血清微小RNA-302b在老年急性心肌梗死患者中的诊断价值

急性心肌梗死(AMI)发病急骤，病情进展迅速，致死率较高[1]。微小RNA(miRNA)对心肌细胞功能具有调节作用，有望成为诊断AMI的生物标志物[2]。近年来研究发现，miR-302b与心血管疾病关系密切，参与心肌损伤的发生发展，并起着重要的基因调控作用[3]。本研究通过检测老年AMI患者血清miR-302b的表达水平，分析其对AMI的诊断价值，旨在为老年AMI早期诊断提供参考依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2015年1月至2018年10月儋州市中医医院收治的老年AMI患者125例作为AMI组，其中男性79例，女性46例，年龄65～84岁，平均年龄(72.50±6.92)岁。纳入标准：(1)符合WHO心肌梗死诊断和治疗指南制定的标准[4]；(2)年龄≥65岁，且在发病12 h内采集血样。排除标准：(1)有陈旧性心肌梗死、慢性心力衰竭及心功能不全病史；(2)急性心肌炎，近期有脑血管事件；(3)肺源性心脏病、慢性阻塞性肺疾病、严重肝肾功能不全及自身免疫性疾病；(4)重度感染；(5)恶性肿瘤；(6)重大外伤及手术。另选取同期健康体检者56例作为对照组，其中男性36例，女性20例，年龄65～78岁，平均年龄(71.30±6.82)岁。本研究经医院伦理委员会批准，并与所有研究对象签署知情同意书。

1.2 观测指标

所有研究对象均空腹抽取静脉血5 mL，置于无抗凝剂的离心管中，离心分离血清，-80 ℃低温冰箱保存待测。应用TaqMan MicroRNA Reverse Transcription试剂盒逆转录已定量的RNA，选用 U6 作为内参，反应体系为 15 μL，反应参数为：16 ℃ 30 min；42 ℃ 30 min，85 ℃ 5 min。在ABI 7500型荧光定量PCR仪(美国ABI公司)上进行实时聚合酶链反应(RT-PCR)。采用TaqMan MicroRNA Assay试剂盒，反应体系为20 μL：TaqMan MicroRNA Assay 1.00 μL，cDNA 1.33 μL，TaqMan 2×Universal PCR Master Mix 10.00 μL，ddH2O 7.67 μL，混合后离心放入定量 PCR仪。扩增条件为：95 ℃预热10 min，95 ℃变性15 s，60 ℃退火60 s，45个循环，最后38 ℃延伸5 s，实验重复3次。以U6为内参照，采用2-△△Ct法计算miRNA的相对表达水平，其中△Ct=Ct目的基因-CtU6。……