穴位埋线对急性高原缺氧大鼠血红蛋白及动脉血气的影响❋

汪永锋，徐亚莉，金建军，王士源，高晓娟，孙鹏云

(1. 甘肃中医药大学基础医学院，兰州 730000； 2. 甘肃中医药大学针灸推拿学院，兰州 730000)

急性高原缺氧是从平原进入海拔3000 m以上的高原地区，机体对低压低氧环境适应能力不全导致的急性缺氧反应，轻者出现胸闷、头痛、恶心等症状，重者并发肺动脉高压、脑水肿、心力衰竭甚至危及生命。因此，急性高原缺氧是人类访问高海拔地区的一个很大的挑战[1]。目前，西医主要采用乙酰唑胺、氨茶碱等药物来防治[2]，而中医学常用红景天、银杏叶及复方丹参滴丸等预防和治疗本病[3-4]。穴位埋线又称长效针感疗法，有扶正祛邪、调节脏腑平衡、疏通经络气血等作用，其特点是对机体的可持续刺激从而维持疗效，为目前急性高原缺氧的防治提供了新的思路与方法。本实验通过观察急性高原缺氧模型大鼠血液中血红蛋白(Hb)含量及动脉血气分析相关指标pH、血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)、氧饱和度(SaO2)的变化，初步探讨穴位埋线对急性高原缺氧的干预机制，为该病的针灸防治提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 动物及分组

健康成年SPF级6周龄Wistar大鼠48只，体质量(160±20) g，雌雄各半，由甘肃中医药大学实验动物中心提供(许可证号SCXK(甘)2014-0020)。实验前先进行适应性饲养1周，饲养室条件相对温度18～25 ℃，相对湿度50%～80%，12 h明暗交替。采用完全随机方法先将大鼠分为空白组8只和造模组40只；造模成功后将40只大鼠再随机分为模型组、红景天组、埋线A组、埋线B组和埋线C组每组8只(雌、雄各半)。实验过程中对动物的处置严格遵循中华人民共和国科技部颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》。

1.2 试剂与仪器

实验试剂：红景天煎剂(生药含量为2 g/ml，甘肃中医药大学附属医院煎药室提供)；水合氯醛(天津市凯信化学工业有限公司，批号20130105)。

实验仪器：DYC-Q型低压低氧动物实验仓(贵州风雷航空军械有限公司)；HEMAVET950S-V5动物血球分析仪(美国伯乐公司)；ABL80动脉血气分析仪(丹麦雷度公司)；4-0号医用羊肠线(上海浦东金环医疗用品股份有限公司，批号3650412)；一次性无菌注射器6号半针头(山东威高集团医用高分子制品股份有限公司，批号3151474)；0.25×40 mm华成牌毫针(北京科苑达技术开发公司总经销，批号2270080)。

1.3 红景天煎剂的制备

将500 g红景天药材加水后煮沸30 min，用纱布将药液过滤，共煎煮3次，滤液混合后浓缩成250 ml、生药含量为2 g/ml的煎剂，放置于-4 ℃冰箱保存备用。整个煎药过程均在甘肃中医药大学附属医院煎药室进行。

1.4 模型制备

除空白组外，其余各组大鼠均采用低压氧仓模拟高原环境的方法制备急性高原缺氧大鼠模型。具体方法：将大鼠置于低压低氧动物实验仓内，将舱内条件设置为：温度(20±3)℃，相对湿度(30±5)%，气流量0.09～0.10 m3/h，氧含量(10±2)%。大鼠入舱后先以30 m/s的速度上升至6000 m海拔，维持8 h完成缺氧后，再以30 m/s的速度迅速降低海拔高度，使舱内气压与外界大气压相同。在此期间实时观察大鼠的行为状态并记录，每天1次，共7 d。空白组大鼠在相同温湿度条件下仓外饲养。

1.5 各组处理方法

空白组常压常氧下饲养，不做任何处理，实验结束后采集大鼠血液进行Hb及动脉血气相关指标检测。

模型组造模成功后不做任何治疗，自由摄食进水，实验结束后采集大鼠血液进行Hb及动脉血气相关指标检测。

红景天组于造模前1周及造模后1周，每天上午9∶00均给予红景天药液灌胃。灌胃前先将红景天药液从冰箱中取出，待其放置同室温时以0.5 ml/100 g剂量进行灌胃，每天1次。实验结束后采集大鼠血液进行Hb及动脉血气相关指标检测。

埋线组：埋线A、B、C组分别于造模1周、造模后1周及造模前后各1周进行埋线治疗1次。取穴与埋线方法：3个埋线组均选取“大椎”、双侧“足三里”进行埋线。埋线前先以0.5 ml/100 g剂量腹腔注射4%的水合氯醛进行麻醉，麻醉后将埋线穴位处剃毛，充分暴露穴位区域，碘伏常规消毒。将4-0号医用羊肠线剪成5 mm的小段，用镊子将其置入6号半一次性无菌注射器针头内，一手持注射针斜刺入穴位内，另一手持去掉针尖的0.25×40 mm毫针从注射针的另一端进入注射针的针孔内，抵住毫针针尾将羊肠线推入穴位内，感觉注射器针内有空虚感时方可出针，并确认羊肠线已埋入大鼠体内，1周1次。实验结束后，采集大鼠血液进行Hb及动脉血气相关指标检测。

1.6 观察指标及检测方法

血红蛋白(Hb)含量：治疗结束后采集各组大鼠腹腔静脉血2 ml立即进行Hb检测，记录其含量变化。

动脉血气分析：治疗结束后用动脉血气采血针采集各组大鼠腹主动脉血2 ml，立即进行动脉血气分析，分别检测记录pH、PaO2、PaCO2、SaO2各项指标。

1.7 统计学方法

2 结果

2.1 各组大鼠Hb含量检测及动脉血气分析(pH、PaO2、PaCO2、SaO2)

表1显示，与空白组比较，模型组大鼠Hb含量显著升高(P<0.01)，而动脉血气各项指标均不同程度降低(P<0.01，P<0.05)，表明大鼠出现了急性高原缺氧反应，模型复制成功。与模型组比较，红景天组与3个埋线组Hb含量均明显降低(P<0.01)，PaO2、PaCO2、SaO2及埋线C组的pH值明显升高(P<0.01，P<0.05)，表明红景天和穴位埋线均能影响Hb含量及动脉血气相关指标，改善模型大鼠的组织缺氧状况。其中埋线B、C组较红景天组Hb含量更低(P<0.01)，PaO2、PaCO2、SaO2更高(P<0.01，P<0.05)，表明造模后1周和造模前后各1周均给予穴位埋线治疗，对Hb含量及动脉血气影响较红景天更明显；进一步对3个埋线组间比较得出，埋线C组对Hb含量、PaO2、PaCO2、SaO2各项指标的干预效果最为明显(P<0.01)，即造模前后各1周均给予穴位埋线治疗，对促进高原缺氧的改善作用最佳。

表1 各组大鼠Hb含量及动脉血气(pH、PaO2、PaCO2、SaO2)分析比较

注：与空白组比较：△△P<0.01；与模型组比较：#P<0.05,##P<0.01；与红景天组比较：▲P<0.05,▲▲P<0.01；与埋线B组比较：**P<0.01

3 讨论

当人们从平原地区快速进入氧含量稀薄的高原地区时，常会发生急性高原病，严重时会引发急性高原脑水肿、肺水肿等致命性疾病[5]。特殊的高原环境造成组织缺氧，机体会发生一系列生理和病理改变，血液系统、循环系统、神经系统等都可能受到严重影响，从而导致机体结构与功能发生明显改变[6]。

Hb的主要功能是载运氧分子，是反映血氧运载能力、血液循环能力及组织用氧能力的重要指标[7]。而急性缺氧时，Hb含量迅速上升，因此恢复Hb含量是改善组织缺氧、缓解高原急性缺氧的重要靶点之一[8]。本实验结果发现，穴位埋线可明显降低模型大鼠的Hb含量，以埋线C组最为显著，表明穴位埋线可有效预防和治疗急性高原缺氧，并提示治疗效果与埋线时机与频次有关。

血气分析常用于反映组织供氧与耗氧的情况，对机体暴露高原潜在损害的早期具有重要提示意义[8]。低压缺氧环境下的PaO2降低，造成肺泡气分压也相应降低，从而导致机体PaO2和SaO2降低，直接影响血液对组织氧的供应。PaO2降低、刺激呼吸中枢，导致呼吸加深加快，从而使PCO2降低。PCO2的降低可以引起低碳酸血症及呼吸性碱中毒，是衡量呼吸性酸碱平衡失调的重要指标，用以反映肺泡通气情况[8]。本实验发现，3个埋线组PaO2、PaCO2、SaO2均较模型组显著升高，尤以造模前后均给予埋线干预的埋线C组最为明显。据此表明，穴位埋线可以提高急性高原缺氧大鼠的氧代谢动力学相关指标，增加肺通气量和肺气血交换能力，从而增加机体在低氧环境下对氧的利用，且治疗效果与埋线时机与频次有关。有研究发现，随着缺氧时间的延长，代偿性呼吸加深加快，血液pH值最终降低并呈酸性[8]。正常血液pH浮动幅度很小，而血液pH的细微改变对机体的影响或是其代表的意义又是重大的，呼吸功能是影响其变化的重要原因之一[9]。本实验中对pH变化干预不明显，可能正是由于pH本身浮动范围较小，PCO2缓解的程度不足以纠正偏离的血液pH，以及采血和检验过程本身可能与外界空气接触等原因而造成的[10]。

大椎为督脉要穴，具有通上达下、通调振奋督阳的作用，为治疗急性病证的要穴。足三里为培元固本之要穴，被广泛应用于各科急慢性疾病的治疗。有研究表明，针灸大椎或足三里穴可有效改善机体氧代谢能力，并提高全身机能的作用[11-12]，埋线更能发挥与延长这种良性作用。相关的实验研究也发现，在大椎、足三里进行穴位埋线能通过修复血管应激性损伤，且显著改善缺氧患者的心、脑、肺功能，对急性高原缺氧反应具有良好的防治作用[13]。

急性高原缺氧是人们进入高原地区的一大挑战，亦是引发急性高原病的启动因子[14]。本实验结果表明，穴位埋线可有效防治模型大鼠的急性高原缺氧症状，在蛋白线被吸收的过程中可对穴位产生长时间的良性刺激作用，同时操作简便无不适感，这是传统针刺或药物所不具备的优点，为急性高原缺氧的防治提供了简便有效的治疗方法。

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