白色念珠菌的快速检测技术开发*

石星亮,余一海,陈 静,谭有将,梁德智

1.广东省佛山市顺德区北滘医院检验科,广东佛山 528311；2.广东省佛山市顺德区创新设计研究院,广东佛山 528311；3.广东省佛山市顺德区墨赛生物科技有限公司,广东佛山 528311

近年来,真菌感染，尤其是侵袭性真菌感染的发病率呈逐年上升趋势,而白色念珠菌作为条件致病菌,是临床上最常见的致病菌。但是,目前检测白色念珠菌主要以常规培养为主,此过程耗时费力,且检出率相对较低。因此,快速、准确地从临床标本中检测白色念珠菌对疾病的早期诊断及治疗极为重要。本研究开发了一种能快速准确检测临床血清中的白色念珠菌抗原的方法,现报道如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 100份健康体检者的血清标本及10份经荧光PCR核酸扩增法确认的白色念珠菌阳性的标本为广东省佛山市顺德区北滘医院临床送检标本。

1.2仪器与试剂 白色念珠菌单克隆抗体及抗原购自广州万翎生物科技有限公司；羊抗鼠IgG购自洛阳市佰泰科生物技术有限公司；红色微球购自上海辉质生物科技有限公司；NC膜(型号HF135)购自美国Milipore公司；白色念珠菌标准菌株ATCC10231购自广东环凯微生物科技有限公司；其他化学试剂为分析纯或者化学纯。 美国BioDot公司 XYZ3060三维喷点平台购自百道贸易(上海)有限公司。

1.3方法

1.3.1红色微球标记抗体结合垫制备 参考文献[1]的方法制作时间分辨荧光抗体结合垫,于相对湿度(RH)为30%～40%的环境下保存备用。

1.3.2包被抗体NC膜制备 参考文献[1]的方法制作NC反应膜,于RH为30%～40%的环境下保存备用。……