导宫颈癌发生的重要因素，大部分女性都存在一过性感染，只有极少一部分发展成为癌前病变或癌[2-5]，通过对HPV病毒的检测,可提高宫颈癌及癌前病变的检出率。本研究结果显示，在ASCUS患者年龄组成与病理结果的表中,30～39岁和40～49岁年龄段的妇女慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ的结果较多，这与国内的报道相符合[6]，而60～69岁的妇女SCC的结果最多，可能是上述两个时间段的妇女性生活较为活跃，怀孕次数、吸烟等原因易导致相关宫颈疾病的改变[7-8]，而部分60～69岁的妇女则可能由于长时间的感染HPV病毒，没有针对性的治疗或由于自身的免疫功能逐渐降低，病毒得不到清除等诸多因素，发展成了SCC。从表2中可以得知，在病理诊断为CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ和SCC患者中，HPV阳性检出率为80.16%，HPV阴性的检测率仅有19.84%，两组资料比较，HPV阳性的病理结果显著高于HPV阴性的病理结果，两者有显著性差异(P<0.05)，这与报道相符合[9]。提示ASCUS患者同时进行HPV检测，可以提高异常病理结果的检出率，值得引起临床医生关注。

本研究中出现的HPV高危型有16，52，18，58，39，33，68，53，低危型有6,11,44,61,55，以及高危型和低危型或者多种高危型引起的混合感染。有文献报道[10]，HPV52和HPV58是亚洲国家所特有的基因型，在世界其他地方较少出现，具有地域特异性。本研究中，HPV高危型16，52，18，58,感染率分别是15.85%，10.37%，8.84%，7.93%,其持续性感染，更易致宫颈高级别病变，需进一步阴道镜检查并搔刮组织送病理活检，这也与国内报道相符合[11-12]。

综上所述，HPV分型的检测对于ASCUS患者临床处理的预判断提供了一定的参考价值，特别是HPV16,18,52,58亚型和多重HR-HPV阳性的患者，应该引起重视，积极在阴道镜下活检，减少临床漏诊的风险。但是，由于本研究收集标本并非大样本数据，还需要进一步的探讨和研究。

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ClinicalvalueofhumanpapillomavirusgenotypeinASCUS

CHENG Jun,LEI Zhangtao

(ClinicalLaboratory,XiangyaChangdeHospital,Changde,Hunan415000,China)

ObjectiveTo learn the prevalence of infection by different subtypes of human papillomavirus (HPV) patients diagnosed as atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS),and provide theory evidence of treatment and diagnosis for ASCUS patients.Methods328 patients were diagnosed as ASCUS by cytologic test,flow cytometry was used to detect HPV genotypes,and pathologic biopsy was examined under the colposcope.ResultsASCUS patients were mainly distributed at the age of 30 to 50,263 cases were positive HPV,the rate was 80.18%,moreover,the detection rate of positive HPV were much higher than the negative ones in cervical intraepithelial neoplasia (CIN).In addition,the top of HR-HPV genotypes and infection rates were HPV 16(15.85%),52(10.67%),18(8.84%),58(7.93%)respectively,the multiple HR-HPV infection rate was 7.93%.ConclusionFor ASCUS patients diagnosed with cytologic test should combine the result of HPV genotypes and colposcopy biopsy to promote clinical diagnostic accuracy.

atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS); human papillomavirus (HPV); pathologic biopsy; high risk

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2017.04.015

2017-01-12；

2017-03-05

R737.33

A

秦旭平)