王英华,杨海波,宋 丹,刘 敏,方先珍,闫若潜
(河南省动物疫病预防控制中心,河南 郑州 450008)
根据农业部《全国小反刍兽疫消灭计划(2016-2020年)》要求(以下简称《计划》),到2020年,力争全国达到小反刍兽疫非免疫无疫区标准。笔者总结了河南省2016-2018年小反刍兽疫免疫抗体和病原学监测情况,为河南省制定退出小反刍兽疫免疫计划和逐步消灭小反刍兽疫提供数据支持,监测结果报告如下。
1.1 供试羊 2016-2018年对河南省18个省辖市羊场按一定比例采集羊血、鼻咽拭子、病料组织进行实验室血清学和病原学检测。
1.2 被检血清 采集免疫过小反刍兽疫疫苗的羊血,颈静脉采血,分离血清,于-20 ℃保存备用。
1.3 棉拭子、病料组织的采集 对病死或扑杀的动物,取脾脏、肺脏、淋巴结等组织25~30 g,置于50 mL 离心管中,备用;对待检的活羊,取眼鼻分泌物或鼻咽拭子置于灭菌甘油生理盐水。-70 ℃冰箱冷冻保存,待做小反刍兽疫病毒核酸检测。
1.4 检测试剂 小反刍兽疫抗体检测试剂盒(ID Screen PPR Competition),由法国ID-VET生产;小反刍兽疫病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒,由北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产。
1.5 方法 按照《GB/T27982-2011 小反刍兽疫诊断技术》进行。抗体检测用竞争ELISA方法;病毒核酸检测用实时荧光定量PCR方法。严格按照小反刍兽疫抗体竞争ELISA试剂盒说明书和小反刍兽疫实时荧光定量PCR说明书进行操作和结果判定。
2.1 血清学监测情况 2016年共检测羊血清学样品1 596份,平均免疫抗体合格率77.84%。2017年共检测羊血清样品66 326份,个体合格率82.01%;覆盖2 524个场(户),场群合格率84.39%。……