鸢尾黄素对MG63骨肉瘤细胞凋亡和自噬作用的研究①

王金莲 陈 路 余孟英 何江涛

(川北医学院附属医院骨外科,南充 637000)

骨肉瘤是最常见的原发性骨癌之一，在患者中表现为成骨细胞分化癌和恶性骨样癌，常见于儿童和青少年[1]。骨肉瘤属于遗传不稳定且高度恶性的骨间充质肿瘤，其特征在于染色体结构改变。目前，治疗骨肉瘤通常采用化疗和放射疗法进行治疗和预防肿瘤扩散，由于骨肉瘤患者对化疗的抵抗力、预后不良、远处转移等原因，患者5年生存率约为20%[2]。由于经传统外科手术、新辅助化疗后患者生活质量降低、肿瘤易复发等情况，骨肉瘤的治疗进展缓慢[3]，因此，探寻用于骨肉瘤的新型有效疗法十分迫切。鸢尾黄素(Tectorigenin，TEC)是从射干[Belamcanda chinensis(L.)Redouté]中提取的一种有效成分,是一种天然的异黄酮。鸢尾黄素具有抗炎、抗增殖、抗氧化活性等多种药理作用[4]，结构图如图1所示。鸢尾黄素已被发现对乳腺癌、肺癌、睾丸癌、肝细胞癌、前列腺癌和白血病具有治疗作用。已有研究表明鸢尾黄素可以抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭[5]。本文旨在研究鸢尾黄素对MG63骨肉瘤细胞凋亡和自噬作用的影响。

图1 鸢尾黄素化学结构Fig.1 Chemical structure of Tectorigenin

1 材料与方法

1.1材料 鸢尾黄素(67359)购自美国Sigma-Aldrich,化学式：C16H12O6，分子量：300.26。Roswell Park Memorial Institute 1640(RPMI1640)培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、青-链霉素溶液购自美国Gibco公司。MTT检测试剂盒、Hoechst双染试剂盒购自南京建成生物工程研究所。抗Beclin-1、p62、LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、cleaved caspase-3、Pl3K、AKT、mTOR购自美国Abcam公司。Bax、Bcl-2、GAPDH购自Santa cruz。BCA蛋白浓度测定试剂盒、免疫荧光染色试剂盒购自上海碧云天生物技术研究所。

1.2方法

1.2.1细胞培养 人成骨肉瘤MG63细胞……