胸腹水细胞块切片结合免疫组化用于病理诊断的价值体会

刘露露

271000泰安市妇幼保健院，山东泰安

胸腹腔积液属于临床发生率较高的一种疾病，表现出复杂的发病机制。对其良恶性实施判定，对于疾病的诊治及预后具有显著价值。在进行诊断期间，胸腹水脱落细胞学检查方法的应用较为普遍，但是细胞形态学的单纯采用无法对病理诊断准确性做出保证，并且对于正确诊断会产生一定程度的影响[1]。本次研究将探讨进行病理诊断期间胸腹水细胞块切片+免疫组化方法的应用可行性，为疾病临床顺利诊治奠定基础。

资料与方法

2017年1月-2019年2月 收 集 临 床送检胸腹水标本140 例，男90 例，女50 例；年龄19～73 岁，平均(45.29±2.35)岁。

方法：①合理展开常规细胞涂片操作：对140 例送检胸腹水标本，每例均约为100 mL，于阴凉位置保持5 min 静置，之后选择50 mL 自然沉淀标本于离心管中进行安置，之后保持2 500 r/min转速进行10 min 离心，并且将上清液进行吸出。选择沉淀物展开涂片操作，利用乙醇(95%)展开10 min固定操作，利用苏木素进行3 min染色。之后利用盐酸酒精(1%)进行5 s 分化，并且保持5 min 流水反蓝，5 s 伊红染色，进行1 次水洗；利用梯度酒精展开脱水操作，二甲苯透明以及中性树胶封片操作。安排高年资细胞病理医生2名展开涂片形态学观察[2-3]。②合理完成细胞沉渣切片制作：针对常规细胞涂片疑似的23 例恶性胸腹腔积液标本，将完成常规细胞学检查所剩余的细胞学标本于离心管(20～50 mL)移入，之后保持2 500 r/min 进行10 min 离心。完成后，针对上清液利用吸管吸掉，并且准备中性福尔马林(10%，20 mL)于含沉淀物离心管中加入，将振荡仪放入保持10 min 振荡。完成后，继续进行10 min离心，将上清液祛除，针对沉淀物利用镊子取出，并且利用擦镜纸进行包装。依据常规完成脱水以及透明等系列操作。如果胸腹水中表现出较多的血性成分，准备20 mL 乙醇混合液+冰醋酸加入，混合后展开离心操作[4-5]。③合理完成免疫组化染色操作：主要利用EnVision 两步法展开免疫组化操作，系列操作依据说明书严格展开。针对CK7 以及TTF-1 等进行检测。针对石蜡切片合理展开脱蜡至水操作，利用蒸馏水进行2～3 次清洗，时间为2 min。合理展开高压抗原修复操作。之后在室温(3%H2O2)条件下进行10 min 孵育，以将内源性过氧化物酶活性充分消除。利用PBS 进行2～3 次清洗，各控制5 min 时间。准备正常山羊血清封闭液进行滴加，于室温中进行10 min 放置，准备Ⅰ抗进行滴加，保证4℃过夜。阴性对照主要选择PBS 对Ⅰ抗进行代替，准备Ⅱ抗进行滴加，实施DAB染色以及苏木素复染操作。利用盐酸乙醇展开分化操作，之后展开切片脱水等系列操作[6]。

结 果

对于23 例疑似恶性胸腹水标本展开离心沉渣包埋以及完成免疫组织化学染色后发现，属于鳞状细胞癌4 例，腺癌12例，恶性间皮瘤1例，属于小细胞癌3例，属于反应性间皮细胞2 例，属于恶性淋巴瘤1 例。对患者实施细胞块切片HE染色，发现细胞呈现出丰富密集的特点，能够做到结构清晰以及染色分明，表现出一定的组织结构。通过实施免疫组织化学染色，表现出阳性信号定位准确的特点，并且呈现出背景干净以及对比度好的优点。

讨 论

临床在进行胸腹水脱落细胞检查期间，呈现出操作简易、方法简单以及经济快速的特点，于临床的应用率较为广泛。对患者实施常规胸腹水脱落细胞学图片检查，表现出较低的阳性率，并且对于系列病理，无法对其组织来源进行明确。针对典型细胞判断的准确性可以做出保证，但是有时往往表现出蜕变间皮细胞以及炎性胸腹水增生同腺癌细胞等呈现出混淆的现象，进而增加困难度。

在传统细胞涂片基础上实施细胞快切片，可以发挥显著辅助干预效果。并且将免疫组化方法同胸腹水细胞快进行结合，可以将常规细胞涂片表现出的系列不足进行有效补充。胸腹水细胞沉渣石蜡切片的有效应用，呈现出技术操作便捷的特点，不仅可以将胸腹水标本诊断效果显著提升，而且可以将细胞学诊断效果显著提升。完成细胞沉渣石蜡包埋处理后，能够确保同常规活检组织块相同展开连续切片操作；呈现出细胞比较集中的特点，能够将遗漏有效减少。通过蜡块完成的切片制作，可以将因为涂片过厚而造成的细胞成团、细胞重叠以及结构不清现象进行充分避免；此外，对于掉片现象可以充分避免。通过染色定位，呈现出可靠及准确的特点，因为背景清晰，从而可对诊断的准确性做出保证。此外，通过胸腹水沉渣蜡块，能够做到反复连续切片，能够依据诊断结果，合理完成免疫组化染色、细胞化学染色与原位核酸分子杂交染色等。

本次研究结果发现，对于23 例疑似恶性胸腹水标本展开离心沉渣包埋以及完成免疫组织化学染色后发现，鳞状细胞癌4 例，腺癌12 例，恶性间皮瘤1例，属于小细胞癌3 例，反应性间皮细胞2例，属于恶性淋巴瘤1例。对患者实施细胞块切片HE染色，发现细胞呈现出丰富密集的特点，能够做到结构清晰以及染色分明，表现出一定的组织结构。通过实施免疫组织化学染色，表现出阳性信号定位准确的特点，并且呈现出背景干净以及对比度好的优点。

综上所述，临床在实施胸腹水病理诊断期间，将细胞沉渣石蜡切片、免疫组化技术同常规胸腹水脱落细胞学检查方式进行充分结合，可以使得诊断效果显著提升，临床推广意义显著。