血清血脂及载脂蛋白浓度与乳腺癌分子分型及Ki-67表达水平的相关性研究

陈妮娜 范怡畅 尚 昆 杨 婧 曹邦伟

(首都医科大学附属北京友谊医院肿瘤中心，北京 100050)

近年来，癌症发病人数逐年增加，据统计[1]，乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤，2018年，美国约有26.6万患者被诊断为乳腺癌，4.1万患者死于乳腺癌，且乳腺癌的发病年龄进一步年轻化。进一步研究[2-3]显示，乳腺癌预后与雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2，Her-2)和Ki-67(细胞增生的核标志)有关。2013年，St.Gallen会议[4]提出根据上述4种分子标志，将乳腺癌临床病理分型为Luminal A型、Luminal B型、Her-2过表达型、三阴性乳腺癌4个类型，各分子亚型间在分子遗传学特征、发病年龄、临床特征、恶性程度、治疗敏感性及预后等方面均存在差异。循证医学证据[5-6]表明，血脂浓度与乳腺癌的发病有关，且在不同分子分型的乳腺癌中血脂浓度也不尽相同。本研究通过比较分析乳腺癌患者的血脂代谢水平，观察血清血脂及载脂蛋白浓度在乳腺癌不同分子分型的患者间的差异及与Ki-67表达水平的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

本研究选用2012年1月至2017年5月乳腺癌术后且未接受化学药物治疗(以下简称化疗)者为研究对象，入选标准：①所有病例均经术后病理确诊；②术前未使用降脂药物；③术前未行放射治疗与化学药物治疗(以下简称放化疗)与内分泌治疗；④排除糖尿病、冠状动脉粥样硬化性心脏病(以下简称冠心病)、肾脏疾病、代谢综合征等影响血脂代谢的疾病；⑤术后病理资料完整，包括：病理类型、ER、PR、HER-2、细胞增生标志(cell proliferation associated nuclear antigen, Ki-67)淋巴结转移等。参照2013年St.Gallen标准[4]，通过Ki-67、ER、PR、Her-2，将乳腺癌患者区分为Luminal A型和Luminal B型以及基底细胞样型乳腺癌(Her-2过表达型)和三阴型乳腺癌四大类。

1.2 方法

1.2.1 血脂监测

采集所有患者空腹静脉血，测定高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)、胆固醇(cholesterol，TC)和载脂蛋白B(apolipoprotein B，ApoB)、载脂蛋白A(apolipoprotein A，ApoA)及三酰甘油(triglyceride，TG)等数值测定，并对全部血清标本进行血脂监测。采用本院生化仪界定的血脂参考值范围：LDL-C 0～4.14 mmol/L，HDL-C 1.04～1.55 mmol/L，TG 0～1.71 mmol/L，TC 0～5.18 mmol/L，ApoA 100～205 mg/dL，ApoB 63～119 mg/dL。

1.2.2 Ki-67表达水平检测

采用免疫组织化学法EnVision二步法检测143例乳腺癌患者Ki-67水平，在细胞核中将颜色为棕褐色颗粒设定作阳性染色判定标准，运用分级方法，根据阳性细胞占比将已经被染色的细胞核分成0、1、2、3共4级，判定标准分别为阳性细胞总量占比为0～5%、6%～25%、26%～50%、超过50%，判定阳性率水平的标准如下：低表达判定标准为Ki-67<14%，高表达判定标准为Ki-67≥14%。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 病例临床特征

本研究共纳入143名乳腺癌患者，年龄32～75岁，平均年龄为(52.32±2.16)岁，所有患者都有生育史，没有家族癌症病史，4组患者年龄及绝经后人数构成，差异均无统计学意义，详见表1。

2.2 4组患者血脂浓度比较

除ApoA外，TC、HDL-C、LDL-C、ApoB及TG在各类分型的乳腺癌患者间的差异均有统计学意义(P<0.001)。HDL-C在Her-2过表达型患者明显低于Luminal A型和Luminal B型患者；LDL-C在Luminal A型明显低于Her-2过表达型及三阴型患者，在Luminal B型明显低于Her-2过表达型患者；TC在Her-2过表达型患者的浓度显然远超Luminal A型和Luminal B型患者；ApoB在Luminal A和Luminal B型明显低于Her-2过表达型患者。TG在Luminal B型患者中浓度最低，详见表2。

表1 四组患者临床特征比较Tab. 1 Clinical characteristics of four groups of patients

表2四组患者血脂浓度比较
Tab.2Bloodlipidlevelsinfourgroupsofpatients

ItemLuminal A(n=31)Luminal B(n=51)Her-2 overexpressing(n=33)Triple-negative(n=28)FPHDL-C/(mmol·L-1)1.15±0.36∗∗∗1.09±0.29∗∗∗0.88±0.260.89±0.158.052<0.001LDL-C/(mmol·L-1)0.39±0.41∗∗∗3.81±0.35∗∗∗4.72±0.544.11±0.49△△△619.032<0.001TC/(mmol·L-1)5.31±0.53∗∗∗5.41±0.62∗∗∗6.29±0.635.79±0.6418.523<0.001ApoB/(mg·dL-1)1.31±0.35∗∗∗1.29±0.23∗∗∗1.71±0.381.51±0.2914.764<0.001ApoA/(mg·dL-1)1.51±0.251.67±0.411.52±0.571.59±0.241.423>0.05TG/(mmol·L-1)2.69±0.24▲2.52±0.572.67±0.31▲2.79±0.26▲2.975<0.05

***P<0.001vsHer-2 overexpressing;△△△P<0.001vsLuminal A;▲P<0.05vsLuminal B；HDL-C：high density lipoprotein-cholesterol;LDL-C：low density lipoprotein-cholesterol;TC：cholesterol；ApoB：apolipoprotein B;ApoA：apolipoprotein A;TG：triglyceride.

2.3 乳腺癌患者血脂浓度与Ki-67水平相关性分析

在143例入选乳腺癌患者的Ki-67指数水平的监测中，高表达者96例(Ki-67≥14%)，低表达者47例(Ki-67<14%)。此后将血清血脂及载脂蛋白与Ki-67做相关性分析。Ki-67与LDL-C(r=0.868，P<0.001)、ApoB(r=0.835，P<0.001)、TC(r=0.897，P<0.001)呈正相关；与HDL-C(r=-0.821，P<0.001)呈负相关；与ApoA(r=0.073，P>0.05)、TG (r=0.098，P>0.05)无相关性，详见表3。

表3 乳腺癌患者血脂浓度与Ki-67水平相关性分析Tab. 3 Correlation between blood lipid levels and Ki-67 levels in patients with breast cancer

HDL-C：high density lipoprotein-cholesterol;LDL-C：low density lipoprotein-cholesterol;TC：cholesterol；ApoB：apolipoprotein B;ApoA：apolipoprotein A;TG：triglyceride.

3 讨论

脂质代谢异常与恶性肿瘤的相关性是近年来的研究热点，研究[7-9]表明血脂浓度与多种恶性肿瘤的发病和进展有关，尤其是乳腺恶性肿瘤。但目前有关血脂及载脂蛋白浓度与乳腺癌各分子分型之间的关联研究没有相关报道，本研究的主要目的是探讨和分析乳腺癌患者的血脂与其分子亚型之间的关联。

本文采用回顾性分析的方法，首先在143个罹患乳腺癌的患者中，笔者发现Ki-67与LDL-C、ApoB、TC浓度呈正相关关系；与HDL-C浓度呈负相关关系；与Apo-A、TG浓度无关联性。上述结果表明血脂浓度的异常程度与Ki-67呈正相关，提示血脂异常可能是乳腺癌患者预后不良的因素。

胆固醇常见于细胞膜内，也是构成生物膜的关键组分。体内的胆固醇浓度如果处于正常范围，能够在生理层面发挥巨大的作用，如果胆固醇浓度过高，人体免疫系统功能则将遭到抑制，免疫监视和免疫清除两种功能都会被进一步削弱[10]。另有研究[11]表明，他汀类降脂药物可明显降低乳腺癌患者的复发率，进一步研究[12]显示，口服亲脂性药物辛伐他汀可使患者乳腺癌复发的风险降低，而亲水性他汀类药物对乳腺癌复发无明显影响，该结论与笔者的研究结果相一致，三酰甘油也是体内重要的血脂成分，参与人体能量代谢，血清中至少75%的三酰甘油都是以极低密度脂蛋白胆固醇(very low density lipoprotein cholesterol，VLDL-C)和乳糜微粒(chylomicron，CM)形式运输[13]，既往研究[14]显示，乳腺癌患者血清TC及TG高于非乳腺癌患者，表明TG可能与乳腺癌的发生与进展有关。以上结论与本研究结果表明，定期对不同分子亚型的乳腺癌患者进行血脂检测分析，对乳腺癌的预后及监测复发有较为重要的指导意义。

细胞增生标志物Ki-67在正常和恶性组织中形成细胞分裂的组成部分，出现于细胞有丝分裂期[15]。Ki-67标记指数(Ki-67 labeling index)是原发性乳腺癌的一个预后因素[16-17]，Ki-67低表达的乳腺癌患者5年无病生存率和总生存率分别为87%和89%，而Ki-67高表达的患者无疾病生存率和总生存率分别为76%和83%[18]。本研究结果显示，LDL-C和TG与Ki-67的表达水平呈正相关，高水平的LDL-C及TG与乳腺癌患者的不良预后密切相关。

综上所述，本研究结果显示，TC、HDL-C、LDL-C及APo B与乳腺癌患者分子分型密切相关，由此可以推断，通过对乳腺癌不同分子分型患者的血脂浓度监测，对预测乳腺癌患者的预后，具有一定的临床指导意义，但能否作为预测乳腺癌预后的有效临床指标，以及是否可以通过对异常血脂浓度进行干预来改善不同分子亚型的乳腺癌患者的预后，还需进一步的大规模临床研究。