奶花芸豆中凝集素的提取、纯化及鉴定

于雪慧,童军茂,张 建

(石河子大学食品学院,新疆石河子 832003)

奶花芸豆(Phaseolusvulgaris)属豆科芸豆属,一年生草本植物,因其豆皮整体呈乳白色,且带有紫色斑点,故得此名。奶花芸豆在我国东北、河北、云贵川、新疆等地区均有较大面积种植,其中新疆阿勒泰地区北屯市已将奶花芸豆发展成为当地的特色种植作物[1]。据测定,其种子中蛋白质含量23.1%,比谷物类高1～3倍,每100 g奶花芸豆中含有脂肪1.3 g,碳水化合物56.9 g,B族维生素的含量丰富[2]。

凝集素(Lectin)是含有一个或多个能够特异性识别并可逆性结合单糖或多糖的一类非免疫原性、非酶本质的蛋白质或糖蛋白[3],广泛分布于自然界的有机体中。目前,从动物、植物、微生物、病毒及真菌中均已经得到分离[4-5]。由于凝集素特异性的糖结合能力,导致其具有细胞凝集能力、诱导细胞凋亡和自噬能力、抗真菌、免疫调节、抗肿瘤、促进有丝分裂及生物固氮力等能力[6]。

目前已有从奶花芸豆中分离得到铁蛋白[7]、黄酮素[8]、多肽[9]等的报道,大量学者亦从大豆[10]、木豆[11]、绿豆[12]、刀豆[13]等豆科植物中分离得到凝集素[14],但尚未有从奶花芸豆中提取凝集素的相关研究。本文以新疆奶花芸豆为原料,采用水提法,从中分离出一种新型凝集素,利用单因素实验结合响应面实验对凝集素提取工艺进行优化,通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-50和DEAE-A50阴离子交换层析进一步纯化,并利用SDS-PAGE电泳、质谱/质谱联用(LC-MS/MS)技术进行蛋白鉴定,以期为豆类凝集素的开发利用和提高奶花芸豆附加值提供数据参考。……