母乳中脂溶性维生素的HPLC法建立及前处理方法

刘慧敏，聂琴，黄召，杨梦竹，吴梦迪，曹晓琴

江汉大学医学院（武汉 430056）

脂溶性维生素是机体生命活动所必需的营养物质[1-2]，但这些营养素储存在肝脏和脂肪组织中并且消除较慢，过量摄入FSV可能会对人体造成危害[3-4]。而母乳作为婴儿的主要营养供给，其维生素的含量对母乳的成分组成十分关键[5-7]。母乳中的脂溶性维生素的测量对于保证母乳品质非常重要。

文献通常采用高效液相色谱（HPLC）法[8-11]或荧光检测分析[12]或液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法[13]分析食品中的脂溶性维生素。考虑到维生素在母乳中的含量一般在毫克与微克之间，所以试验采用简单快速的HPLC进行检测。然而由于母乳基质的复杂性，不同稳定性使脂溶性维生素的提取过程至关重要，母乳中脂溶性维生素常被包被在脂肪或脂溶性杂质中，对脂溶性维生素的测定造成极大干扰[14-16]，此外，如果应用的提取方案无法有效去除脂质，高脂肪含量会影响色谱效率，缩短色谱柱寿命，降低分析物回收率。因此，对母乳中的脂溶性维生素前处理方法进行探究具有重要意义。文献中最常用的方法为热皂化法[17]。然而由于脂溶性维生素的不稳定性，容易受到光、氧、热和酸碱因素的影响，热皂化法容易导致维生素D及类胡萝卜素的异构化以及维生素K4和叶黄素的降解[6]。随着技术的不断革新，对于基质中的脂溶性维生素的提取有了更多选择。低温酶解皂化技术、液液萃取、固相萃取和超临界流体萃取技术使得脂溶性维生素的提取效率明显提高[18]。……