单增李斯特菌CdaA的抗原表位分析及抗体的制备

孙静娟 邱景璇 曾海娟 丁承超 王广彬 李杰 王淑娟 刘箐

（1. 上海理工大学医疗器械与食品学院，上海 200093；2. 徐州绿健乳品饮料有限公司，徐州 221006）

单增李斯特菌是一种兼性厌氧细菌，同时也是胞内寄生菌，能够引起李斯特菌病。李斯特菌病的易感人群包括新生儿、孕妇、老年人和免疫受损的病人，感染死亡率极高［1-2］。单增李斯特菌广泛存在于自然环境中，可以在冷藏温度下生长繁殖，并能够在较宽泛的盐浓度、温度和pH值条件下生存，使得其在食品加工企业很难得到控制［3］。另外，单增李斯特菌能够黏附在食品加工器械上形成菌膜以逃避外界对它的杀伤，进而增加食品污染的可能性［4］。因此，能够准确高效地检出样品中单增李斯特菌就显得非常重要。

相关学者研究了单增李斯特菌cdaA的结构域分布及表达模式，并衍射出CdaA晶体结构［5-6］。cdaA编码的腺苷酸环化酶CdaA，催化线性二腺苷酸环化成环二腺苷酸（Cyclic di-adenosine monophosphate，c-di-AMP），c-di-AMP作为第二信使参与重要的细胞活动，包括细胞壁代谢、维持DNA完整性、离子通道、转录调节及酶的变构调节［7］。最重要的是，c-di-AMP作为分泌因子能刺激宿主细胞胞质反应，激发先天免疫的胞浆途径［8］。腺苷酸环化酶的过表达能引起宿主细胞在感染期间机体免疫反应增强。研究表明，多种不同的菌群都能产生c-di-AMP［9］，海栖热袍菌中DNA完整性扫描蛋白质DisA首次发现腺苷酸环化酶［10］。除了DisA环化酶，枯草芽孢杆菌还依赖CdaA环化酶和CdaS环化酶协作调节c-di-AMP水平［11］，但单增李斯特菌只有一种CdaA类型的环化酶协作调节c-di-AMP水平。……