分枝杆菌培养系统分离诺卡菌的应用分析

沈晖，邬靖敏，宁兴旺，李军，王斌，陈东科(.长沙市第一医院检验科，长沙 0005；.湖南中医药大学第一附属医院检验科，长沙 0007；.中南大学湘雅医院检验科，长沙 0008；.北京医院检验科，北京 0000)

诺卡菌对培养基无特殊选择性，血琼脂、巧克力琼脂、缓冲活性炭酵母提取物琼脂等均可用于分离培养。为了提高诺卡菌的检出率，来自呼吸道含有诺卡菌的标本，可采用低pH(pH2.2)的HCl/KCl溶液进行预处理，亦可同分枝杆菌(Mycobacterium)培养方法用氢氧化钠-N-乙酰-L-半胱氨酸(NaOH-NALC)预处理标本。而提高诺卡菌属细菌培养阳性率的关键是掌握NaOH-NALC试剂暴露时间(15 min)，这同样适用于分枝杆菌分离培养[1]。本研究拟探讨分枝杆菌培养系统应用于诺卡菌分离的可行性。

1 材料与方法

1.1标本来源 2018年1月至2019年4月长沙市第一医院住院及门诊患者中临床疑似肺结核或肺部感染性疾病并按医嘱采集自然咳出晨痰或支气管肺泡灌洗液进行分枝杆菌培养的标本6 592份。标本来源分布为呼吸科2 387份、结核科2 385份、艾滋病科965份、心内科13份、内分泌科19份、血液肿瘤科16份、其他科室807份。

1.2主要试剂与仪器 NaOH、枸橼酸钠、磷酸盐缓冲液(天津恒兴化学试剂公司)，N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC,BIOTAL公司)，哥伦比亚血培养基、罗氏固体培养基(江门凯林公司)，萋-尼氏抗酸染色液(珠海贝索公司)；Bact/ALERT 3D全自动分枝杆菌培养监测系统及分枝杆菌培养瓶(MP培养瓶)、分枝杆菌抗生素补充检测试剂盒、Vitek MS质谱仪及Vitek MS分枝杆菌/诺卡菌试剂盒(法国生物梅里埃公司)，BSC-1500 ⅡB2-X生物安全柜、QP-80恒温培养箱(济南鑫贝西生物公司)，Veriti 9902 PCR扩增仪、3730XL基因测序仪(ABI公司)，LEICA DM3000显微镜(德国莱卡公司)。……