联合检测血清尿酸、β2微球蛋白和尿液轻链在多发性骨髓瘤早期诊断中的应用

罗敏琪 张宏斌 许珏 覃舒琪 董慧敏

中山大学附属第三医院检验科（广州510630）

多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是常见的恶性浆细胞疾病，是骨髓中单一浆细胞株异常增生和恶性积累的一种肿瘤性疾病［1］，约占造血系统恶性肿瘤的15%左右，恶性肿瘤的1%［2］。本病好发于中老年人，男性多于女性，由于MM起病隐匿、缓慢，全身各个系统均可累及，临床表现复杂，常出现的临床症状有贫血、出血、反复感染、骨痛、肾功能不全以及相关免疫功能障碍等。由于症状不典型，导致许多病例在出现首发症状时不会疑诊本病，极易出现漏诊、误诊。据文献报道，该病误诊率高达65.17%［3］。目前，骨髓涂片是MM诊断的重要依据，但由于MM患者的骨髓瘤细胞在骨髓中常呈灶性分布［4］，骨髓纤维化等因素也会对骨髓涂片取材造成干扰，加上骨髓涂片本身对患者也会造成损伤，临床上进行骨髓穿刺的MM患者往往已处于疾病中晚期。因此，寻找用于MM早期辅助诊断的检测指标非常重要。为有效降低MM的漏诊率和误诊率，提高患者生存质量和生存率，我们通过回顾性分析96例患者在确诊MM之前发病早期的血清尿酸（UA）、β2微球蛋白（β2⁃MG）和尿液κ、λ轻链检测结果，以探讨三项指标联合检测在MM早期诊断中的应用价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2014年7月至2016年6月期间在中山大学附属第三医院住院最终确诊为MM的96例患者作为观察对象（MM组），所有病例均符合世界卫生组织（WHO）的诊断标准［5］，MM发病早期的检测结果及相关病史资料完整；剔除合并其他血液系统疾病、不以MM为原发病但可影响血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ轻链水平的并发症患者。其中男56例，女40例，男女性别比为1.4∶1，年龄30～88岁，平均61.65岁，中位年龄63岁。另选择2016年12月至2017年3月期间在本院体检，与MM组性别、年龄组成相似的85例健康成人作为对照组，其中男51例，女34例，男女性别比为1.5∶1，年龄26～84岁，平均55.76岁。

1.2 研究方法 回顾性收集MM组患者发病早期血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ轻链的检测结果。对照组健康成人于体检时空腹采血，分别采用尿酸酶法和免疫透射比浊法在日立7600⁃020全自动生化分析仪检测血清UA、β2⁃MG；并收集尿液，离心后采用散射比浊法在西门子BN Pro Spec特定蛋白分析仪检测尿液κ、λ轻链。样本处理和检测均严格按照操作规程进行。血清UA≥420 μmol/L，血清β2⁃MG≥3.0 mg/L，尿液κ、λ轻链≥7.1 mg/L、≥3.9 mg/L判断为异常。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0统计学软件包进行数据分析，计量资料用±s表示。组间比较采用独立样本的t检验；服从正态分布的数据采用单因素方差分析来检验，不服从正态分布的数据比较采用非参数检验；采用χ2检验比较不同联合检测方式之间的灵敏度与特异度。P＜0.05认为差异具有统计学意义，置信区间为95%。

2 结果

2.1 不同性别、不同年龄段MM患者血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ轻链检测结果比较 对96例MM组患者进行性别、年龄分层，并对各个分层的检测结果进行统计分析，结果见表1。四项指标在不同性别之间比较差异无显著性（P＞0.05）；且四项指标在不同年龄段之间无论男性还是女性总体上比较差异无显著性（P＞0.05）；仅大于80岁年龄段男性MM患者尿液λ轻链水平与其他年龄段比较差异存在显著性（P＜0.05），60～69岁年龄段男性MM患者尿液κ轻链水平与50～59岁年龄段比较差异存在显著性（P＜0.05），而不同年龄段女性MM患者四项指标比较差异均无显著性（P＞0.05）。

表1 不同性别、不同年龄段MM患者血清UA、β2⁃MG和尿液轻链检测结果比较Tab.1 Comparison of the results of serum UA，β2⁃MG and urine light chain in MM patients in different sex and age ± s

表1 不同性别、不同年龄段MM患者血清UA、β2⁃MG和尿液轻链检测结果比较Tab.1 Comparison of the results of serum UA，β2⁃MG and urine light chain in MM patients in different sex and age ± s

注：大于80岁年龄段男性MM患者尿液λ轻链水平与其他年龄段比较，*P＜0.05；60～69岁年龄段男性MM患者尿液κ轻链水平与50～59岁年龄段比较，#P＜0.05

分层男性～49岁50～59岁60～69岁70～79岁80岁～女性～49岁50～59岁60～69岁70～79岁80岁～例数56 15 11 13 12 5 40 8 4 1 5 13 0血清UA（μmol/L）489.97±192.70 506.36±220.21 490.95±215.13 478.98±151.29 454.08±180.30 556.68±243.30 430.80±167.10 394.92±134.76 378.60±125.09 458.70±169.91 431.22±195.98-血清β2⁃MG（mg/L）10.53±13.73 7.24±5.74 16.70±22.26 6.33±3.07 12.38±16.97 12.78±13.28 8.37±7.94 4.19±1.71 6.03±5.18 10.33±6.73 8.92±10.80-尿液κ轻链（mg/L）246.30±615.40 64.50±81.76 615.66±1 150.57#222.90±433.70 81.68±134.70 294.55±389.55 229.88±505.13 89.68±60.80 324.24±371.64 138.64±326.46 376.28±774.98-尿液λ轻链（mg/L）304.44±916.59 181.64±353.03*443.50±788.48*24.48±56.91*17.28±24.61*2 594.56±3 656.37 533.97±1 214.62 56.75±71.57 230.65±217.24 906.65±1 606.77 331.35±959.77-

2.2 MM组与对照组血清UA、β2⁃MG和尿液轻链检测结果比较 三项指标MM组与对照组之间比较差异均有显著性（P＜0.05）。见表2。

2.3 MM组与对照组血清UA、β2⁃MG和尿液轻链单项检测以及两两和三项平行检测、联合检测的阳性检出情况 见表3、4。2.4 血清UA、β2⁃MG和尿液轻链单项检测以及联合检测诊断MM的灵敏度和特异度比较 三项指标平行联合检测时灵敏度达到最高，为93.32%，系列联合检测时特异度达到最高，为97.90%。见表5、6。

表2 MM组与对照组血清UA、β2⁃MG和尿液轻链检测结果比较Tab.2 Comparison of the results of serum UA，β2⁃MG and urine light chain in MM group and control group ± s

表2 MM组与对照组血清UA、β2⁃MG和尿液轻链检测结果比较Tab.2 Comparison of the results of serum UA，β2⁃MG and urine light chain in MM group and control group ± s

注：与对照组比较，*P＜0.05

组别MM组对照组例数96 85 UA（μmol/L）465.79±184.07*359.78±90.32 β2⁃MG（mg/L）9.64±11.67*2.28±0.87 κ轻链（mg/L）239.16±566.14*9.49±5.55 λ轻链（mg/L）404.23±1 054.42*4.07±1.21

表3 MM组与对照组血清UA、β2⁃MG和尿液轻链单项阳性检出情况Tab.3 Positive rate of serum UA，β2⁃MG and urine light chain by single detection in MM group and control group 例（%）

3 讨论

MM是克隆性浆细胞异常增生的一种疾病，单克隆浆细胞恶性增生并分泌大量单克隆免疫球蛋白，患者男女比例大约为（2～2.5）∶1。据相关文献报道，欧美国家MM发病高峰年龄为66岁［5］，而我国MM患者中位年龄大概为57岁［6］，与其相比趋于年轻化，所以多发性骨髓瘤的早期诊断非常重要。目前诊断确诊MM的重要依据是骨髓涂片［7］，但由于其操作易受干扰及有损伤性［8］，因此寻找相关生化指标的联合检测为MM的早期诊断服务就显得非常重要。

表4 MM组与对照组血清UA、β2⁃MG和尿液轻链联合检测阳性检出情况Tab.4 Positive rate of serum UA，β2⁃MG and urine light chain by combined detection in MM group and control group 例（%）

表5 血清UA、β2⁃MG和尿液轻链单项检测诊断MM的灵敏度和特异度Tab.5 Sensitivity and specificity of serum UA，β2⁃MG and urine light chain in single detection in MM patients %

尿酸是机体内核酸中嘌呤代谢的终产物，主要经肾脏从尿液中排出，MM属于恶性增生的浆细胞侵犯骨髓产生的溶骨性病变，大量的瘤细胞核酸分解加强，从而引起患者血中UA含量上升，故血清UA为MM的一个较为特异的生化指标。本研究结果显示，确诊为MM的患者其血清UA指标平均水平为（465.79±184.07）μmol/L，与对照组比较差异有显著性（P＜0.05），其数值明显升高，而该指标在不同性别以及不同年龄患者之间并无明显的差异（P＞0.05）。β2⁃MG是机体有核细胞合成释放的蛋白质，主要由淋巴细胞产生，但机体所有的有核细胞都能不同程度地产生β2⁃MG，特别以代谢活跃的恶性肿瘤细胞为主。在MM中，由于瘤细胞的增殖，大量合成并分泌β2⁃MG，同时瘤细胞坏死后大量释放β2⁃MG，并出现红细胞周转加速以及肾功能损害的现象而导致血中β2⁃MG水平增高；另外患者机体免疫反应系统遭到严重破坏后，可经免疫反应激活活化作用，使淋巴细胞的生物学活性作用明显增加，进而分泌大量的β2⁃MG［9］。许多文献报道认为血清β2⁃MG水平与MM的临床状态及预后关系非常密切［10⁃12］，故血清β2⁃MG也为一个诊断MM的较为敏感、特异的指标。本研究结果显示，MM组患者的血清β2⁃MG平均水平为（9.64±11.67）mg/L，明显高于对照组（P＜0.05），但其在MM患者中无性别、年龄之间的差异，即在不同性别以及年龄层之间的比较差异无统计学意义（P＞0.05）。正常人免疫球蛋白分子由2条重链和2条轻链组成，与5种免疫球蛋白相结合的轻链只有κ、λ两种。正常情况下，尿中无游离轻链出现，当尿中游离轻链升高或κ/λ比值异常，则提示免疫球蛋白组成发生了改变［13］，由于MM是一种恶性浆细胞单克隆增殖性疾病，会过量产生一种单克隆免疫球蛋白轻链，同时抑制另一种轻链的生成，过量的轻链经肾脏从尿液中排出，从而使尿液中出现κ、λ轻链［14⁃15］，而且尿液游离κ和λ不受肾脏功能及尿量影响，因此有较好的特异性和灵敏性。本研究结果显示，在MM患者的尿液标本中，出现了大量κ、λ轻链，与对照组相比具有明显的差异性（P＜0.05）。

表6 血清UA、β2⁃MG和尿液轻链联合检测诊断MM的灵敏度和特异度Tab.6 Sensitivity and specificity of serum UA，β2⁃MG and urine light chain in combined detection in MM patients %

本研究探讨血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ轻链三项指标联合检测在MM早期诊断中的临床应用价值，旨在通过三项指标的相关检测数据给临床医师提示，考虑病患MM的可能性，从而减少MM的漏诊、误诊，及早诊断治疗MM，提高患者的生存率。从单项检测和联合检测灵敏度、特异度的比较来看，经χ2检验，平行联合检测灵敏度与各单项检测的灵敏度之间，系列联合检测特异度与各单项检测的特异度之间有统计学意义（P＜0.05）在所有联合检测组合的方式中，血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ轻链三项联合检测的方式在平行联合检测时诊断MM的灵敏度最高，为93.32%；系列联合检测时诊断MM的特异度最高，为97.90%。说明当三项指标联合检测时，平行联合检测较单项检测明显提高了诊断的灵敏度，而系列联合检测较单项检测则明显提高了诊断的特异度，故三项指标联合检测为辅助MM早期诊断的最佳组合。通过对MM组96例患者进行性别以及年龄分层后，血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ链的比较来看，在性别方面，男性与女性之间这几项生化指标差异无统计学意义（P＞0.05）；在不同年龄层之间，除尿液κ及λ链在男性个别年龄分层之间具差异有显著性（P＜0.05）外，其余指标不同年龄层之间差异均无显著性（P＞0.05）。该结果则表现出在这三项指标中，患者的性别、年龄之间并无显著的关联性，说明不同性别、不同年龄的MM患者除尿液κ及λ链外，在这几项指标的表现上并无差距。因此，在MM的临床诊断和分析中，常规生化检查起着不可或缺的作用，其对MM的早期诊断起到的预警作用不容小觑，其中血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ链三项指标对MM有一定的特异性，在辅助早期诊断MM疾病上有重要的临床意义。在对患者的常规生化检测结果分析时，临床医生应注意血清UA、β2⁃MG和尿液κ、λ链三项指标的结果，当三项指标出现异常时，应考虑到MM的可能性，对患者加以进行免疫固定电泳等进一步确定是否为MM疾病的检查，从而减少MM的漏诊、误诊率，提早发现MM并及时进行治疗，从而提高患者的生存率。

本课题所研究的材料数量范围从一定意义上来看还是较少，并且研究材料中的MM组是已经确诊为MM的患者，其三项指标已经发生了明显的特异性改变，因此可能并不能很全面地反映出三项指标在不同性别以及不同年龄患者之间的差异，还需进一步更深入的研究。