醒脑益智汤对AD 模型小鼠tau 蛋白及Aβ 表达的影响

殷 紫 张二飞 邓祥敏 张建华 季润元 韩永红 齐 越

（1.江苏护理职业学院 检验药学系 江苏 淮安223001； 2.江苏食品药品职业技术学院 江苏 淮安223001；3.辽宁中医药大学附属第二医院 辽宁 沈阳110034）

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD） 是一种进行性神经退行性疾病，病理特征在于细胞内神经原纤维缠结，细胞外淀粉样蛋白斑块沉积和神经元丢失，以及诸如学习、记忆障碍等。越来越多的研究表明，β-淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ） 沉积是AD 发病机制中最早和最重要的事件，并且在疾病的发展中其表达不断增加［1-2］，tau 蛋白的磷酸化，可加速AD 脑内Aβ 的沉积［3］，因此，抑制Aβ 沉积和tau 蛋白磷酸化，将有易于AD 的治疗。醒脑益智汤是辽宁省中医研究院的临床经验方，具有健脾益肾填精、除痰、化痰之功效，临床应用疗效较好，但具体作用机制尚不明确。因此，本实验以AD 模型小鼠为研究对象，从Aβ 沉积和tau 蛋白磷酸化2个方面，考察醒脑益智汤对AD的治疗作用及其相关机制。

1 材料

1.1 动物 SPF 级ICR 雄性小鼠，8 周龄，体质量（20±2） g，总共114 只，购自辽宁长生生物技术有限公司，生产许可证号SCXK（辽） 2010-0001，在辽宁中医药研究所实验动物中心饲养，使用许可证号SYXK（辽） 2010-0003。

1.2 药物与试剂 醒脑益智汤主要由茯苓、人参、知母、菖蒲、牛膝等组成，用10 倍量的水浸泡400 g 药材30 min，煮沸，用文火煎煮药材45 min；过滤出汤药，剩余药渣加入8 倍量水，沸腾，用文火煎煮20 min，过滤出汤药，将2 次药液合并，即得1.02 g 生药／mL 药液。Aβ1-42试剂盒（小鼠，货号842401，美国Cusabio 公司）；Aβ1-40试剂盒（小鼠，货号842301，美国Cusabio 公司）；Aβ25-35（批号A4559，美国Sigma 公司）；硫黄素S 染色（批号T1892，美国Sigma 公司）；盐酸多奈哌齐片［批号B14202012042，规格10 mg／片，卫材（中国） 药业有限公司提供］；……