红花黄素A 调控核受体TR3 胞内移位抑制氧化应激对心肌细胞的损伤

骆杰炉 梁 俭 梁文能

（广州中医药大学第一附属医院 药学部， 广东 广州510405）

氧化应激是心肌缺血后导致病情恶化的关键因素之一，心肌在缺血供氧不足的情况下，由于侧支循环再灌注，在恢复供氧的过程中产生大量氧自由基，超出细胞清除氧化物的能力，从而导致心肌组织进一步损伤和凋亡［1］。有研究表明，核受体TR3（Thyroid-steroid receptor 3，TR3） 的胞内定位与氧化应激对细胞的损伤有着密切关系，TR3 从细胞核移位至线粒体是促进心肌细胞凋亡的重要机制［2-3］。

红花Carthamus tinctorius L.属于菊科植物，作为药材最早见于东汉张仲景的《金匾要略》，记载其有活血化瘀、行气通脉的功效［4］。红花色素是药材红花的主要活性成分，包含有多种水溶性查尔酮成分，其中红花黄色素A 占比最高，目前已提取制作成单一成分的注射液在临床上主要用于治疗稳定型心绞痛等心血管疾病，具有显著的疗效［5］。研究表明，红花黄色素A 能够抑制缺氧再灌注过程中产生的氧自由基的水平，降低氧化应激对心肌细胞的损伤，但其具体作用机制尚未完全明确［6］。本研究以H2O2模拟氧自由基对H9c2 心肌细胞的氧化应激损伤，研究红花黄色素A 对TR3 的胞内定位及凋亡信号通路的影响［7］，进一步阐明红花黄色素A 保护缺血心肌的作用机制。

1 材料

1.1 药物与试剂 红花黄素A（批号111637-201812，纯度＞99.0%）、4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（4′，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI，批号023K1925）、TritonX-100（批号118K0177） 购自美国Sigma 公司；CCK-8 试剂盒（批号KTC011001购自日本Dojindo Lab 公司；高糖DMEM 培养基（批号966185）、特级胎牛血 清（FBS，批号1315148） 购自美国Gibco 公司；BCA 蛋白定量试剂盒（批号P0019）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA，批号S0131）、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD，批号S0101） 检测试剂盒购自碧云天生物技术研究所；……