李柏森 文敏 易红梅 姜鹤群
1电子科技大学医学院附属肿瘤医院,四川省癌症防治中心,四川省肿瘤医院放疗中心(成都 610041);成都医学院第一附属医院 2胸心外科,3肿瘤科(成都 610500)
宫颈癌为女性发病率第二高的恶性肿瘤,其病原体主要为高风险性的人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HPV)[1-2]。随着早期筛查的普及和治疗手段的丰富,宫颈癌患者的诊断和预后均得到了显著的提升。然而,宫颈癌发病机制仍不完全清楚,明确其发病机制,鉴定新的潜在治疗靶点具有重要意义。转化生长因子β(transforming growth factorβ)活化长链非编码RNA(long noncoding RNA)LncRNA-ATB(Lnc-ATB)是首个被发现可被转化生长因子活化的长链非编码RNA[3],研究发现Lnc-ATB在肾癌[4]、乳腺癌[5]和结肠癌[6]等肿瘤中异常高表达,并可通过吸附miR-200家族成员而促进肿瘤的侵袭和转移。然而,尚缺少关注Lnc-ATB在宫颈癌中细胞中的表达和作用的相关机制研究。本课题拟检测Lnc-ATB在宫颈癌细胞系中的表达,并明确Lnc-ATB在宫颈癌侵袭和转移中的作用及潜在机制。本研究结果首次证实了Lnc-ATB在宫颈癌细胞中高表达,并通过吸附结合miR-433促进宫颈癌细胞侵袭转移,为宫颈癌提供了新的分子靶点。
1.1 材料Trizol购买于美国Sigma公司;RNA反转录及QPCR试剂盒购买于日本TAKARA公司;Transwell小室购买于美国Millipore公司;细胞侵袭铺板用基质胶购买于美国BD公司;萤光素酶报告基因检测试剂盒购买于上海碧云天生物技术有限公司。
1.2 方法
1.2.1 RNA提取及反转录细胞培养过夜至汇合度80%,加入Trizol裂解。离心5 min,上清加入裂解液1/5体积的氯仿,用力振荡至充分乳化。……