西洋参颗粒剂的制备工艺研究

关洪斌,袁震徽，王振波，侯会芳，姜丽萍，张 莉*,黄建军*

（1.山东大学（威海）海洋学院，威海264209；2.威海博源园林管理有限公司，威海264211；3.参园庄生物科技股份有限公司，威海264211）

西洋参原产于美国、加拿大是五加科草本植物西洋参Panax quinguefoliumL.的根，中国在十八世纪开始引进并种植培养，我国中药学专家将西洋参定为补益壮体凉性中药,根据现代中医药理论及西药应用理论我国专家将其应与临床内热阴虚壮阳并且起到了很好的疗效和作用,之后花旗参逐渐成为一种名贵中药并且受到国内保健行业的追捧。现在我国东北、华北、西北也有栽培。

人参皂苷为西洋参中主要的有效药用成分，西洋参与人参所含有的皂苷元种类大体相同，两者所含有的挥发油及黄酮类物质也基本相似，基本为人参三醇以及人参二醇和齐墩果酸。但是因为人参所含有的人参三醇单体皂苷Fb1远不及西洋参中的含量，所以人参以及西洋参在应用以及主要疗效上各有优劣，两者不可代替各有特点。另外，西洋参含有假人参皂苷F11。

西洋参的疗效及临床应用与同为名贵中药的人参有相似之处，但仔细推究却各有不同。人参因为还有大量多糖及皂苷类成分因而可以助火提气，西洋参中多糖含量不及人参因此主要功效为降火滋阴。因此对症状为喉干口渴的津伤胃燥以及咳嗽贪多的肺阴不足有特别好的疗效。西洋参对失音喉干、烟酒过度、烦闷燥热及食欲消退有很好的疗效，此外对于夏季治理小孩烦躁热虚、食欲不振的症状，西洋参也非常适用。

西洋参是抵抗疲劳和增强记忆并对抗体内氧化的滋补良品，也可抑制中枢神经系统的兴奋性，可作为平心静气的保健产品；此外可以增加心脏肌肉以及血管的活动性，对于预防心脑血管疾病，预防高血压引起的脑溢血有一定疗效，此外还可以增加分泌肾上腺激素增强人体免疫调节能力；对于止血也有一定疗效，可以滋补养肾抗利尿。

1 仪器与材料

1.1 实验仪器

RE52-4旋转蒸发仪 （上海沪西分析仪器厂）；TDL-5台式离心机 (上海科兴仪器有限公司）；XW-80A漩涡混合器（上海精密科学仪器有限公司）；NDJ-1电热恒温水浴锅（北京医疗电子仪器厂）；722型紫外可见分光光度计 （上海光谱仪器有限公司）；AL204电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。

1.2 实验材料

西洋参、山楂、大枣、牛磺酸提取物（由扇贝中分离获得），葡萄糖适量。

1.3 实验试剂

乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠（分析纯）、芦丁对照品98%、75%乙醇（杭州永星五交化有限公司）。

2 实验方法

2.1 中药有效组分提取工艺的筛选（L9(33)正交实验）

以重要成分的提取率为考察指标，以溶剂量及煎煮次数和煎煮时间三因素为考察因素，用来确定制剂组方中有效药用成分最佳提取工艺。实验因素如表1所示，正交实验设计如表2所示。

表1 正交实验因素水平

表2 正交实验设计方案

按照制剂组方配比，称取西洋参3.0g，山楂9.0g，大枣3.0g，为1剂,共9剂，按表1,2进行正交实验，制得干膏称重，计算提取率。

2.2 药材单独煎煮与混合煎煮有效组分提取率的比较

称取西洋参3.0g，山楂9.0g，大枣3.0g为1剂，共称取2剂，其中1剂各味药材分别煎煮，另外1剂各味药材混合煎煮，煎煮方法按照正交实验结果提供的最佳提取工艺流程，最后称定两份干膏重量，计算提取率。重复三次，取平均值。

2.3 颗粒剂的制备[1]

2.3.1 处方

西洋参3.0g，山楂9.0g，大枣3.0g，牛磺酸提取物0.1g。

2.3.2 制备

将中药材提取液浓缩至流浸膏（相对密度1.1～1.2,50℃），加入牛磺酸提取物0.1g和适量葡萄糖粉制成软材，制粒，干燥，整粒，分剂量装袋，即得。

2.4 质量标准的制定

2.4.1 性状

2.4.2 检查：粒度、水分、溶化性、装量差异。

2.5 含量测定

2.5.1 总黄酮含量测定

芦丁标准液的制备：将芦丁对照品于烘箱中105℃恒重6h，精密称取30.0000mg，75%乙醇50mL溶解后定容至100mL容量瓶中，摇匀，备用。

2.5.2 标准曲线的绘制

取16支试管，出去空白实验不做平行实验外其余5组每组做三次平行实验，试添加量按表1添加，于500nm处测定吸光度，记录数据见表3。

表3 制备标准曲线试液(单位:ml)

以Y-吸光度值（A）对X-取样量（mL）进行线性回归，其回归方程为 Y=0.1263X-0.1347（R2=0.9995），实验数据表明芦丁的检测质量在0.17～1.50 mg范围内线性关系良好。

2.5.3 供试品溶液的制备

精密称取中浓度的西洋参颗粒制剂样品(过40目筛)1.0000g，置50mL具塞锥形瓶中，分别加入75%乙醇30mL，密塞超声30min，重复提取三次后，将各提取液合并，摇匀并抽滤后转移到100mL容量瓶中定容，作为供试品溶液备。

2.5.4 样品的测定

分别吸取供试品液1.0mL于25mL容量瓶中，用体积分数75%乙醇动容至5.0mL，加入质量分数为5%的亚硝酸钠溶液15.0mL，不停摇动直至均匀后静置5min；加入质量分数为10%的硝酸铝溶液1.0mL不听摇动直至均匀后静置5min；加入质量分数为4%的氢氧化钠溶液10mL，再加体积分数为75%的乙醇定容至25mL，充分摇动直至均匀后静置20min。以75%乙醇为空白对照液，分别于500nm波长处测定吸光度。每组做三次平行实验，计算总黄酮的含量。

2.6 方法学考察

2.6.1 线性关系考察

精密量取芦丁标准品溶液 0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，移入25mL容量瓶中，分别加入体积分数为75%乙醇至5.0mL，再加入质量分数为5%的亚硝酸钠溶液1.0mL，充分摇动直至均与后静置5min；加入质量分数为10%的硝酸铝溶液1.0mL，充分摇匀静置5min；加入质量分数为4%的氢氧化钠溶液10.0mL，再加体积分数为75%的乙醇定容至25mL充分摇匀后静置20min，平行3次。以75%乙醇为空白对照液，于500nm波长处测定吸光度。并以Y-吸光度值（A）对X-取样量（mL）进行线性回归。

2.6.2 回收率实验

精密称取西洋参颗粒制剂样品1.0000g 5份，分别加入0.30mol/mL的芦丁对照品溶液2.0mL，制备样品并测定。

2.6.3 精密度实验

精密称取西洋参颗粒制剂样品1.0000 g，按样品测定操作制备黄酮待测溶液，连续测5次，测得吸光度并计算含量。

2.6.4 稳定性实验

精密称取中浓度的西洋参颗粒制剂样品1.0000g，按样品测定操作制备黄酮待测溶液，每隔10min测一次吸光度，记录在60min内的吸光度值。

2.6.5 重复性实验

精密称取中浓度的西洋参颗粒制剂样品1.0000g，按样品测定操作制备黄酮待测溶液，重复5次，进行测定，测得吸光度并计算含量。

3 结果与分析

3.1 正交实验结果

根据正交实验可以判断三个因素对提取率的影响依次为A＞B＞C，最优组合为A3B3C3，即8倍量的溶剂煎煮3次，每次2h。

3.2 药材单独煎煮与混合煎煮有效成分提取率的比较

单独煎煮提取率：22.98%；混合煎煮提取率：22.89%。从结果来看，单独煎煮的提取率稍高，但两者相差并不大。可采用混合煎煮以节省资源和时间。

3.3 质量标准的制定

3.3.1 性状

本品为棕色至棕褐色颗粒，味甜。

3.3.2 检查

3.3.2.1 粒度

无法通过一号筛孔以及可以通过五号筛孔的颗粒及粉末占成品颗粒的9.13%，符合药典规定的15%，故对该颗粒粒度规定为：无法通过一号筛和能通过五号晒的粉末和颗粒共占成品颗粒的10%。

3.3.2.2 水分

颗粒水分含量为4.7%，小于药典规定的6.0%。故对该颗粒的水分规定为其含水量不得超过5.0%。

3.3.2.3 溶化性

颗粒在5min内全部溶化，溶化性好。

3.3.2.4 装量差异

10袋样品中，有1袋少于标示量3.94%，有1袋少于表示量4.20%，其它均合格，装量差异符合药典标准。

3.3.3 含量测定

总黄酮含量测定，结果见表4。

表4 西洋参颗粒制剂总黄酮含量分析结果

3.4 方法学考察

3.4.1 线性关系考察

其回归方程为Y=0.1263X-0.1347（R2=0.9995），实验数据表明芦丁检测质量在0.17～1.50 mg范围内线性关系良好。

3.4.2 回收率实验平均回收率为101.18%，RSD=0.99%(n=5)。

3.4.3 精密度实验：RSD=1.32%(n=5)。

3.4.4 稳定性实验：RSD值分别为1.62%（n=7）。

3.4.5 重复性实验：RSD=1.59%(n=5)。

4 讨论

4.1 正交实验设计筛选制备工艺。在制备西洋参颗粒剂的整个过程中，首要的也是最重要的一个步骤就是如何能将中药中的有效组分提取出来，传统的煎煮方法给了我们一些启示，尽管不一定是最好的，但几百年甚至几千年的经验证明它们是有效的。不同的药材对煎煮条件有不同的选择，因此在常用的条件组合中，采用正交实验设计筛选出其中最好的一种。针对该处方的四味药材而言，加8倍量的溶剂煎煮3次，每次2h是最佳提取工艺。

4.2 药材单独煎煮和混合煎煮后有效组分的提取率以及成分本身的变化。从提取率方面来考察，两者相差并不大。至于功效方面，有待进一步探索。

4.3 制定质量标准。以有效成分总黄酮含量指标对制剂进行质量控制。

4.4 本产品具有可以保持人体正常血压以及预防动脉粥样硬化，防止心脑血管疾病的独特疗效，制作工艺简单，产品易于保存，增加了西洋参深加工产品品种，利于工业化生产。将中药组方制成颗粒剂是中药现代化的一种尝试，它克服了传统服用方法上的缺陷，将现代剂型与古老的中药组方相结合，有利于推动中药的现代化、国际化。