猪瘟抗体胶体金快速定量检测卡的研制

李成洪，宋青龙，王晓中，唐 达，傅 巍，杨春柳

(1.重庆市畜牧科学院，重庆 402460，2.北京龙科方舟生物工程技术有限公司，北京 100193； 3.国家饲料工程技术研究中心，北京 100193)

猪瘟是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性、发热、具有高度传染性的疫病，在自然条件下只感染猪，不同年龄、性别、品种的猪和野猪都易感，一年四季均可发生，且病死率高，传播迅速，蔓延地区广，对养猪业构成了极大威胁。本病在1833年首次发现于美国，之后其流行遍及全球，给养猪业造成巨大的经济损失[1]。20世纪50年代，我国猪瘟兔化弱毒疫苗问世后，对猪瘟的控制主要依赖于疫苗免疫，因此，疫苗免疫效果的优劣对猪瘟防控起了决定性作用，而猪瘟抗体水平的监测是疫苗免疫效果评价的主要方法[2]。目前市场上检测猪瘟抗体的产品主要是进口的ELISA试剂盒[3]，但其价格昂贵，需要专业人员操作，且检测时间长[4]。而现有的猪瘟抗体胶体金及荧光免疫层析检测卡，只能做定性检测[5]，即根据T线的有无判定样本中猪瘟抗体的阴阳性[6-8]。这种判定凭肉眼观察[9-10]，主观性较强，且结果对于疫苗免疫效价的评定意义不大。因此，应用胶体金免疫层析技术，结合胶体金定量读数仪，进行了快速定量猪瘟抗体检测卡的研制，以期可快速定量检测猪血清中猪瘟抗体水平。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验材料 氯金酸(HAuCl4·4H2O)，国药；猪瘟重组E2蛋白，北京龙科方舟生物工程技术有限公司；羊抗鼠IgG、小鼠IgG，上海金标生物科技有限公司；硝酸纤维素膜，Millipore；胶体金结合垫、样品垫、吸水纸，上海金标生物科技有限公司；……