乌饭树叶总黄酮对链脲佐菌素致II型糖尿病小鼠降血糖作用的研究

陈奕好

摘 要：本实验旨在探索乌饭树叶总黄酮对链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）所致II型糖尿病（type II diabetes mellitus， DM2）模型小鼠的降血糖作用。实验通过注射STZ构建II型糖尿病小鼠模型，用提取出的乌饭树叶总黄酮灌胃治疗6周后，检测小鼠体重和空腹血糖含量的变化。结果显示，灌胃治疗6周后，与糖尿病模型组相比，乌饭树叶总黄酮高剂量组小鼠的体重显著增加（p<0.05），血糖含量明显降低（p<0.01）。由此可知，乌饭树叶总黄酮对STZ致II型糖尿病小鼠具有一定降血糖作用，从而为糖尿病的防治提供一定科学依据和研究基础。

关键词：乌饭树叶；总黄酮；链脲佐菌素；II型糖尿病

文章编号：1004-7026（2018）01-0117-02 中国图书分类号：R285.5 文献标志码：A

糖尿病（diabetes mellitus， DM）是一种和胰岛素密切相关的受多因素影响代谢性疾病，主要由胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗引起，在全球范围内严重威胁人类身心健康[1]。糖尿病主要类型分为I型糖尿病（TIDM）和II型糖尿病（TIIDM），其中后者占绝大部分比例。II型糖尿病主要特征为胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的减退，是环境因素和遗传因素共同作用所导致的，病因十分复杂且并发症呈多样化[2]。其主要临床表现：多饮、多尿、多食、易疲惫及身体质量下降等。近年来随着全球人口老龄化趋势的加剧，糖尿病发病率呈逐年递增的趋势。近年来大量文献指出，存在于许多野生植物中的黄酮类化合物具有降血糖作用[3； 4]。黄酮类化合物具有普遍的生理活性，对防治心脑血管疾病和呼吸系统方面的疾病作用显著， 同时还具有抗病毒并加强机体免疫力的功效。乌饭树又名南烛、羊尘饭子，属杜鹃花科常绿灌木，广泛分布于我国福建、江苏、广东等地。实验表明，乌饭树叶含有多种化学成分，主要包括黄酮类、维生素、多糖类、果胶、有机酸等等[5]。但现阶段对于乌饭树叶的研究还不够深入，本研究旨在通过注射链脲佐菌素构建II型糖尿病小鼠模型，经不同浓度乌饭树叶总黄酮灌胃治疗6周后的小鼠体重和血糖含量等指标变化，探讨乌饭树叶总黄酮的降血糖作用，为乌饭树的资源开放与有效利用提供一定依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

ICR小鼠50只，雄性，体重24～26g，由四川省成都达硕实验动物中心提供，实验动物合格证号SCXK（川）2015-030。小鼠自由进食饮水，室温保持25℃左右。

1.2 试剂与仪器

乌饭树叶购自成都市药材市场，经四川师范大学生命科学学院植物学教研室鉴定为乌饭树叶Vaccinium bracteatum Thunb.。链脲佐菌素（源叶生物有限公司），葡萄糖测定试剂盒（上海荣盛生物药业有限公司）；芦丁标准品（四川省维克奇生物科技有限公司）；大孔树脂HP600（东虹化工有限公司）；其余盐酸、氢氧化钠、氯化钠、无水乙醇等均为国产分析纯。

电子天平JD200-3（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司），超声波清洗仪（宁波新芝生物科技股份有限公司），紫外可见分光光度计（上海天美科学仪器有限公司），旋转蒸发仪R510B（星海王生化设备有限公司），强生稳豪倍健型血糖仪（强生医药有限公司）。

1.3 乌饭树叶总黄酮的提取与制备

参照文献方法提取乌饭树叶总黄酮[6； 7]，通过分光光度计法检测浓度，配制成生药浓度为20mg/mL的水溶液备用。

1.4 糖尿病小鼠模型的构建与治疗

将50只小鼠适应性喂养3d后，随机分为5组（每组10只），分别为糖尿病模型组、阳性对照组、乌饭树叶总黄酮高剂量组、乌饭树叶总黄酮低剂量组和正常对照组。每只用苦味酸标记并禁食12h后，其中前四组小鼠腹腔注射STZ 150mg/kg，连续注射3d。正常对照组小鼠注射等体积生理盐水。建模结束后，乌饭树叶总黄酮高剂量组和乌饭树叶总黄酮低剂量组分别进行灌胃治疗，灌胃浓度为150mg/kg以及50mg/kg，治疗持续6周。阳性对照组连续灌胃二甲双胍溶液40mg/kg，模型组和正常对照组每日给予同等体积生理盐水。

1.5 糖尿病小鼠指标检测

（1）体重：在灌胃治疗开始后第0、3、6周，称重测量各组小鼠体重并记录。（2）空腹血糖检测：在灌胃治疗开始后第0、3、6周，对小鼠进行空腹血糖测定，测定前禁食12 h。

1.6 统计学分析

用Excel 2013软件处理数据，采用平均数±标准差（x±s）进行分析，各组数据采用单因素方差分析，p<0.05为显著性差异， p<0.01为极显著差异。

2 实验结果

2.1 乌饭树叶总黄酮对糖尿病小鼠体重的影响

详见表1，与正常对照组相比，糖尿病模型组小鼠的体重在建模后（即第0周）无明显差异，在灌胃生理盐水第3周和第6周均有显著降低（P<0.01）。与糖尿病模型组相比，总黄酮高、低剂量组小鼠的体重在建模后（即第0周）均無明显变化，在灌胃治疗第3周升高（P<0.05），在灌胃治疗第6周升高显著（P<0.01）。阳性对照组小鼠体重在生理盐水灌胃第3周及第6周，较糖尿病模型组均有显著提高（P<0.01）。

2.2 乌饭树叶总黄酮对糖尿病小鼠血糖的影响

详见表2，与正常对照组相比，糖尿病模型组小鼠的空腹血糖含量在给药第0、3、6周时均明显高于正常对照组（P<0.01）。在建模后即给药第0周，糖尿病模型组、总黄酮高、低剂量组和阳性对照组的空腹血糖含量均无明显差异。灌胃给药第3周时，与模型组小鼠相比，阳性对照组空腹血糖含量较低（P<0.05），总黄酮高、低剂量组无明显差异。在第6周时，阳性对照组和总黄酮高剂量组小鼠的空腹血糖含量较糖尿病模型组相比降低明显（P<0.01）。

3 讨论

目前医学上对糖尿病的治疗尚无有效的治愈方法，主要以控制患者血糖水平及预防并发症。糖尿病已经被视为生活中严重危害人类身心健康的第三大非传染性疾病，仅次于恶性肿瘤和心血管疾病[8； 9]。糖尿病小鼠模型是通过损伤小鼠胰脏或胰岛？茁-细胞导致胰岛素的分泌不足，使小鼠出现高血糖进而形成糖尿病。作为胰岛？茁细胞毒剂，链脲佐菌素可选择性地损坏其胰岛？茁细胞，导致血清胰岛素出现不同程度地下降并且伴随小鼠血糖升高，从而建立II型糖尿病小鼠模型[10； 11]。

研究表明，植物中的多种活性成分在一些慢性疾病中發挥着重要作用。本研究发现乌饭树叶总黄酮高、低剂量组能在一定程度降低II型糖尿病小鼠空腹血糖含量，且降血糖效果随总黄酮剂量升高而加强。结果表明乌饭树叶总黄酮能降低STZ致II型糖尿病小鼠所产生的高血糖，为乌饭树叶的资源开发与糖尿病的防治提供一定的科学依据。

参考文献：

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