某规模化猪场PRRSV及葡萄球菌混合感染的诊断

邓珊珊，张 海，徐春志

（1．贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025；2．贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳，550081）

2017年12月贵州省某规模化猪场的仔猪出现严重腹泻、精神沉郁、呼吸急促、耳根皮肤呈紫色、病重仔猪很快死亡等临床症状。发病后该养殖场使用多类抗生素药物进行治疗后仍无明显效果。猪场送检2头发病严重仔猪到实验室确诊。为了弄清病因，采用流行病学调查、临床病理剖检、实验室诊断等方法，确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒及葡萄球菌混合感染。本病例就猪繁殖与呼吸综合征病毒及葡萄球菌的诊治过程进行总结和分析，现将病例报告如下。

1 发病情况

该规模化猪场总存栏数有5 000余头，发病猪有100头左右，病死率达50%，从2017年底开始出现有母猪流产、产死胎等现象；所产仔猪出现食欲减退、呼吸困难和腹泻等现象。发病后猪场兽医对仔猪使用青霉素、链霉素等药物进行治疗，但无明显好转，严重猪只很快死亡。

2 临床症状

通过畜主主诉了解到，该猪场仔猪最初的生长状况较好，之后相继出现精神沉郁、食欲减退、消瘦，行走无力，呼吸困难，猪只耳朵、腹部出现紫斑等症状；严重猪只很快死亡。

3 病理剖解变化

对送检病死的2头断奶仔猪进行剖检发现病死猪腹股沟淋巴结肿大（图1）；扁桃体肿大；肝脏表面有出血点（图2）；肺脏肿大充血、出血、水肿；肾脏肿大、有针尖大小出血点（图3）；脾脏充血、出血、有坏死斑点（图4）；肠系膜淋巴结肿大、出血、瘀血；病猪心包有大量积液。

图1 腹股沟淋巴结肿大

图2 肝脏有出血点

图3 肾脏针尖状出血点

4 实验室诊断

4.1 细菌的分离培养

图4 脾脏有坏死斑点

无菌取剖解的病死猪心脏、肝、脾、肺、肾接种于鲜血琼脂平板，分别在有氧和厌氧条件下37 ℃培养24 h，结果长出圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，不透明的菌落。挑取单个细菌落进行革兰氏染色及显微镜观察，油镜下可观察到革兰氏阳性球菌（图5），经生化实验鉴定为葡萄球菌。对分离细菌进行药物敏感性试验，结果显示复方磺胺间甲基嘧啶钠、多西环素、丁胺卡那等药物敏感。

4.2 病毒检测

图5 10×100油镜下革兰氏阳性球菌

分别取病死猪的脾脏、淋巴结、脑、肺脏等病料，研磨，离心提取上清，采用北京世纪元亨RNA提取试剂盒提取总RNA，分别应用针对猪瘟病毒（目的片段235 bp）、猪圆环病毒2型（目的片段 1 154 bp）、猪伪狂犬病毒（目的片段217 bp）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（目的片段436 bp）的特异性引物进行RTPCR扩增，产物通过1%琼脂糖凝胶电泳检测。猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型未扩增出特异性片段，送检样本中检出猪繁殖与呼吸综合征病毒病原核酸特异性片段，见图6。

图6 PRRSV PT-PCR检测结果

5 确诊

根据流行病学调查、临床症状观察、病理剖解症状、细菌分离、生化实验、病毒PCR/RT-PCR扩增，确诊该规模化猪场送检仔猪为猪繁殖与呼吸综合征病毒及葡萄球菌混合感染。

6 防治

首先将发病猪挑出，单独隔离饲养，建议紧急免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗，可加倍剂量注射；将病死猪及时进行无害化处理，对猪场环境进行消毒处理。注意饲养管理环节中饮水、饲料卫生；加强环境消毒，并注意防治、消毒药物的交替使用，避免产生耐药性；发病猪可参考细菌药敏试验结果使用复方磺胺间甲基嘧啶钠、多西环素、丁胺卡那等药物进行继发感染治疗，但要注意抗菌药物交替使用，防止产生耐药性。

加强管理，严格控制人员和物品的出入，各猪舍的饲养人员和兽医技术人员禁止相互串门。对猪舍、转猪的车辆、运动场地进行严格消毒，同时保证饮水干净。对新购买的猪只要加强隔离、检疫；各猪群要做好疫苗免疫，及时抽样检测血清抗体水平，对免疫不合格的要及时补免。猪场制定出生物安全管理制度，并严格执行。