北京地区新生儿细胞色素P450单核苷酸多态性及其代谢表型分布的研究*

郭九叶，耿珊珊，高月乔，孙志华

(北京市朝阳区妇幼保健院，北京 100026)

细胞色素P450酶(CYP450)是一组存在于生物体内的蛋白酶，可促进氧化、羟化、脱烷基和脱氨基等反应的发生，广泛参与体内物质及外源性药物和毒物的生物转化[1，2]。目前市场上90%以上药物的体内代谢由肝微粒体酶的CYP450家族完成，其中大部分是CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，CYP3A4和CYP3A5药物代谢酶参与代谢[3，4]，而单核苷酸多态性(SNP)造成的不同个体间CYP450基因型的异质性，引起CYP450酶活性差异，影响了相应药物在体内的代谢过程。临床上可根据CYP450基因不同亚型的基因型将人群划分为不同的代谢亚型[5]。国内已有CYP450酶基因型和代谢表型的研究报道[6～8]，但通常样本量较少且针对新生儿的研究鲜有报道，本文以北京地区新生儿为研究对象，分析了CYP450重要亚型基因型及代谢表型，为临床个体化用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2016年3月～2018年2月期间在北京市朝阳区妇幼保健院出生的新生儿共1 000例，其中男性548例，女性452例，所有研究对象均为汉族，其父母均签署知情同意书，于出生后72 h内取新生儿足跟血制作干血片。

1.2 试剂和仪器 干血斑基因组DNA提取试剂盒购自天根生物，Taqman引物及探针由英潍捷基合成，高速离心机购自Eppendorf公司，荧光定量PCR仪和微量核酸定量仪购自Thermo Fisher公司。

1.3 方法

1.3.1 基因组DNA提取：采用干血斑基因组DNA提取试剂盒对收集的样本进行提取，使用微量核酸定量仪测定其浓度和纯度。

1.3.2 SNPs位点基因分型：使用Taqman 荧光定量PCR方法在荧光定量PCR仪上对6个SNP位点进行基因分型检测，引物和探针序列见表1。……