妊娠高血压综合征早期肾损伤患者血清FGF23和Klotho的水平及意义

陈雅纯 黄惠莹 陆艳梅 黄伟诗

妊娠期高血压综合征简称妊高征，是妊娠过程中特有疾病，多发生在妊娠20～24周，孕妇多出现水肿、高血压、蛋白尿等临床症状，可累及全身多种器官，尤其肾损伤[1]。我国发病率9%～12%，是可能导致母婴死亡的常见疾病之一[2]。有研究发现，临床常发妊高征并发急性肾衰竭导致孕妇死亡病例，严重危害围产期孕妇健康[3]。因此，对妊高征患者肾损伤早期进行诊断十分重要，在肾功能损伤可逆期进行干预，对改善患者预后意义重大。成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23，FGF23)是一种新型血磷调节因子，是监测慢性肾病进展的一个重要指标。Klotho蛋白是FGF23信号通路中重要辅助因子，研究发现Klotho与慢性肾衰竭患者并发症发生有关[4]。本研究通过观察FGF23和Klotho在妊高征孕妇血清中的表达水平，探讨其对妊高征早期肾损伤的临床诊断意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1月至2019年5月在我院建档妊高征孕妇120例为研究对象。根据《妇产科学》第8版妊娠高血压疾病的诊断与分类标准[5]，依据胱抑素C(CysC，正常参考值0.63～1.25 mg/L)、尿β2微球蛋白(β2-MG，正常参考值<2.97 mg/L)及尿微量白蛋白(UmAb，排出量正常范围<30 mg/L)结果分为单纯高血压组(A组，患者3项指标均正常)和妊高征并发早期肾损伤组[B组，患者符合尿微量白蛋白(umALB)、CysC、β2-MG均大于参考值范围]。其中A组68例，年龄22～34岁，平均年龄(27.53±5.69)岁；孕周27～40周，平均(34.87±4.96)周。B组52例，年龄23～34岁，平均年龄(28.75±6.15)岁；孕周27～40周，平均(35.68±5.39)周；另以同期于我院建档的正常妊娠女性72例为对照组，年龄22～34岁，平均年龄(27.65±5.95)岁；孕周26～40周，平均(35.37±6.25)周。所有样品采集及资料调查取得患者及其家属知情同意并签字确认，本研究经过医院伦理委员会批准通过。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：①符合《妇产科学》妊高征诊断标准的患者[5]；②孕妇均为初产、单胎妊娠；③孕妇妊娠周龄>20周；④自愿配合治疗调查研究者。

1.2.2 排除标准：①孕前患有原发或继发性高血压、心脏病、糖尿病等患者；②有严重免疫系统及急性或慢性肾脏疾病患者；③建档资料不完整者；④孕妇年龄>35岁者。

1.3 方法

1.3.1 血清FGF23和Klotho蛋白水平检测:采集所有孕妇禁食12 h后第2天清晨(8∶00～10∶00)空腹静脉血3 ml，及时(1 h内)完成血清分离置于-80℃冰箱保存备用；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清FGF23(批号：PA5-18636)和Klotho(批号：MA5-30453)水平，试剂盒购自美国Invitrogen公司。

1.3.2 相关指标检测:采用日立7600全自动生化检测仪分析所有孕妇血清CysC、β2-MG、UmAb、总胆固醇(total cholesterol，TC)、空腹血糖(fasting blood glucose，FPG)、血肌酐(serum creatinine，SCr)、尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、高敏C-反应蛋白(high sensitivity C reactive protein，hs-CRP)水平。

2 结果

2.1 3组妊娠女性一般情况比较 对照组、A组、B组患者年龄、孕周、体重指数(body mass index，BMI)、FPG含量比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较，A组、B组患者血清CysC、β2-MG、UmAb、TC、SCr、BUN及hs-CRP水平显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)；与A组比较，B组患者血清CysC、β2-MG、UmAb、TC、SCr、BUN及hs-CRP水平显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 3组妊娠女性血清FGF23、Klotho水平比较 与对照组比较，A组、B组患者血清FGF23水平显著升高，Klotho水平显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与A组比较，B组患者血清FGF23水平显著升高，Klotho水平显著降低，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 3组妊娠期女性一般临床资料比较

见表2。

表2 3组妊娠女性血清FGF23、Klotho水平比较

2.3 妊高征并发早期肾损伤孕妇血清FGF23、Klotho水平相关性分析 Pearson相关性分析结果显示，妊高征并发早期肾损伤孕妇血清FGF23、Klotho水平呈负相关(r=-0.482，P<0.05)。见图1。

2.4 妊高征并发早期肾损伤孕妇血清FGF23、Klotho水平与肾损伤相关指标的相关性分析 采用Pearson相关性分析结果显示，血清FGF23水平与CysC、β2-MG、UmAb水平呈正相关(r=0.416，0.529，0.423，P<0.05)，血清Klotho水平与CysC、β2-MG、UmAb水平呈负相关(r=-0.452，-0.456，-0.485，P<0.05)。见图2、3。

图1 妊高征并发早期肾损伤孕妇血清FGF23、Klotho水平相关性分析

图2 妊高征并发早期肾损伤孕妇血清FGF23水平与CysC、β2-MG、UmAb水平相关性分析

2.5 血清FGF23、Klotho水平对妊高征早期肾损伤的诊断价值分析 分别以血清FGF23、Klotho水平及二者联合检测为检验变量绘制ROC曲线，结果显示，血清FGF23、Klotho水平诊断妊高征并发早期肾损伤的AUC分别为0.797、0.749，截断值分别为0.472、0.421，灵敏度分别为0.615、0.885，特异度分别为0.857、0.536；二者联合诊断妊高征并发早期肾损伤的AUC为0.893(Z=2.219,P=0.027;Z=3.328,P=0.001)，灵敏度为0.885，特异度为0.750。见表3，图4。

3 讨论

妊高征是一种妊娠期特有疾病，常发于妊娠中晚期，临床表现多样，可累及全身多种器官，尤其是肾脏[7]。其原因主要是，孕妇全身小动脉尤其是肾小动脉痉挛收缩，血管周围阻力增大，血管内皮细胞发生损伤，血管通透性增加，导致体液、尿蛋白增加，大量尿蛋白渗漏会进一步加重肾脏损伤[8,9]。因此对妊高征肾损伤患者进行早期诊断及预防非常重要。目前，临床传统检测患者血SCr、BUN等指标评价肾功能损伤。但肾脏是一个代偿功能很强的器官，肾功能受损早期，SCr和BUN升高并不明显；当检测到SCr、BUN水平超出正常范围时，肾脏滤过率已下降50%，患者肾损伤程度已非常严重[10]。因此，寻找对早期妊高征疾病肾损伤简单且敏感的检测指标有非常重要的临床意义。

本研究结果发现，对照组、单纯妊高征组(A组)、妊高征并发早期肾损伤组(B组)孕妇年龄、孕周、BMI、FPG含量差异均无统计学意义(P>0.05)，提示3组患者有可比性。A组、B组孕妇血清CysC、β2-MG、UmAb、TC、SCr、BUN及hs-CRP水平显著高于对照组，且B组孕妇血清CysC、β2-MG、UmAb、TC、SCr、BUN及hs-CRP水平显著高于A组，提示依据临床检测相关指标分组合理。FGF23属于成纤维细胞生长因子家族，在成骨细胞中表达，可随血液循环到达肾脏，在Klotho分子协同下与其相应受体结合，可调节甲状旁腺激素分泌、维持机体正常钙磷水平等生物学功能[11]。李静等[12]研究发现，FGF23在慢性肾病患者血清中水平升高。Tranaeus等[13]研究发现，在儿童慢性肾病中，FGF23和Klotho水平随着进展性肾功能衰竭而升高和降低。本研究结果发现，与对照组比较，A组、B组孕妇血清FGF23水平显著升高，Klotho水平显著降低，且B组孕妇血清FGF23水平显著高于A组，Klotho水平显著低于A组，与上述研究结果一致，提示血清FGF23、Klotho水平可能与妊高征并发肾损伤有关。

图3 妊高征并发早期肾损伤孕妇血清Klotho水平与CysC、β2-MG、UmAb水平相关性分析

表3 血清FGF23、Klotho水平对妊高征早期肾损伤患者的诊断价值分析

图4 血清FGF23、Klotho水平对妊高征早期肾损伤诊断的ROC曲线

有研究报道，肾脏是唯一清除CysC的器官，CysC水平升高可反映肾小球滤过率变化[10]。β2-MG 与肾小球滤过功能呈负相关，肾小球滤过功能减退时，血清β2-MG 水平升高[2]。在肾小球受损时，血清中UmAb水平升高，是一种诊断肾功能的灵敏指标[14]。胡坤等[15]研究发现，慢性肾病患者血清FGF23水平显著升高、Klotho水平显著降低，且随肾损伤进展程度升高和降低，二者呈负相关。本研究结果发现，妊高征并发早期肾损伤孕妇血清FGF23、Klotho水平呈负相关，血清FGF23水平与CysC、β2-MG、UmAb呈正相关，Klotho水平与CysC、β2-MG、UmAb呈负相关，提示，血清FGF23、Klotho水平可能与妊高征并发肾损伤发生发展有关，有潜力成为妊高征并发早期肾损伤的监测指标，但有待进一步探究。

本研究ROC曲线分析结果显示，血清FGF23、Klotho水平联合诊断妊高征并发早期肾损伤的AUC为0.893，显著高于二者单独检测时(分别为0.797、0.749)，其灵敏度为0.885，特异度为0.750。提示，联合检测血清FGF23、Klotho水平可提高对高症并发早期肾损伤的诊断价值，可为临床判断提供参考。

综上所述，妊高征早期肾损伤患者血清FGF23高表达、Klotho低表达，二者呈负相关，联合检测对妊高征早期肾损伤有一定诊断价值。但由于本研究样本量少，范围局限，结果具有一定局限性，血清FGF23、Klotho水平诊断妊高征早期肾损伤的最佳截点还需加大样本量扩大规模进一步研究。