隋晓丹
(长春中医药大学附属医院肝脾胃病科,吉林 长春 130021)
本实验通过观察肝脂溶颗粒对NAFLD模型大鼠肝脏组织TNF-α表达的影响,及肝脏组织TNF-α表达在非酒精性脂肪肝中的作用并探明调节其作用的传导途径,为中医临床干预治疗非酒精性脂肪肝提供理论依据和新的思路。
1.1 实验动物 Wistar大鼠60只,雄性,体质量(200±20) g。
1.2 药物 肝脂溶颗粒:长春中医学院附属医院制剂室,批准文号:长卫制药字 (96)1367号。多烯磷脂酰胆碱胶囊:赛诺非安万特(北京)制药有限公司,批准文号:国药准字H20059010。
2.1 非酒精性脂肪肝模型复制方法 大鼠适应环境1周后随机分为正常组9只、高脂组51只。正常组予普通饲料喂养,高脂组予高脂饲料(88%基础饲料、10%猪油、2%胆固醇)喂养,自由饮水。12周后随机选出7只大鼠(正常组1只,高脂组6只),处死后取肝脏组织进行HE染色,验证造模情况。
2.2 实验动物分组及给药方法 12周后,正常组大鼠普通饲料喂养同时每日生理盐水灌胃。高脂组大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱胶囊对照组(简称:对照组)、肝脂溶颗粒高、中、低剂量组(简称:高、中、低剂量组)。继续高脂饲料喂养同时每日给予不同药物进行灌胃(模型组:生理盐水灌胃1 mL/100 g;对照组:多烯磷脂酰胆碱胶囊水溶液灌胃,按0.14 g/kg体重给药;高剂量组:100%浓度肝脂溶颗粒水溶液灌胃,按3 g/kg体重给药;中剂量组:70%浓度肝脂溶颗粒水溶液灌胃,按2.1 g/kg体重给药;低剂量组:30%浓度肝脂溶颗粒水溶液灌胃,按0.9 g/kg体重给药)。连续灌胃4周后取材。
2.3 肝脏组织标本采集 腹主动脉取血处死大鼠,打开腹腔完整分离肝脏,快速取下肝脏组织一部分置于10%中性缓冲福尔马林溶液中(PH 7.4)固定,常规脱水后,石蜡包埋备用。……