澳门地区鸡源产气荚膜梭菌的污染情况及基因分型

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产气荚膜梭菌是一种在自然界具有广泛的分布，在土壤、食物、饲料、污水、粪便中均有生长，是人畜肠道中正常菌群之一[1]。能引起人类食物中毒、相关性腹泻和动物腹泻等疾病的重要病原菌。症状通常为下痢(带血腹泻)与腹痛，偶尔伴随恶心、呕吐与发烧，病发期通常为10 h～12 h，患者通常可于24 h～48 h内康复，绝少引发致命疾病，但对于小孩、老人、及免疫力差的人，会较易出现严重及持续症状[2]。可惜在澳门地区公共卫生常规检测项目中，除罐头食物以外，其它食品并没有进行常规检测，有关此菌的研究资料更是缺乏。因此本研究进行此菌的分离鉴定和基因分型调查，分析食品中产气荚膜梭菌的污染情况以及其基因型分布。

1　材料与方法

1.1样本采集从本澳的传统市场及超级市场中购买60个鸡肠、30个新鲜鸡及30个冰鲜鸡样本，总样本量为120个。如8 h内不能进行检验，应以无菌操作称取25 g样本加入等量缓冲甘油-氯化钠溶液，并尽快置于-80 ℃低温冰箱中冷冻保存[3]。

1.2菌株阳性菌株：产气荚膜梭菌A型(NCTC 8327)由澳门理工学院高等卫生学校保存，产气荚膜梭菌B型(NCTC 13110)、产气荚膜梭菌C型(NCTC 8081)、产气荚膜梭菌E型(NCTC 8084)等菌购自英国公共健康实验中心国家标准菌株库。 阴性菌株：金黄色葡萄球菌ATCC 29213、大肠埃希氏菌ATCC 25922、粪肠球菌标ATCC 29212、鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028、化脓性链球菌 ATCC 19615、普通变形杆菌ATCC 13315、蜡样芽孢杆菌ATCC 11778等菌由澳门理工学院高等卫生学校保存。

1.3培养基和试剂甘油-氯化钠溶液购自青岛高科技工业园海博生物技术有……