2016年从业人员健康体检志贺氏菌检测结果分析及预防管理

胡静华

[摘要] 目的 探讨2016年从业人员健康体检志贺氏菌检测结果分析及预防管理。方法 选取2016年来该中心的餐饮与公共服务的从业人员，样本数为79 947，并根据春、夏、秋和冬4个季节进行划分，对样本进行志贺氏菌核酸试剂盒的检测，分析检测结果，并提出预防措施。结果 从业人员体检中志贺氏菌的检出率，春季为0.020%（4/19 917）、夏季为0.025%（5/20 165）、秋季为0.020%（4/19 811）和冬季为0.020%（4/20 054），各季节检出率的变化不大，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 通过志贺氏菌核酸试剂盒进行PCR荧光检测，并且分析志贺氏菌检测结果，有助于判断所检出菌是否为志贺氏菌，同时通过加强预防消毒，切断病原菌，有助于保证社会安全。

[关键词] 从业人员；健康体检；志贺氏菌；结果分析；预防管理

[中图分类号] R194.3 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2018）02（a）-0158-02

随着生活水平的提高，越来越多的人开始注重养生、保健，每年的定期健康体检也必不可少。所谓的健康体检是指通过医学的手段，了解自身的身体情况，如健康状况和疾病状态，根据健康隐患和疾病线索，可以做到尽早发现疾病、尽早治疗的目的，有效地抑制了疾病的扩大，减少了受检者的痛苦[1]。从业人员中从事餐饮与公共服务的人员来讲，每年的预防性健康体检是必不可少的环节，检查项目除了常规的化脓或渗出性皮肤病、活动性肺结核检查及转氨酶、沙门氏菌检测外，志贺氏菌检测也越来越被重视。志贺氏菌通过摄取的食物污染途径即可传播，常见的临床症状是腹泻、恶心、呕吐、发烧等。志贺氏菌的血清可分为福氏志贺菌（B群）、鲍氏志贺菌（C群）、痢疾志贺菌（A群）、宋内氏志贺菌（D群）4种类型，其中福氏志贺菌是最为普遍的感染病毒[2]。目前，志贺氏菌的检测方法除了病原菌的分离鉴定、生化试验、凝集反应等方法外，志贺氏菌核酸试剂盒PCR荧光的检测方法已逐步应用于临床，该方法具有用量小、检测迅速、灵敏度高等特点。该中心选取2016年对健康体检的从业人员采用志贺氏菌核酸试剂盒的方法进行志贺氏菌检测，分析检测结果且提出预防管理措施，现总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取在该中心志贺氏菌检测的样本数为79 947，该样本数来源于餐饮与公共服务的从业人员，其中春季的样本数为19 917，夏季的样本数为20 165，秋季的样本数为19 811，冬季的样本数为20 054。4个季节在样本数方面差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 样本处理 样本选择自然的粪便进行采集，并且挑选粘液部位的粪便，样本量为2～3 g。将样本放到增菌培养基中，该培养基选择亚硒酸盐胱氨酸增菌液，用量为3～5 mL，放置在37℃培养箱中培养4～6 h。

备注：①样本采集后，要及时保存，并且尽量将样本密闭送检，避免样本间出现交叉污染；②样本采集后，要及时检测，若不能及时检测，存放到-20℃下，可以保存12个月；③样本需要运输时，冰袋的低温运输方式不可超过3 d；④样本不能反复冻融，次数不能超过5次。

1.2.2 实验室检测方法 采取荧光PCR法进行志贺氏菌的检测，其中志贺氏菌核酸检测的试剂盒包括：核酸扩增反应液、酶混合液、志贺反应液、阳性对照、去RNA酶水、DNA提取液。试剂盒存放在-20℃中保存，用时将各个试剂融化后，短暂进行离心后使用。根据试剂盒的说明书中各个试剂的用量进行取样至PCR反应管中，每次实验时做好空白对照与阳性对照。将反应管放置到荧光PCR扩增仪中，并且设定相应参数：UNG酶处理（50℃下5 min，进行1个循环），预变性（95℃下5 min，进行1个循环），变性（95℃下10 s，进行40个循环），退火、延伸与检测荧光（55℃下40 s，进行40个循环），其中荧光检测的通道为Vic、Fam和Cy5。

1.3 评价标准

志贺氏菌阴性结果为没有典型的S型扩增曲线或者CT值为Undet，同时内标对照具有典型的S型扩增曲线或者CT值≤30；志贺氏菌阳性结果为典型的S型扩增曲线或者CT值≤35.5，同时内标对照的结果与阴性结果一致。若样本没有出现典型的S型扩增曲线或者CT值为Undet，并且内标对照也同样如此，则实验判定无效，需重新检测[3]。

1.4 统计方法

观察比较每个季节的数据，应用SPSS 20.0统计学软件完成数据的分析，计数资料用百分率表示，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

从业人员体检中志贺氏菌的检出率，4个季节的变化不大，除了夏季的检出率为0.025%外，其他季节为0.020%，差异无统计学意义（χ2=0.413，P=0.8，P>0.05）。

3 讨论

志贺氏菌具有较强的致病力，可产生内外毒素，因此很容易引起细菌性痢疾[4]。志贺氏菌感染后的临床表现为腹泻、恶心、呕吐、发烧等。目前，志贺氏菌的预防通常采用口服减毒的活菌苗，如2a变异株和Sd株等，虽然该活菌苗具有一定的预防能力，但是它具有服用量较大、维持时间短、免疫力较弱、型间没有保护性交叉免疫等缺点，因此在临床应用具有一定难度。一旦出现志贺氏菌感染引起的细菌性痢疾，通常采用中西药进行治疗，其中西药通常使用氨苄青霉素、氯霉素或磺胺类等药物；中药使用马齿笕、白头翁、黄连与黄柏等药物。总之，无论作为公众服务行业还是餐饮行业，都需要养成良好的卫生习惯，做到勤洗手与多消毒，从而可以切断病原菌的传播。

随着生活水平的提高，越来越多的人跻身于公共区域，来缓解生活及工作压力，因此公共区域的卫生安全需重点关注，尤其是在公众服务或餐饮行业要求从业人员进行必要的预防性健康体检。所谓预防性健康体检是指通过医学的手段，了解自身的身体情况，如健康状况和疾病状态，根据健康隐患和疾病线索，可以做到尽早发现疾病、尽早治疗的目的，有效地抑制了疾病的扩大，减少了受检者的痛苦[5-7]。目前，预防性健康体检的检查项目包括化脓或渗出性皮肤病、活动性肺结核检查及转氨酶、志贺氏菌、沙门氏菌检测。志贺氏菌通过摄取的食物污染途径即可传播，它具有较强的致病力，可产生内外毒素，因此很容易引起细菌性痢疾，其临床症状是腹泻、恶心、呕吐、发烧等。志贺氏菌的血清可分为福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、痢疾志贺菌、宋内志贺菌4种类型[8-9]。目前，除了病原菌的分离鉴定、生化试验、凝集反应等方法外，志贺氏菌核酸试剂盒PCR荧光的检测方法已逐步应用于临床，该方法具有用量小、检测迅速、灵敏度高等特点。该研究首先对样本进行密封送检后，进行增菌培养；按照志贺氏菌核酸检测的试剂盒中的说明书进行样品准备，并将制备好的样品放置到PCR荧光扩增仪中进行荧光扩增，扩增的程序先后為UNG酶处理、预变性、变性、退火、延伸与检测荧光步骤，并根据内标对照与样本的结果，分析是否为志贺氏菌阳性反应，值得一提的是，若内标对照和样本的结果都显示为没有典型的S型扩增曲线或者CT值为Undet时，则说明实验失效，需要重新进行检测。目前，采用口服减毒的活菌苗方法进行预防志贺氏菌感染，因为该方法的缺点较多，很难大量应用到临床，因此需从业人员做到勤洗手与常消毒，有利于切断病原菌，一旦感染志贺氏菌通常采用中药与西药的方式进行治疗。总之，通过志贺氏菌核酸试剂盒进行PCR荧光检测，并且分析志贺氏菌检测结果，有助于判断所检出菌是否为志贺氏菌，同时通过加强预防消毒，切断病原菌，有助于保证社会安全。

[参考文献]

[1] 李雪莲.从业人员健康体检工作存在的问题及管理对策分析[J].继续医学教育，2016（1）：90-91.

[2] 刘伟华.食品公共场所从业人员健康体检结果分析[J].疾病监测与控制，2017，11（8）：677.

[3] 田维峰.关于志贺氏菌检验方法的探讨[J].医疗卫生：引文版，2016（3）：49.

[4] 逯建华，何建凡，许舒乐.深圳市2010-2015年从业人员预防性健康体检结果分析[J].应用预防医学，2016，22（5）：461-462.

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[8] 沈静，张静，忻郦菁.2010-2014年上海市虹口区腹泻病例中志贺氏菌的检测及耐药分析[J].医药前沿，2015，5（32）：332-333.

[9] 董路宁，党荣理，刘栓奎.乌鲁木齐地区135株志贺氏菌耐药性调查[J].解放军预防医学杂志，2013，31（5）：407-410.

（收稿日期：2017-11-06）