反流吸入对哮喘患者诱导痰促炎性IL水平的影响研究

何胜东，杨树栋，何新兵，张以昆，罗锦伟，黄志健

(广西中医药大学第一附属医院仙葫院区心肺病科，南宁 530023)

支气管哮喘是儿童和成人最常见的慢性非传染性呼吸道疾病之一，全世界约有3.34亿哮喘患者[1]。在发展中国家，哮喘患病率仍呈上升趋势。2010-2012年我国8个省市支气管哮喘流行病学调查结果显示14岁以上人群哮喘患病率约为1.24%[2]。促炎性白细胞介素(interleukin,IL)参与哮喘气道炎症的发生。胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)是导致哮喘的一种非常重要的原因或诱发因素[3]。胃蛋白酶是胃内容物的重要成分，被视为胃内容物检测的重要标志物。而痰液胃蛋白酶检测是一项客观诊断GERD气道微吸入的方法[4]。本研究旨在通过检测哮喘患者诱导痰胃蛋白酶和促炎性IL水平，明确GERD吸入是否通过增加气道促炎性IL水平影响哮喘气道炎症，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1-6月本院心肺科门诊的52例哮喘患者，其中男31例，女21例。哮喘诊断符合我国支气管哮喘防治指南哮喘的诊断标准[5]。

1.2方法

1.2.1肺功能测定 应用德国JAEGER公司Master Screen型肺功能仪测定哮喘患者肺功能。

1.2.2痰的采集、处理和质量控制 参照中华医学会呼吸病学分会哮喘学组咳嗽的诊断与治疗指南(2015)中高渗盐水雾化诱导痰炎性细胞检测方法[6]进行，留取诱导痰上清液，于-80 ℃冰箱冻存待测。

1.2.3ELISA法检测诱导痰胃蛋白酶水平 采用ELISA检测诱导痰上清液中胃蛋白酶，ELISA试剂盒购自武汉华美生物公司，严格按照相关试剂说明书操作。参照李湘平等[7]鼻腔分泌物检测标准，胃蛋白酶浓度大于0.108 1 ng/mL为阳性，反之为阴性。以胃蛋白酶阳性诊断胃食管反流吸入。

1.2.4ELISA法检测诱导痰IL-6、IL-8和IL-13水平 采用ELISA检测诱导痰上清液中IL-6、IL-8和IL-13的水平，ELISA试剂盒均购自武汉华美生物公司，严格按照相关试剂说明书操作。

2 结果

2.1男女哮喘患者反流吸入率比较 52例哮喘患者中15例哮喘患者诱导痰胃蛋白酶检测阳性，其中男8例，女7例。哮喘患者伴反流吸入的比例为28.85%(15/52)，其中男女反流吸入比率分别为25.81%(8/31)和33.33%(7/21)，二者比较差异无统计学意义(χ2=0.35，P=0.56)。

2.2男女伴反流吸入哮喘患者诱导痰胃蛋白酶水平比较 男性伴反流吸入的哮喘患者诱导痰胃蛋白酶水平为(67.61±13.68)ng/mL，女性为(71.89±10.81)ng/mL，二者比较差异无统计学意义(P=0.52)。

表1 哮喘患者临床特征比较

2.3有无反流吸入的哮喘患者临床特征比较 有反流吸入与无反流吸入哮喘患者年龄、BMI、FEV1和FEV1/FVC比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.4有无反流吸入的哮喘患者诱导痰IL-6、IL-8和IL-13水平比较 有反流吸入哮喘患者诱导痰IL-13、IL-6和IL-8水平显著高于无反流吸入哮喘患者，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 诱导痰IL-13、IL-6和IL-8水平比较

3 讨论

GERD是西方国家一种常见的慢性疾病，患病率高达10%～20%。我国GERD患病率低于西方国家，有研究统计为1.7%～7.3%[8-9]。因为临床研究受样本量和GERD诊断方法的影响，所以目前哮喘患者GERD的患病率的预计值差异很大，为30%～90%，其中隐匿性反流的患病率为9.6%～62.0%[3]。同时本研究还发现部分哮喘患者存在不同程度的反流微吸入。

性别可能是GERD的独立危险因素。FAKHRE[10]报道了伊朗女性GERD患病率明显高于男性。而本研究中男性和女性哮喘患者反流吸入率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。有Meta分析显示年龄和肥胖是GERD发病的危险因素[11]。而本研究中有反流吸入的哮喘患者与无反流吸入的哮喘患者年龄和BMI比较，差异均无统计学意义(P<0.05)。此外，与SACCO等[12]研究结果相似，本研究中有反流吸入的哮喘患者与无反流吸入的哮喘患者肺功能FEV1和 FEV1/FVC比较，差异也无统计学意义(P>0.05)。

哮喘和GERD相互影响。GERD可以诱发支气管痉挛，加重或促发哮喘，其机制涉及反流物微吸入、食道-迷走神经反射和食道神经源性炎症的形成。同时哮喘也可能引起GERD。一方面，哮喘患者因为胸腹腔压力差增加，更易出现反流症状；另一方面，哮喘药物(如β受体激动剂和茶碱)可以降低食管下段括约肌压力，促进反流[3]。

哮喘是一类异质性疾病，具有不同的表型，其发病机制涉及环境和机体的多重因素。根据气道潜在的炎症类型，哮喘可以分为高辅助性T细胞(Th)2型和低Th2型[13]。本研究发现，与无反流吸入的哮喘患者相比，有反流吸入的哮喘患者诱导痰中Th2型炎性因子IL-13及非Th2炎性因子IL-6和IL-8均明显升高。IL-6和IL-8可以诱导气道中性粒细胞募集，而IL-13则参与嗜酸性气道炎症的发生[13]。无论是中性粒细胞炎症，还是嗜酸性粒细胞炎症都可以增加气道高反应性和促进气道重塑[14]。胃、十二指肠内容物反流吸入气道后，胃酸、胃蛋白酶和胆汁酸盐等成分可以诱发炎症级联瀑布效应，促进气道炎症发生，损伤气道上皮[15]。在有类似哮喘症状的患儿中，有反流的患儿支气管肺泡灌洗液中IL-8和中性粒细胞水平明显高于无反流的患儿[12]。动物实验也证实GERD增加哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中IL-13和嗜酸性粒细胞水平[16]。

目前GERD的治疗方式主要包括生活方式的改变和以质子泵抑制剂为代表的抗反流药物治疗[17]。就哮喘症状控制而言，仅是部分患者在抗反流药物治疗中获益，部分患者抗反流药物治疗无效，甚至还有部分患者在抗反流药物治疗后出现哮喘症状加剧[18]。目前认为不伴有反流症状的未控制哮喘患者不应该抗反流治疗[19]，抗反流治疗对哮喘患者气道炎症和促炎性IL水平的影响亟待进一步研究。

综上所述,反流吸入可诱发气道炎症级联瀑布效应,导致IL-6、IL-8和IL-13等促炎性IL 水平上升,进而加重哮喘患者气道炎症。