HIF-2α、CD73、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

田玉增 (新疆喀什地区第一人民医院，新疆 喀什 844000)

我国肺癌发病率与死亡率均排第一位，包括原发性肺癌非小细胞肺癌与小细胞肺癌，其中非小细胞肺癌占80%～85%，非小细胞肺癌包括鳞癌、腺癌、大细胞癌、低分化或未分化癌。HIF是缺氧诱导因子，既往研究显示其表达在肿瘤细胞增殖、转移的过程中发挥重要的作用，其可能参与肿瘤的血管生成、细胞分化、细胞代谢等过程[1]。CD73在人体多种组织细胞表面广泛表达，有研究显示CD73在缺氧情况下发挥免疫抑制作用，有研究证实其在肺癌的发生发展中也发挥着一定的作用[2-3]。Ki-67是一种核抗原，在细胞G1、S、G2和M期出现，可准确反映细胞增殖活性，广泛应用于多种肿瘤增殖活性的测定[4-5]。本研究探讨HIF-2α、CD73、Ki-67在非小细胞肺癌中的表达及临床意义，以期为临床提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料：选择2016年7月～2019年6月在我院诊断治疗的非小细胞肺癌患者100例为研究对象。纳入标准：①年龄≥18周岁；②病理确诊为非小细胞肺癌；③手术治疗，术前未行放化疗治疗；④行Ki-67、CD73、HIF-2α检测；⑤临床资料完整，对治疗知情同意。排除标准：①小细胞肺癌；②术前放化疗治疗；③合并其他系统肿瘤。100例患者中男61例，女39例，年龄48～73岁，平均(64.4±5.5)岁；其中肺腺癌74例，肺鳞癌26例；TNM分期：Ⅰ期65例，Ⅱ期22例，ⅢA期13例。

1.2检验指标及方法：肿瘤组织送病理，采用免疫组织化学检测HIF-2α、CD73以及Ki-67的表达。Ki-67阳性为细胞核棕色颗粒；HIF-2α着色定位在肿瘤细胞细胞质，呈棕黄色或者黄色颗粒，部分细胞核可见染色；CD73定位在细胞膜上，棕黄色或者黄色颗粒，少部分细胞质也可染色。阳性标准采用免疫反应积分的方法，每例随机观察5个高倍视野，每个视野计数100个细胞。肿瘤细胞染色强度评分：0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色。阳性细胞百分比评分：0分为阴性，1分为≤10%，2分为11%～50%，3分为51%～75%，4分为>75%。最终评分为染色得分×阳性细胞得分：弱阳性(+)1～4分，中等阳性(++)5～8分，强阳性(+++)9～12分。

1.3统计学方法：采用SPSS15.0统计学软件对数据进行分析，计数资料用率(%)表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1非小细胞肺癌HIF-2α、Ki-67以及CD73阳性表达：100例患者中CD73有25例呈强阳性，37例呈中等阳性，11例呈弱阳性，总阳性率73.0%；HIF-2α 16例呈强阳性，33例呈中等阳性，17例呈弱阳性，总阳性率66.0%。Ki-67 23例呈强阳性，38例呈中等阳性，14例呈弱阳性，总阳性率75.0%。

2.2不同临床特征患者Ki-67阳性表达率：腺癌、中低分化、淋巴结转移N1～N3、肺癌分期ⅢA期的患者Ki-67阳性表达率更高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.3不同临床特征患者HIF-2α阳性表达率：腺癌、中低分化、淋巴结转移N1～N3、肺癌分期ⅢA期的患者HIF-2α阳性表达率更高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.4不同临床特征患者CD73阳性表达率：淋巴结转移N1～N3、肺癌分期ⅢA期的患者CD73阳性表达率更高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

3 讨论

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,已成为我国城市人口恶性肿瘤死亡原因的第1位。非小细胞型肺癌包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌，与小细胞癌相比其癌细胞生长分裂较慢,扩散转移相对较晚。非小细胞肺癌约占所有肺癌的80%，约75%的患者发现时已处于中晚期，5年生存率很低。

表1 不同临床特征患者Ki-67阳性表达率[例(%)]

临床特征例数阳性(n=75)阴性(n=25)χ2值P值性别男6144(72.13)17(27.87)0.6870.407女3931(79.49)8(20.51)年龄≥60岁5843(74.14)15(25.86)3.3840.050<60岁4232(76.19)10(23.81)组织类型腺癌7464(86.49)10(13.51)20.0280.000鳞癌2611(42.31)15(57.69)分化程度高分化7644(57.89)32(42.11)11.9940.001中低分化3431(91.18)3(8.82)淋巴结转移N03113(41.94)18(58.06)26.1960.000N1～N36962(89.86)7(10.14)肺癌分期Ⅰ级6544(67.69)21(32.31)6.7300.035Ⅱ级2218(81.82)4(18.18)ⅢA级1313(100.00)0(0.00)

表2 不同临床特征患者HIF-2α阳性表达率[例(%)]

临床特征例数阳性(n=66)阴性(n=34)χ2值P值性别男6140(65.57)21(34.43)0.0130.910女3926(66.67)13(33.33)年龄≥60岁5837(63.79)21(36.21)0.2990.584<60岁4229(69.05)13(30.95)组织类型腺癌7459(79.73)15(20.27)23.9090.000鳞癌267(26.92)19(73.08)分化程度高分化7636(47.37)40(52.63)16.3470.000中低分化3430(88.24)4(11.76)淋巴结转移N03110(32.26)21(67.74)22.7940.000N1～N36956(81.16)13(18.84)肺癌分期Ⅰ级6533(50.77)32(49.23)19.4990.000Ⅱ级2220(90.91)2(9.09)ⅢA级1313(100.0)0(0.00)

表3 不同临床特征患者CD73阳性表达率[例(%)]

临床特征例数阳性(n=73)阴性(n=27)χ2值P值性别男6144(72.13)17(27.87)0.0600.807女3929(74.36)10(25.64)年龄≥60岁5835(60.34)23(39.66)11.2210.001<60岁4238(90.48)4(9.52)组织类型腺癌7454(72.97)20(27.03)0.0010.992鳞癌2619(73.08)7(26.92)分化程度高分化7655(72.37)21(27.63)0.0640.800中低分化2418(52.94)6(47.06)淋巴结转移N03111(35.48)20(64.52)32.0850.000N1～N36962(89.86)7(10.14)肺癌分期Ⅰ级6542(64.62)23(35.38)13.4290.000Ⅱ级2218(81.82)4(18.18)ⅢA级1313(100.00)0(0.00)

Ki-67是在细胞G1、S、G2和M期出现的核抗原，由于其半衰期短，可以准确反映细胞的增殖活性，已广泛应用于多种肿瘤增殖活性测定[6-7]。Ki-67在多种肿瘤细胞中均有表达，研究显示其在宫颈上皮内瘤变(CIN)-1中的阳性表达率为57.1%，在CIN-2阳性表达率为76.9%，在CIN-3阳性表达率为81.8%；在子宫鳞癌与腺癌中Ki-67的阳性表达明显增强，并且在腺癌中的表达93.8%要高于鳞癌中的88.5%；在本研究中也显示肺腺癌中的表达要高于肺鳞癌，并且与肿瘤细胞远处淋巴结转移、临床分期密切相关。

HIF-2α是在缺氧状态下特异性发挥活性的核转录因子，调控多种靶基因的转录，生物学效应多，在多种缺氧性疾病的发生发展过程中均发挥着显著的作用[8-9]。HIF-2α可集合HRE后启动靶基因的表达能力，例如血管内皮细胞生长因子、葡萄糖载体蛋白、肾上腺髓质素、白细胞介素、脂肪细胞分化相关蛋白。肿瘤细胞生长发育过程中消耗大量的能量，其中脂类通过氧化磷酸化分解是重要的能量来源之一，HIF-2α在该代谢途径中发挥重要的作用。研究证实，在多种肿瘤中HIF-2α均呈高表达，通过调控血管生成、细胞增殖、肿瘤干细胞等多方面参与肿瘤的发生及发展过程。在本研究中，非小细胞肺癌HIF-2α呈高表达，并且腺癌中的阳性表达率更高，并且与患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移等相关。

CD73是胞外5′-核苷酸酶，锚钉在细胞膜外，在多种肿瘤组织中呈现高表达。其高表达可促进肿瘤增殖，与肿瘤分期、预后密切相关。其可参与嘌呤核苷酸代谢以及补救合成途径，还是一种免疫信号负调控分子，可催化形成免疫抑制性介质腺苷，有利于肿瘤细胞的逃逸[10]。目前的研究认为靶向CD73可能具有抗肿瘤的作用，是一种肿瘤生物免疫疗法。在本研究中CD73在非小细胞肺癌中呈高表达，并且与患者的临床分期以及淋巴转移有关。

综上所述，非小细胞肺癌组织中HIF-2α、CD73、Ki-67均呈高表达，腺癌中Ki-67、HIF-2α表达更高，而CD73的表达与病理类型无明显的关系，淋巴结转移、肺癌分期与三者的表达均有一定的关系。