利拉鲁肽对糖尿病小鼠肝糖异生关键酶PEPCK 及G6pase 的表达影响及机制探讨

杜国慧刘博伟尹福在齐曦明范冬梅

(1.承德医学院,河北承德 067000; 2.河北省秦皇岛市第一医院内分泌二科,河北 秦皇岛 066000;3.河北省秦皇岛市第一医院中心实验室,河北秦皇岛 066000)

糖尿病作为慢性代谢性疾病,随其发病率的飙升[1],已越来越受人们的关注,其发病病理生理机制主要表现在胰岛素的缺乏和胰岛素抵抗两个方面。 其中肝的胰岛素抵抗与2 型糖尿病的发生发展息息相关,肝糖代谢的紊乱主要通过肝糖原合成及糖异生来影响葡萄糖代谢。 CUL4a—DDB1 连接酶复合物是一类E3 泛素连接酶复合物,可以通过对底物进行泛素化修饰,从而改变蛋白功能或促进被修饰蛋白的降解,DNA 损伤结合蛋白1(DDB1)是DDB1- cul4a 连接酶复合物的支架组分[2-4]。

本课题旨在探讨GLP-1 受体激动剂利拉鲁肽对糖尿病小鼠肝E3 泛素蛋白酶DDB1 及肝糖异生的影响及可能的机制,为 GLP-1 受体激动剂在T2DM 等代谢性疾病治疗中的应用提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物

SPF 级,雄性 KK-Ay 糖尿病小鼠 10 只,11 ～ 12周,体重为33～35 g;SPF 级,雄性 C57 小鼠 5 只 11～12 周,体重为26～28 g,均购自北京华阜康生物科技股份有限公司[SCXK(京)2019-0008],实验在天津南开大学医学部免疫实验组[SYXK(津)2017-00005]进行。 实验经天津南开大学伦理管理委员会审核(201907-001),对实验小鼠在实验过程中的所有处置均按国家《实验动物管理条例》的规定执行,并按实验动物使用的3R 原则给予人道的关怀。

1.2 主要试剂与仪器

利拉鲁肽注射液购自诺和诺德制药有限公司;RIPA 裂 解 液、 PMSF、 SDS-PAGE 制 胶 盒、 TBS(20X)、TRIS Base、Glycine、SDS(十二烷基磺酸钠)、Tween20、脱脂奶粉(Skim Milk)均购自索莱……