饲料中添加不同含量的万寿菊粉对黄颡鱼生长、肉质及抗氧化能力的影响

张宝龙 ，曲 木 ，赵国营 ，王云祥 ，赵子续 ，翟胜利 ⋆

（1.天津现代晨辉科技集团有限公司，天津市水族动物功能性饲料企业重点实验室 301800；2.天津市宝坻区畜牧水产业发展服务中心 301800）

黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco），隶属于鲶形目（Siluriformes）、鮠科（Bagridae）、黄颡鱼属（Pelteobagrus），是营养价值和经济价值均较高的小型淡水经济鱼类[1]，因其肉质细嫩、含肉率高、脂肪含量低而广受欢迎[2]，随着市场需求的不断扩大，黄颡鱼人工养殖逐渐取代了天然捕捞，养殖技术逐渐成熟[3]。但是随着集约化养殖的发展，黄颡鱼病害频发问题凸显，如何产出高产、高效、肉质鲜美的黄颡鱼，已经成为黄颡鱼养殖业所关注的重点。

万寿菊（Tagetes erecta L）是一年生草本植物，属菊科万寿菊属（Tagetes erecta）[4]，具有清热解毒、止咳化痰等功效[5]。万寿菊中的类胡萝卜素主要有叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素以及大量的叶黄素脂等[6]，其中，万寿菊中的叶黄素，又称“植物黄体素”，和叶黄素脂均具有抗氧化、提高免疫力、增强体液免疫反应等多种生物学功能[7]。万寿菊作为多用途、高价值的经济作物，具有非常高的研究价值，受到国内外广泛关注[8]。目前有关叶黄素在水产动物的应用中，主要集中在对水产动物体色影响的研究，而对其他方面的研究少有报道。本次试验中，通过在饲料中添加不同万寿菊粉水平，探究其对黄颡鱼生长、肉质以及抗氧化能力的影响，旨在为黄颡鱼的高效养殖提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验鱼与饲料

试验黄颡鱼购自天津市和来科技有限公司，于天津现代晨辉科技集团循环水养殖实验室内进行。对鱼体消毒、暂养1周后开始正式试验，挑选体格健壮、规格一致、无病无伤的黄颡鱼作为试验鱼，初始体重为（30.82±0.22）g。

试验饲料以鱼粉、豆粕、鸡肉粉为主要蛋白源，大豆磷脂油、豆油为主要脂肪源，配制的试验饲料分别记为Diet 1、Diet 2、Diet 3、Diet 4、Diet 5、Diet 6、Diet 7， 其中万寿菊粉的添加水平分别为0.00%、1.00%、2.00%、3.00%、4.00%、5.00%、6.00%。 饲料组成及营养水平见表1。

表1 饲料组成及营养水平

1.2 试验鱼与养殖管理

黄颡鱼共计280尾，随机分成7组，即1个对照组和6个试验组，每组4个重复，每个重复10尾鱼，随机分到28个规格相同的试验箱（86×56×48cm3，有效水体为 150L）中以不添加万寿菊粉的饲料组（Diet 1）作为对照组。试验正式开始后，每天饲喂2次，日投喂量为体重的3%～5%，投喂时间为每天的7:00、19:00。养殖周期56d。定期检测水体指标，养殖期间水温为27℃±3℃，Ph为7.75±0.25，溶解氧为7.65±0.35。每天记录投饵量。

1.3 指标测定

1.3.1 生长指标的测定

试验结束后，测量每个试验箱黄颡鱼体重，相关生长指标按照下列公式计算：

增重率/%=100×(Wt-W0)/W0

特定生长率(SGR)/%=100×(lnWt-lnW0)/t

饵料系数=F/(Wt-W0)

肝体指数/%=100×Wg/Wt

式中：Wt为终末体质量（g）；W0为初始体质量（g）；F 为饲料摄入量干质量（g）；Wg为肝脏质量（g）。

1.3.2 肉质指标的测定

1.3.2.1 肌肉滴水损失率测定

每个平行随机取黄颡鱼5尾，取其侧线上方的同侧新鲜背肌，干纱布擦干表面水分，称重记录，放10mL离心管中，离心管底部放有适当的吸水纸，在4℃，4000r/min条件下离心20min后取出，擦干背肌表面水分，称重记录。

滴水损失率（drip loss，DL，%）=（离心前肌肉质量-离心后肌肉质量）/离心前肌肉质量×100

1.3.2.2 肌肉蒸煮损失率测定

每个平行随机取黄颡鱼5尾，取其侧线上方的同侧新鲜背肌，干纱布擦干表面水分，称重记录，装入密封袋中，放入70℃的恒温水浴锅中蒸煮15min，取出冷却至室温，擦干背部肌肉表面水分，称重记录。

蒸煮损失率（cooking loss，CL，%）=（蒸煮前肌肉质量-蒸煮后肌肉质量）/蒸煮前肌肉质量×100

1.3.3 免疫指标的测定

养殖试验结束后，禁食24h，取样，用注射器抽取静脉血，每3尾鱼的血液混为一个样本，转移到1.5mL离心管之后，4℃条件下，4500rpm/min离心10min，取上清液制成血清，-20℃保存待测。黄颡鱼取血后，在冰盘上解剖，取其背部肌肉、肝脏，-20℃保存，待测。

过氧化氢酶（CAT）活性、总超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量均采用南京建成试剂盒测定，试验操作严格按照说明书方法进行。

1.4 数据分析

试验数据均以“平均值±标准误”表示，采用spss 18.0中的单因素方差分析（ANOVA）对所得数据进行处理分析。

2 结果与分析

表2 试验饲料添加万寿菊粉对黄颡鱼生长、肝指数和饵料系数的影响

2.1 饲料中添加不同万寿菊粉水平对黄颡鱼生长指标的影响

由表2可以看出，在整个试验期间，黄颡鱼的终末体重、增重率以及特定生长率均随着万寿菊粉水平的增加而增加，在万寿菊粉水平4.00%～6.00%时（Diet 5～Diet 7）显著高于对照组Diet 1（P<0.05）。 Diet 5、Diet 6、Diet 7 之间差异不显著（P＞0.05）。 在Diet 7组，即添加万寿菊粉水平为6.00%时，黄颡鱼生长最佳。

黄颡鱼的肝指数在各试验组之间差异不显著（P＞0.05）。试验组 Diet 2～Diet 6与对照组 Diet 1差异不显著（P＞0.05）。 Diet 7与 Diet 1 差异显著（P<0.05），并显著高于 Diet 1（P<0.05），且在此时黄颡鱼肝指数达到最大值。

黄颡鱼的饵料系数，随着万寿菊粉水平的增加而呈逐渐降低的趋势。对照组Diet 1与各试验组之间差异显著（P<0.05）。试验组间，Diet 7 显著低于 Diet 1、Diet 2（P<0.05），且在 Diet 7（万寿菊粉水平6.00%）时，饵料系数最低。

2.2 饲料中添加不同万寿菊粉水平对黄颡鱼肉质的影响

表3 试验饲料添加万寿菊对黄颡鱼肌肉滴水损失率和蒸煮损失率的影响

由表3可知，黄颡鱼肌肉的滴水损失率和蒸煮损失率随着饲料中万寿菊粉水平的增加，呈先降低后升高的趋势。黄颡鱼滴水损失率在试验组Diet 6与对照组Diet 1及其他各试验组差异显著（P<0.05）。黄颡鱼蒸煮损失率试验组Diet 5、Diet 6、Diet7与对照组 Diet 1 差异显著（P<0.05）。 Diet 5、Diet 6、Diet 7 之间差异不显著（P＞0.05）。黄颡鱼的滴水损失率和蒸煮损失率均在Diet 6时达到最低。

表4 试验饲料添加叶酸和维生素B12对黄颡鱼肝脏SOD、CAT和MDA的影响

表5 试验饲料添加叶酸和维生素B12对黄颡鱼血清SOD、CAT和MDA的影响

2.3 饲料中添加不同万寿菊粉水平对黄颡鱼抗氧化指标的影响

由表4、表5可以看出，随着万寿菊粉水平的增加，黄颡鱼肝脏、血清中SOD、CAT活性均呈增加趋势。MDA含量呈降低趋势。各试验组肝脏、血清中SOD活性、CAT活性与对照组差异显著（P<0.05）。 Diet 7 显著高于 Diet 1（P<0.05）。 黄颡鱼肝脏、血清MDA含量随着万寿菊粉水平的增加而呈降低趋势，Diet 7显著低于Diet 1（P<0.05）。 在万寿菊粉水平为6.00%（Diet 7）时，黄颡鱼肝脏、血清的SOD、CAT活性最高，MDA含量最低。

3 讨论

3.1 饲料中添加不同含量的万寿菊粉对黄颡鱼生长的影响

王鱼波[9]等在天然叶黄素对黄颡鱼生长性能及皮肤着色的影响的试验中发现，在饲料中添加24.2～1700mg/kg的天然叶黄素，可以显著提高黄颡鱼的生长性能，降低饵料系数。林城丽[8]等在饲料中添加不同水平的万寿菊粉饲喂锦鲤，发现在万寿菊粉4%水平时，对锦鲤的增重率、蛋白质效率以及饲料利用率均具有显著的促进作用。刘春东[10]通过探究菊花粉在水产养殖中应用的效果时发现，使用万寿菊粉代替部分麸皮饲养鲤鱼，不但达到了增产的目的，还增强了鲤鱼体质。从本次的试验生长指标可以看出，在饲料中添加不同水平的万寿菊粉（叶黄素含量2%）饲喂黄颡鱼，对黄颡鱼的终末体重、增重率、特定生长率、肝体指数以及饵料系数均具有显著影响（P<0.05）。各生长指标随着万寿菊粉水平的增加而呈增加的趋势，饵料系数呈降低的趋势。在万寿菊粉水平为6.00%（Diet 7）时，黄颡鱼各生长指标达到最高，饵料系数最低，此时生长性能最佳。这与上述学者的结论是相似的。万寿菊粉之所以显著促进了黄颡鱼的生长，可能与万寿菊粉特殊的营养成分有关，其内含有天然粗蛋白，易于吸收；且其内较高含量的维生素A、B、E为黄颡鱼提供了丰富的营养。此外，还有可能万寿菊具有特殊的芳香气味，添加在饲粮中促进了黄颡鱼的食欲，增加了黄颡鱼对饲料的摄入量。

3.2 饲料中添加不同含量的万寿菊粉对黄颡鱼肉质的影响

近年来，水产养殖业蓬勃发展，人们对鱼类等水产品需求量增加的同时，对鱼类的肉质也提出了更高的要求。评价肉质的技术指标有含肉率、pH值、系水力、营养成分等[11]。在本次试验中，通过系水力来评定万寿菊粉不同含量对黄颡鱼肉质的影响。肌肉滴水损失和蒸煮损失是衡量肌肉蛋白质的系水能力的指标，其损失的多少会直接影响肉的风味、质地和营养成分等食用品质。肌肉保水能力差，大量液体外流，就会导致可溶性营养成分和风味，物质损失严重，进而使肌肉变得干硬、无味，肉品质量降低[12]。目前，有关于饲喂对黄颡鱼肉质影响的研究试验中，主要集中在饲料中蛋白源[13]和抗菌肽[14]等方面，而在饲料中添加万寿菊粉对黄颡鱼肌肉品质的影响尚未见报道。在本次试验中，结果发现，随着饲料中万寿菊粉水平的增加，黄颡鱼肌肉的滴水损失率和蒸煮损失率均呈先降低后升高的趋势，在万寿菊粉5.00%（Diet 6）水平时，滴水损失率和蒸煮损失率最低，与对照组差异显著（P<0.05）。由于影响肌肉品质的因素很多，如环境因素、营养因素和遗传因素均会影响肉质，故有关于万寿菊粉对黄颡鱼肉质影响的作用机理还有待于进一步研究。

3.3 饲料中添加不同含量的万寿菊粉对黄颡鱼抗氧化能力的影响

SOD、CAT是存在生物体内非常重要的抗氧化防御性功能酶，保护机体免受氧化伤害[15]。MDA是细胞膜质过氧化作用的产物之一，其代表膜质过氧化的程度，也间接反映组织细胞受自由基攻击的程度[16]。王述浩[17]等研究显示，在饲粮中添加0.15%和0.6%的万寿菊粉显著提高了肉仔鸡血清的抗氧化性。在水产动物方面，林诚丽[8]、梁超[18]、任永林[19]在试验研究中均发现，菊粉可以提高机体的非特异性免疫能力，提高组织中的相关酶的活性，降低MDA含量。本次试验结果表明，随着万寿菊粉水平的增加，血清及肝脏组织中的CAT、SOD活性逐渐增加，MDA含量逐渐降低。在万寿菊粉添加水平为6.00%（Diet 7）时，显著高于对照组Diet 1（P<0.05）。 且在此水平下，黄颡鱼肝脏、血清中 CAT、SOD活性最高，MDA含量最低。这与上述各学者的结论相似，这可能与万寿菊中叶黄素特殊的结构有关，叶黄素结构中具有多个共轭双键，可以传递高能量。从而使活性氧变为稳定的氧分子，避免单线态氧对脂类双键或共轭双键的攻击，可有效的捕捉过氧化自由基[20]，防止机体过氧化，提高机体的抗氧化能力。

4 结论

本次结果显示，万寿菊粉可以有效提高黄颡鱼的生长和抗氧化能力，在本次试验中，饲料中最适添加水平为5.00%～6.00%，在此水平下，黄颡鱼生长性能最佳，不仅有效提高了黄颡鱼肌肉的系水能力，还有效增强了黄颡鱼机体的抗氧化能力。万寿菊不仅广泛应用于食品、医疗等领域，而且在水产行业，既可以作为着色剂，还在促进水产动物的生长、增强机体免疫力和提高机体抗氧化能力等方面有着广泛的生物活性，是一种很有发展前途的草本植物。