基于诺丽叶片愈伤组织的细胞悬浮系的建立

张正雪 蓝增全 吴田

（1. 西南林业大学环境科学与工程学院，昆明 650224；2. 西南林业大学园林学院，昆明 650224）

诺丽是一种常绿的热带多年生阔叶小乔木或灌木，由英文名Noni翻译而来，别名海巴戟、诺尼［1］、四季果［2］等，是巴戟天属茜草科植物，拉丁名为Morinda citrifoliaL，发源于南太平洋岛屿［3］，因其对温度的特殊需求，生境较为苛刻，故而在全球的分布较为狭窄。主要分布于大溪地、夏威夷、印度尼西亚、菲律宾、以及我国的海南岛、西沙群岛［4］和台湾岛、云南西双版纳［5］等。诺丽叶含有很多生化成分，有比较强的抗氧化能力［6］，主要是抗氧化剂和生物类黄酮，如萜烯类化合物［7-11］和黄酮甙类等［7］。2009年张伟敏等［12］实验证明了诺丽叶片具有降血压血糖和抗氧化的能力。

近年来，研究者们通过建立藏红花的细胞悬浮系获得了藏红花素［13］，通过建立喜树［14］和新疆雪莲［15］等植物的细胞悬浮系，也分别获得了喜树碱［16］和黄酮［15］。国内目前对诺丽的使用主要是诺丽果，而对诺丽叶片的使用几乎没有，实际上叶片中富含一些抗氧化剂和生物类黄酮类物质。因此，在本课题组前期对诺丽的不同外植体（根、茎、叶）进行了愈伤组织诱导［17-19］的基础上，本实验拟通过探索MS液体培养基的激素组成、初始接种量以及在细胞悬浮培养过程中pH值的变化、悬浮细胞生长曲线、细胞活力、细胞形态和细胞存活率等参数，确定继代周期，完成诺丽叶片细胞悬浮体系的建立，以为后续诺丽叶片中次生代谢物的诱导奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

本实验所用材料为淡黄色、质地疏松的愈伤组织。……