浅析高效液相色谱法测定甘蔗及土壤中环嗪酮的残留量

臧稳

摘 要：环嗪酮作为一种除草剂，对于阻止杂草合成生长、防治甘蔗等作物的常见病虫害等均具有积极的帮助作用。在这一背景下，本文将结合相关研究资料，采用实验分析的方式，重点对高效液相色谱法测定甘蔗及土壤中的环嗪酮残留量进行简要分析研究。

关键词：高效液相色谱;甘蔗;土壤;环嗪酮

1 材料与实验

1.1 仪器与试剂

在本次实验中所选用的仪器，除了精准性较高的高效液相色谱仪这一主要仪器外，同时还使用了支持波长自动调节的可变紫外检测器，与专业的数据处理仪等相关仪器设备。在试剂选取中，本文所选择的实验试剂，主要包括用以两次蒸馏的水、含量为99%的环嗪酮标准品，级别均为分析纯的乙酸与邻苯二甲酸二乙酯，以及同为HPLC级的乙腈和甲醇。

1.2 色谱条件

在色谱条件中，本试验色谱柱为phenomenex C18 1500mm×4.6（i.d.）mm不锈钢柱，5μm且柱温控制在25℃。检测波长与流速分别设定为253nm与1mL/min。流动相即乙腈、甲醇和水、HAc的比例为15：30：55：0.5，设定环嗪酮保留时间为5min。

1.3 实验过程

1.3.1 样品提取

在提取甘蔗样品时，需在具塞容量瓶内，加入精准称取的10g完全粉碎的甘蔗样品，而后将50mL氯仿加入其中进行30min的振荡，在进行过滤后分别使用30mL氯仿提取两次。将所有提取液全部合并并将其置入150mL浓缩瓶中，在37℃的温度环境下对其进行减压浓缩直至接近完全干燥，最后对其进行相应净化处理即可。在提取土样样品时，则需要在离心管内加入精准称取的25g土样，随后分别将5mL与45mL的甲醇混合溶剂与乙酸乙酯加入其中，进行30min振荡提取。在将转速设定为4000r/min后进行5min的离心处理，取全部上清液。重新进行2次提取，将所有提取液合并置入150mL梨形瓶中，同样在37℃的温度环境下进行减压浓缩直至其接近完全干燥。使用N2将其吹干后用甲醇定容，最后进行相应的过滤处理。

1.3.2 样品测定

按照此次实验中的液相色谱条件，当仪器具有良好稳定性时，实验人员需进几针1μL标样溶液，并对每次响应值的比值进行精准测定。要求前后两次响应值之比的偏差变化不超过1.0%。此后实验人员需要按照先标样溶液后样品溶液、而后样品溶液最后标样溶液的顺序进行进样分析。对两针样品溶液与样品溶液之前、之后的两针标样溶液中，环嗪酮峰面积值进行计算。其计算公式如下：

在这一公式当中，X代表环嗪酮质量分数，其单位为%。S1与S2分别代表着标样溶液与试样溶液当中，环嗪酮峰面积值。m1与m2则分别代表环嗪酮标样与试样的质量，其单位均为g。标样当中环嗪酮标准品质量分数则用P进行表示[1]。

2 结果与分析

2.1 实验条件选择

在此次实验当中不仅使用了C18柱，同時还采用了腈基柱，当样品长度为150mm，C18柱的内径为4.6mm时，柱上出现了较好分离度。从价格角度看，因甲醇价格明显低于乙腈，因此实验开始时直接选择将甲醇与水作为流动相，但样品组分并未出现理想的分离度。此后实验人员选择直接将乙腈和水作为流动相体系，同样未发现环嗪酮与杂质具有良好分离度。经过综合考虑，实验人员最终选择将C18柱作为分离柱的基础上，将甲醇与水以及乙腈共同作为流动相体系，使得选择性在一定程度上得到了有效改善，主峰和杂质峰不仅在短时间内实现了分离，同时其分离度也相对较好[2]。在采用可变紫外检测器对环嗪酮标准品的波长进行扫描时，发现其紫外吸收在254nm处有最大吸收值，因此将254nm设定为紫外吸收波长具有较高的合理性。

2.2 分析方法线性关系

在本次实验中，实验人员分别选用了容量为10mL、20mL、50mL以及100mL和500mL的容量瓶，依次向各容量瓶内加入精准称取的0.040g环嗪酮土壤标准品和0.02g甘蔗标准品，并全部使用甲醇溶解稀释定容。前者的浓度范围在0.17g/L至0.05g/L之间，后者的浓度范围在0.40g/L至0.0080g/L之间。在现有色谱条件下，将横纵坐标分别设定为环嗪酮与外标峰质量比，以及峰面积比，根据得到的相应工作曲线图，可计算得到环嗪酮回归方程为Y=1.1564X+0.0033，其相关系数为0.9999，即表明本分析方法具有较高的可行性。

2.3 方法精密度回收率

在对土壤与甘蔗环嗪酮样品进行精准称取并平行测定各样品的含量之后，根据相关计算结果可知，甘蔗中的环嗪酮标准偏差为0.96%，土壤中环嗪酮标准偏差为1.10%。前者变异系数为0.58%，后者变异系数则为0.77%。实验中，通过将定量甘蔗内环嗪酮标准品与土壤内环嗪酮标准品，分别添加至有效成分含量已知且精准的样品中后，在不改变色谱条件的情况下进行测定，可知甘蔗内环嗪酮与土壤内环嗪酮的平均回收率各为99.6%与99.4%。

3 结语

本文通过采用高效液相色谱法测定甘蔗和土壤中的环嗪酮组分，根据最终的实验结果可知，使用高效液相色谱法不仅能够快速完成组分测定工作。同时其可以得到较为精准且可信度较高的分析结果，因此在其他组分测定中也可以选择合理使用这一分析方法。

参考文献：

[1]马建民，段素云，张凡建.高效液相色谱法检测奶牛血清中脂肪酸浓度[J].畜牧与兽医，2019，51（10）：62-65.