13种呼吸道病原体多重检测试剂的性能验证*

吕园，邬兰，张秀梅，徐秋爽，张健，李萍，王海鹏，俞杨(南京市第一医院 南京医科大学附属南京医院核医学科实验诊断部，南京 210006)

性能验证指使用某特定检测试剂或系统的实验室按照所提供的试剂盒或检测系统说明书使用时，能复现生产厂家所宣称的检测性能。中国合格评定国家认可委员会(CNAS)2019年2月15日发布并实施CNAS-GL039：2019《分子诊断检验程序性能验证指南》[1]。本研究参照其要求，以13种呼吸道病原体多重检测试剂盒(PCR 毛细电泳片段分析法)说明书中的性能指标作为验证结果的判断标准，进行方法符合率、检出限、交叉反应和抗干扰能力4个方面的性能验证。

1 对象与方法

1.1对象 (1)方法符合率样本：经测序确认的分别包含13种病原体(甲型流感病毒、腺病毒、博卡病毒、鼻病毒、甲型流感病毒H1N1、副流感病毒、衣原体、偏肺病毒、乙型流感病毒、肺炎支原体、季节性H3N2病毒、冠状病毒、呼吸道合胞病毒)的临床咽拭子样本。(2)检出限样本：定值标准物质样本[参考品，由国家参考品(中国食品药品检定研究院)、慢病毒载体和质粒混合而成，包含所有13种病原体]。(3)交叉反应样本： 经测序确认的、包含7种病原体(包括表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、解脲支原体、巨细胞病毒、EB病毒)，但不包含待测试剂盒13种病原体的临床咽拭子样本。(4)抗干扰能力验证样本：经测序确认的弱阳性临床咽拭子样本2例(副流感病毒HPIV和冠状病毒HCOV)。测序工作委托上海生工生物公司完成，使用Sanger测序方法。……