小型猪腹腔镜肝缺血再灌注合并肝部分切除对肝细胞凋亡及相关基因影响的研究

张千振， 葛延松， 焦智慧， 李 辉， 白 鸽， 张建涛， 王洪斌

(东北农业大学动物医学学院， 黑龙江 哈尔滨 150030)

缺血再灌注损伤(IRI)是一种多因素参与的病理生理过程。肝脏是血供丰富和存在大量内皮细胞的器官，因此肝脏对缺血再灌注损伤非常敏感。肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏术后肝功能衰竭的重要因素之一，它多见于肝脏外科手术过程中，如肝部分切除术及肝移植术等[1]。研究表明，肝脏缺血再灌注损伤导致的细胞死亡，包括细胞坏死和细胞凋亡[2]。细胞凋亡是由特定的凋亡基因调控的程序性死亡，在维持机体内环境稳态和机体发育中至关重要[3]。腹腔镜技术具有切口小、损伤轻、恢复快的特点，并且成功应用于肝脏外科手术中。目前腹腔镜肝切除手术过程中缺血再灌注损伤对细胞凋亡的影响迄今未见报道，本研究应用腹腔镜技术建立小型猪肝脏缺血再灌注合并肝部分切除损伤模型，并检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA的表达及Caspase-3、Caspase-9酶活性，分析小型猪腹腔镜肝损伤与细胞凋亡的关系，为探讨缺血再灌注损伤的发病机制和保护性研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 广西巴马小型猪12头，4～6月龄，体重25～35 kg，经实验室和临床检查健康，整个试验过程中饲养管理环境一致。

1.2 主要设备与试剂 腹腔镜手术基本设备，Olympus 公司生产；左弯分离钳、直角分离铅、无损伤肠钳、弯头剪刀、单极电凝球、单极电凝钩、冲洗/吸引管，杭州光典公司生产；IntelliiVue MP30型重症监护仪，德国Philips公司生产；……