乳腺癌患者血清miR-765，miR-200b水平检测及与临床病理学相关研究*

洪 宏，袁建芬，喻海忠

(南通市中医院检验科，江苏南通 226001)

乳腺癌是我国女性最常见的恶性肿瘤。高发病率、致死率，严重威胁女性身体健康[1]。早期确诊是提高患者生存率的关键。近年来，有大量研究表明，多种血清微小RNA(miRNA，miR)的异常表达与乳腺癌的发生、发展密切相关，对乳腺癌的早期诊断、预后评估、治疗等都有非常重要的意义[2，3]。miR-765和miR-200b参与乳腺癌的发生、发展[4，5]，但联合检测在乳腺癌诊断的临床价值及其与各临床病理特征间的关系还缺乏相关性研究。本研究应用实时荧光定量PCR的方法检测乳腺癌患者血循环miR-765和miR-200b的表达情况，并进行价值和相关性探讨，报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取本院2014年4月～2018年1月收治的初诊乳腺癌患者58例(乳腺癌组)，平均年龄48.2±7.1岁；乳腺良性疾病患者28例(乳腺良性疾病组)， 包括乳腺纤维腺瘤、囊性增生及乳头状瘤，平均年龄47.4±6.2岁。上述诊断均通过术前穿刺病理检查或术后病理切片确诊，临床病理资料完整，且均为女性。另选取30例健康体检妇女为对照组，并排除肝肾、心血管及乳腺等疾病，平均年龄48.7±7.2岁。各组在年龄、性别上差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 试剂和仪器 Cobas z 480荧光PCR仪采用瑞士Roche公司的产品，RNA提取使用美国Invitroge公司的产品，PCR试剂分别使用TaqMan MicroRNA RT kit试剂盒，TaqMan MicroRNA assay和QuantiTect SYBR®Green PCR Kits。

1.3 方法 分别采集患者术前及健康体检者空腹静脉血3 ml，静置30 min，1 500 g离心15 min分离血清，上清液于EP管中-70℃保存备用。RNA提取使用Trizol法，按试剂盒操作说明进行。用紫外分光光度计测定260 nm和280 nm波长下的光密度值，若A260nm/280nm在1.8～2.2间认为合格，RNA溶液无杂质，可进行RNA逆转录。根……