G蛋白偶联雌激素受体在猪不同大小卵泡的分布与表达

苗懋东，倪珺，石凤垚，李文慧，蔡云栋，芮荣

(南京农业大学动物医学院，江苏 南京 210095)

在雌性动物发情周期，卵母细胞随卵泡发育产生相应变化，只有卵泡内激素和其他细胞因子达到合适水平，卵母细胞才能重新获得成熟分裂的能力进而发育成熟，其中雌激素的调节至关重要。G蛋白偶联雌激素受体(GPER)是一种通过磷脂酰肌醇激酶(PI3K)作用的细胞内跨膜雌激素结合受体[1]。已有GPER在小鼠发情周期的卵巢分布和表达的相关报道，证实其分布和表达量变化与卵泡发育过程及发情周期中雌激素的变化规律基本一致[2]。在山羊卵巢的研究中，GPER广泛分布于发情周期中奶山羊各级卵泡，并不同程度地参与了卵泡成熟[3]。此外，也有研究表明GPER在小鼠下丘脑和猪垂体等部位均有表达，提示其可能参与了动物发情周期和腺垂体内分泌的调节[4-5]；但迄今未见GPER在猪卵泡中表达与作用的报道。本试验旨在研究GPER在猪不同大小卵泡卵母细胞的分布与表达，以期为后续试验和相关研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 猪不同大小卵泡COC与卵泡壁的采集

从南京元润食品有限公司下属屠宰场采集猪卵巢，置于37 ℃含1 000 U/mL青、链霉素无菌生理盐水中，2 h内送达实验室。将卵巢放入玻璃表面皿中，实体显微镜下分别剥离直径小于3 mm、3～5 mm及大于5 mm健康完整有腔卵泡，用无菌眼科剪与眼科镊撕开卵泡壁释放卵泡液及COC，轻刮卵泡内壁确保COC从卵泡壁分离。将各组卵泡壁保存于液氮中用于GPER蛋白表达分析；……