酯化牛膝多糖对产蛋鸡肠道微生物及小肠黏膜形态的影响

田丽芳 ，闫永平，张 涛

（1.保定职业技术学院畜牧兽医系 070051；2.北京农学院兽医学（中医药）北京市重点实验室102206）

小肠是动物机体营养吸收的主要场所，生长发育良好的畜禽其肠道绒毛发育良好，隐窝深度浅，消化酶活性高，肠道有益菌数量多［1-2］。牛膝多糖经硫酸、醋酸—吡啶酯化后的产物—牛膝多糖硫酸酯，不仅刺激免疫、抗氧化、抗肿瘤和改善消化道微生态平衡等活性大大增强，同时还具备了较强的抗病毒和抑菌杀虫等药理活性[3-4]。对于酯化牛膝多糖对产蛋鸡肠道微生物及黏膜结构和生产性能是否有影响，未见研究报道。本试验旨在探讨牛膝多糖硫酸酯对产蛋鸡肠道微生物和小肠黏膜形态结构的影响能力，为开发新型绿色的饲料添加剂的开发应用奠定理论基础。

1 试验材料及方法

1.1 试验动物的饲养管理

采用单因子试验设计，以38周龄的京粉1号商品代蛋鸡、体重相近的蛋鸡200只为试验动物。随机分为5组，每组设6个重复，每个重复8只鸡。试验CK组设为对照组，饲喂玉米-豆粕型基础日粮，试验I-IV组为酯化牛膝多糖处理组，分别在基础日粮中添加 50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、200mg/kg 的酯化牛膝多糖，预试期7d，正试期60d。

1.2 肠道微生物数量测定

试验期周期结束时随机选择各组试验鸡，每组12只，无菌操作集盲肠、结肠、直肠粪便内容物约3g，用稀释液逐级稀释至l0-7接种培养，麦康凯琼脂培养基培养大肠杆菌；改良番茄琼脂培养基培养乳酸杆菌；双歧杆菌采用双歧杆菌选择性培养基培养，测定3种细菌的数量；平板菌落计数法进行统计细菌数量，每克样本所含细菌数=菌落数均值×稀释倍数／样品质量。

1.3 小肠黏膜形态测定

将十二指肠、空肠及回肠各切取长约2cm的肠块置于3.8%的福尔马林液中固定，经组织切片制作染色（HE），10倍光学显微镜下选择选5个典型视野，在应用DT2000通用图像分析软件2.0测量小肠绒毛高度和隐窝深度，小肠绒毛高度指的是肠腺开口至绒毛顶端的垂直高度，隐窝深度为绒毛根部上皮凹陷到固有层的距离。

2 结果与分析

2.1 对肠道微生物数量的影响

试验Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ在抑制肠道中大肠杆菌和提高双歧杆菌、乳酸杆菌的效果好于对照组(P<0.05或P<0.01)。酯化牛膝多糖试验Ⅲ，Ⅳ组在抑制肠道大肠杆菌和促进肠道有益菌显著好于对照组(P<0.05或P<0.01),试验组之间随着添加量的增加，其抑制肠道大肠杆菌和促进肠道有益菌的效果逐渐提高，Ⅱ和Ⅳ组之间差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01),结果见表1。

表1 牛膝多糖对蛋鸡肠道微生物的影响结果

2.2 牛膝多糖对小肠黏膜形态结构的影响

十二指肠段上皮细胞层厚度各组相比均无显著性差异，空肠段和回肠段上皮细胞层厚度随着试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组多糖添加量的增加而增加，显著或极显著大于对照组和试验I组(P<0.01或P<0.05)；在十二指肠段，肠绒毛高度和降低隐窝深度试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组明显好于对照组(P<0.01或P<0.05)，空肠和回肠的隐窝深度之间没有显著差异，试验Ⅲ、Ⅳ组各测定指标之间差异不明显，这说明酯化牛膝多糖添加量在150mg/kg和200mg/kg时对肠道的上皮细胞、绒毛高度和隐窝深度的影响没有显著差异。

十二指肠

空肠

回肠

表2 酯化牛膝多糖对肉鸡不同肠段肠黏膜形态学指标的影响结果

3 讨论

3.1 酯化牛膝多糖能够抑制蛋鸡肠道中大肠杆菌的生长，促进乳酸菌和双歧杆菌的增殖

禽类的消化道菌群稳定、维持机体微生态的平衡，这对禽类的消化吸收，免疫起着至关重要作用。李树鹏等（2002）研究表明黄芪多糖能减少雏鸡肠道大肠杆菌的数量，增加乳酸杆菌和双歧杆菌的数量，回肠和盲肠的绒毛变长、变粗，排列紧密［5］。高杨等（2011）研究显示适量黄芪多糖可降低产蛋鸡盲肠中大肠杆菌数量，增加乳酸菌和双歧杆菌的数量[1]。陈清华等（2007）研究显示牛膝多糖能够抑制仔猪肠道中大肠杆菌的生长，促进肠道中乳酸菌和双歧杆菌的增殖［6］。本试验结果表明酯化牛膝多糖能抑制生产蛋鸡肠道大肠杆菌的生产，增殖双歧杆菌和乳酸杆菌 ，且随剂量的增加效果越明显。这与前人的研究结果一致。

3.2 酯化牛膝多糖对产蛋鸡小肠组织结构的影响

营养物质的消化吸收主要在肝脏和肠道进行，肠道菌群的稳定和黏膜结构的健康与否将直接影响动物对饲料的利用程度。陈清华等（2007）研究表明牛膝多糖能显著增加肠道上皮细胞层厚度，增加肠绒毛高度，显著降低隐窝深度 (P<0.05或P<0.01)，增强机体消化吸收能力，从而提高仔猪的生产性能［6］。成年产蛋鸡肠道菌群稳定，肠黏膜结构形态趋于完善，研究结果表明酯化牛膝多糖的添加有改善肠道结构的趋势，改善空肠、回肠上皮细胞层厚度的效果比十二指肠好；能显著改善十二指肠肠绒毛高度和降低隐窝深度(P<0.05或P<0.01)，这与陈清华等人的研究结果相似。

酯化牛膝多糖能抑制产蛋鸡肠道中大肠杆菌的生长，增殖乳酸菌和双歧杆菌，显著增加空肠和回肠上皮细胞层厚度、绒毛高度，降低十二指肠隐窝深度。结果表明酯化牛膝多糖可以有效增强产蛋鸡的消化吸收能力，提高蛋鸡的生产性能(结果另报)，推荐使用量150mg/kg·饲料。