芪术抗癌方对肝癌细胞上皮间质化的影响

冯文杏， 胡锐， 孙新锋， 韩志毅， 马文峰， 张卫， 周小舟

（广州中医药大学第四临床医学院，广东深圳 518033）

原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，异质性强，死亡率高。约90%与癌症相关的死亡是由转移性疾病而不是原发性肿瘤引起的[1-2]。侵袭性肿瘤前缘细胞多表现出一种去分化的形态，这种形态是由上皮标志物和细胞与细胞间连接的丢失引起的，并获得间叶细胞标志物的表达[3-4]，这种细胞表型的转变程序称为上皮间质化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）。上皮间质化与多种肿瘤功能相关，包括肿瘤的发生、恶性进展、肿瘤的干性、肿瘤细胞的迁移、侵入血管、转移和对治疗的抵抗等方面[5]。中医学无“肝癌”病名，根据相关症状其隶属于“鼓胀”“肝积”“肝胀”等范畴，在病因病机上存在正虚邪实的特点。基于这一特点，周小舟主任在临床中运用芪术抗癌方治疗肝癌获得了良好的疗效[6]，但其机制尚不明确。因此，本研究通过体外实验探讨芪术抗癌方对肝癌HepG2 细胞上皮间质化的影响，以期为其临床应用提供理论依据，现将研究结果报道如下。

1 材料与方法

1.1细胞株人肝癌细胞株HepG2购自武汉博士德公司。

1.2试剂与仪器转化生长因子β1（TGF-β1）（美国R&D 公司）；E 钙黏蛋白（E-cadherin）抗体、N 钙黏蛋白（N-cadherin）抗体、Vimentin 抗体、Snail 抗体、纤黏蛋白（Fibronectin）抗体（美国Abcam 公司）；GAPDH 抗体、β-actin 抗体（美国Sigma 公司）。ChemiDocTMMP 全自动凝胶成像和化学发光图像分析系统、垂直电泳仪、转膜仪（美国Bio-Rad公司）；倒置显微镜（日本Nikon公司）。

1.3芪术抗癌方冻干粉浸提液制备芪术抗癌方由黄芪10 g、炒白术15 g、柴胡5 g、白芍10 g、薏苡仁30 g、淮山药15 g、鸡内金10 g、莪术10 g、白花蛇舌草15 g、炙甘草5 g 组成，各中药材冻干粉由深圳市中医院制剂科制备。……