Alda-1通过激活线粒体乙醛脱氢酶2改善大鼠肺缺血再灌注损伤

张裕坚，林婷婷，夏芳芳，董娇娇，金周晟，刘乐

（温州医科大学附属第一医院 麻醉科，浙江 温州 325015）

肺缺血再灌注损伤（lung ischemia-reperfusion injury，LIRI）广泛存在于各种临床事件中，如肺栓塞、肺移植、体外循环术等，期间形成活性氧自由基、炎症级联反应、钙超载、细胞凋亡等一系列病生理过程，严重影响患者的预后[1]。线粒体乙醛脱氢酶2（aldehyde dehydrogenase 2，ALDH2）是机体内醛类物质代谢的关键酶，可将有毒性的醛类物质转化为无毒性的羧酸类物质起到解毒作用。近年来研究发现激活ALDH2 可减轻心[2-5]、脑[6]、肝[7-8]、肾[9]、肠[10]等脏器的缺血再灌注损伤。本研究在现有基础上，给予ALDH2 激动剂Alda-1对LIRI进行预处理，检测肺病理学、醛类物质和ALDH2，从而探求Alda-1减轻LIRI的保护作用。

1 材料和方法

1.1 材料健康成年SPF级雄性SD大鼠，体质量300～350 g，由温州医科大学实验动物中心提供，动物生产许可证号:SCXK（浙）2015-0001。丙二醛（malondialdehyde，MDA）测定试剂盒（硫代巴比妥酸比色法，南京建成生物工程研究所）；大鼠4-羟基壬烯醛（4-hydroxynonenal，4-HNE）ELISA试剂盒（上海研谨生物科技有限公司）；兔抗β-actin多克隆抗体（美国Abcam公司，货号:ab8227），兔抗ALDH2单克隆抗体（美国Abcam公司，货号:ab108306），ALDH2 活性比色法检测试剂盒（美国Biovision公司）；BCA蛋白浓度测定试剂盒（美国Thermo公司）。

1.2 方法

1.2.1 动物分组及构建大鼠LIRI模型:参考钱小英等[11]的方法复制大鼠在体LIRI模型，采用随机数字表法将大鼠进行分组，分为假手术组（Sham组）、肺缺血再灌注组（I/R组）和Alda-1预处理组（Alda-1组），每组8只。Sham组开胸后仅显露左肺门，但不进行结扎；I/R组开胸后阻断左肺门30 min，再开放恢复供血和通气120 min；Alda-1组于缺血前1 h腹腔注射Alda-1（6 mg/kg），其余同I/R组。实验结束取大鼠动脉血用于测MDA及4-HNE；……