同时检测茶叶中5种儿茶素和咖啡因的QuEChERS-HPLC方法研究

严开芹 曾小平 向君毅

摘 要：建立了一种同时测定茶叶中5种儿茶素儿茶素（C）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）以及表儿茶素没食子酸酯（ECG）和咖啡因的QuEChERS-HPLC方法。茶叶样品用70%甲醇水在70 ℃条件下水浴提取，混合使用25 mg乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）、200 mg十八烷基硅烷（C18）作为吸附剂，净化2 min;净化液过膜后采用Thermo Fisher Syncronis C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分离。以甲醇-1.25%乙酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为1 mL/min，测定波长278 nm。结果表明，5种儿茶素和咖啡因在各自相应的浓度范围内具有良好的线性关系（相关系数0.999 0～0.999 8），样品加标回收率为93.87%～107.37%，相对标准偏差为1.45%～11.85%。该方法操作简便、快速、准确，可满足茶叶中儿茶素和咖啡因的分析要求。

关键词：QuEChERS;高效液相色谱法;儿茶素;咖啡因

1 引言

茶多酚和生物碱是茶叶中重要的活性成分，儿茶素是茶多酚的主要成分，占茶多酚含量的60%～80%，也是主要的药理活性物质，具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖等作用[1-4]，其中儿茶素（C）、表儿茶素（EC）、表没食子儿茶素（EGC）、表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）与表儿茶素没食子酸酯（ECG）是影响茶叶品质和质量的重要指标，国家标准[5]对绿茶中以上5种儿茶素的含量进行了规定。咖啡因是生物碱的主要组成成分，是茶叶重要的风味物质和生理活性成分，具有消除疲劳、兴奋神经的作用[6]，但人体过量摄入会产生不良影响[7]，同时，咖啡因也是影响茶叶品质的重要指标，因而建立一种快速测定茶叶中儿茶素类和咖啡因的检测方法很有必要。

目前，国家标准和文献报道的儿茶素类和咖啡因的检测方法主要为高效液相色谱法（HPLC）[8-12]，但国家标准和一些文献报道的方法存在流动相复杂[13]、分析时间长和缺少样品净化步骤[14-15]等问题。……