慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中NLRP3炎症小体表达水平的变化及意义*

杨文林，顾慧玲，倪红燕，王海峰

(上海市第一人民医院宝山分院呼吸科，上海 200940)

慢性阻塞性肺疾病(COPD)作为一种常见的呼吸系统疾病，患病率高，死亡率高，已成为一种公共卫生问题。流行病学数据显示，若不能及时采取有效措施，在未来20年内，包括COPD在内的慢性疾病所致疾病负担将超过50%，严重影响患者的生活质量[1]。COPD的发病机制尚未完全阐明，且无特殊有效的治疗方法。从本质上讲，COPD是由Th1因子介导，巨噬细胞、中性粒细胞，CD8+T细胞等多种炎性介质共同参与的气道、肺血管及肺实质慢性炎性反应，其发生与免疫反应细胞及其炎症介质、细胞因子和黏附分子密切相关[2]。近年来，NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体作为固有免疫系统的一种模式识别受体，与自身免疫疾病和感染性疾病的关系愈发引起关注[3，4]，但关于其在COPD的发生发展中的作用尚未明确。本研究通过建立COPD大鼠模型，分析NLRP3炎症小体在动物模型肺组织中的表达水平，探讨COPD的发病机制，为COPD的治疗提供新的思路和途径。

1 材料与方法

1.1 实验动物 Wistar健康雄性大鼠30只，鼠龄12周，体重200±20 g，由第二军医大学实验动物中心提供，在清洁的二级动物房中饲养。

1.2 试剂和仪器 大前门牌香烟(上海卷烟厂)；Trizol(美国Invitrogen公司)；Prime ScritTMRT Reaent Kit；ELISA试剂盒(美国 Blue Gene公司)；ABI 7300 型荧光定量PCR仪(Applied Biosystems公司)。

1.3 方法

1.3.1 分组及建立COPD大鼠模型：按随机数字表法分为吸烟组(n=20)和正常对照组(n=10)。吸烟组大鼠自实验第2天起置于自制箱(120 cm×80 cm×80 cm)内进行被动吸大前门牌香烟(焦油含量23 mg/支上海卷烟厂)，每天3次，第1天8支/次，第2，3天10支/次，第4天后15支/次，每次持续30 min，3次之间间隔至少3 h，连续75天。……