柴发永
(山东省食品药品审评认证中心,山东 济南 250014)
大豆异黄酮是大豆中一种类雌激素结构的天然活性成分,具有多方面的保健功效。研究显示,大豆异黄酮具有预防骨质疏松、抑制肿瘤及抗衰老等生物学作用[1]。本文主要研究其促进免疫力的功效作用。
大豆异黄酮胶囊,0.3 g/粒(每粒含大豆异黄酮50mg),每日1粒。
SPF级昆明种雌性小鼠[选用北京华阜康生物科技股份有限公司,许可证号:SCXK(京)2014-0004],平均体重20g,每组10只。
实验设计人体推荐剂量的5倍,10倍,30倍,设置为低、中、高剂量组,即每日25 mg/kg、50 mg/kg和150 mgkg(即大豆异黄酮4.16 mg、8.33和25.14 mg/kg)。用5%羧甲基纤维素钠溶液配制成相应浓度的受试物溶液,每日经口给予一次,灌胃体积为10 ml/kg。同时设置模型组和对照组,用5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,灌胃体积与受试物组相同,连续31 d。各组均给与维持饲料。除空白对照组,其余各组小鼠于灌胃第25、27、29 d腹腔注射环磷酰胺制造免疫力低下模型[2]。
1.4.1 脏器指数的测定
实验结束后,小鼠称重,脱臼处死,取脾脏和胸腺称重,计算脏器指数。脾脏指数=脾脏/体重;胸腺指数=胸腺/体重。
1.4.2 迟发型变态反应实验
取羊血,生理盐水洗涤三次,每只鼠腹腔注射2%绵阳红细胞溶液(V/V)0.2ml,致敏后4 d,测量左后足趾部厚度。
1.4.3 碳粒廓清能力的测定
小鼠称重后,根据体重尾静脉注射印度墨汁(稀释至浓度为0.05 mL/10gBW)。墨汁注入后,立即计时。从注射墨汁2 min、10 min两个时间点分别眼眶静脉取血20 μL,然后加到3.0 mL 0.1%碳酸钠溶液中。在600 nm波长处测定光密度值(OD),以0.1%碳酸钠溶液作为空白对照。……